绑定机构
扫描成功 请在APP上操作
打开万方数据APP,点击右上角"扫一扫",扫描二维码即可将您登录的个人账号与机构账号绑定,绑定后您可在APP上享有机构权限,如需更换机构账号,可到个人中心解绑。
欢迎的朋友
万方知识发现服务平台
获取范围
  • 1 / 100
  (已选择0条) 清除 结果分析
找到 2599 条结果
[硕士论文] 王志敏
生物化学与分子生物学 内蒙古大学 2018(学位年度)
摘要:皮肤缺损是临床上最常见的疾病之一,大面积皮肤缺损会严重影响人体健康,乃至危及生命。在皮肤损伤创面修复的研究中发现:细胞治疗法可加快皮肤损伤的修复的进程,小分子多肽胸腺素β4(Thymosin beta4,Tβ4)可通过分泌抗炎性因子,促进创面修复。而经冷冻干燥处理后的羊皮脱细胞真皮基质(Acellular Dermal Matrix,ADM),可作为一种良好的细胞支架用于细胞移植。因此为提高创面愈合效率,本实验将人脂肪间充质干细胞(human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells,hADSCs)过表达hTβ4基因与羊ADM进行复合,研究其对创面愈合过程的影响。
  首先,本研究以病患手术中的废弃脂肪组织作为实验材料,将采用胶原酶消化法获得的细胞,通过干细胞相关鉴定,最终确定其为hADSCs。其次,通过电转染法将含hTβ4基因的质粒载体pEX4-hTβ4转入到hADSCs中,经RT-qPCR和Western Blot检测发现:转染后的细胞,其hTβ4基因表达显著性提高,蛋白表达量也有所提高。
  随后,利用酶消化法制备出羊ADM,并通过MTS法检测确定羊ADM对目的细胞无毒性作用。最后,将复合有hADSCs过表达hTβ4基因的ADM以及复合有hADSCs的ADM分别覆盖于裸小鼠全层皮肤损伤创面上。并在7,14,21天提取裸小鼠的创面组织,对创面组织HE染色和新生血管分布进行观察,同时对细胞凋亡基因和创面愈合相关基因和蛋白的表达进行检测。结果显示:随愈合时间增长,参与创面修复相关的基因VEGF和CollagenⅠ的表达量均逐渐降低,基因CK18和CollagenⅢ表达量逐渐升高,同时hADSCs过表达hTβ4基因复合羊ADM可显著性提高创面愈合速率,减少细胞凋亡,促进创面修复相关基因和蛋白的表达。
  本研究初步探讨了转染人Tβ4基因的hADSCs复合羊ADM对于创面愈合的影响,为后续深入研究创面修复机制提供了一定的依据。
[硕士论文] 吴冠锐
公共卫生 山东大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  研究壳聚糖/消炎止痛中药及两者联合应用对小鼠皮肤伤口愈合过程中的作用,分析不同用药组和不同浓度组与小鼠皮肤创口愈合情况的对应关系,进一步讨论壳聚糖、壳聚糖季铵盐和消炎止痛中药促进伤口愈合的作用机制,为壳聚糖外伤敷料的临床应用提供实验依据。
  方法:
  1.动物分组及造模
  采用306只健康昆明近交雄性小鼠,将其中300只小鼠随机分为9个用药治疗组和一个空白对照组,每组30只小鼠,剩余6只为正常组。每只小鼠背部造一个约0.5cm2的圆形皮肤全层切割伤口。所有创伤小鼠于制备皮肤缺损创面后立即实行治疗,连续9天,每天2次。9个治疗组分别为高、中、低(8mg/L、4mg/L、2mg/L)壳聚糖外伤敷料治疗组,高、中、低(8mg/L、4mg/L、2mg/L)壳聚糖季铵盐外伤敷料治疗组,4mg/L壳聚糖+1/2消炎止痛中药外伤敷料治疗组、4mg/L壳聚糖季铵盐+1/2消炎止痛中药治疗组和消炎止痛中药外伤敷料治疗组。
  2.小鼠创伤收缩率评价
  于术后第1、3、5、7、9天对各组小鼠创伤部位进行标准化摄影,记录每只小鼠创口的创面,采用ImageJ图像处理软件对其进行计算机图形处理。根据数据分布特征,对术后第1、3、5、7、9天各组小鼠创伤面积收缩率数据进行单因素方差分析。
  3.酶联免疫吸附法测定IL-1、TNF-α、TGF-β和PDGF的表达
  术后第1、3、5、7、9天,每组随机选取6只小鼠摘眼球取血,血液当天离心取上清液,使用酶联免疫试剂盒测定IL-1、TNF-α、TGF-β和PDGF的表达情况。
  4.组织病理学评价
  术后第3、5、7、9天,将取血完毕的小鼠脱臼处死,手术取其创面组织样本约1cm2。组织样本做石蜡切片,HE染色。普通光学显微镜下观察组织病理学变化。
  结果:
  术后第1天,各组创伤收缩率未见显著差异(P>0.05)。术后第3、5天,高、中壳聚糖组,高、中壳聚糖季铵盐组,壳+药组,壳季+药组,中药组创面收缩率明显大于空白组(P<0.05),高浓度组创伤收缩率高于低浓度组(P<0.05),壳聚糖组和壳聚糖季铵盐组创伤收缩率无统计学差异(P>0.05),联合应用组和高浓度组的创伤收缩率无统计学差异(P>0.05)。术后第7、9天治疗组创面收缩率明显高于空白组(P<0.05)。病理学切片镜下观察发现:治疗组的炎症反应较空白组轻,上皮细胞增殖加快,新生血管丰富,肉芽组织成熟。高浓度组与低浓度组相比,炎症减轻时间更早、上皮细胞增殖更快,肉芽组织出现时间更早,皮肤恢复完整结构时间更短。壳聚糖组和壳聚糖季铵盐组镜下恢复程度基本相同,联合应用组镜下恢复程度与高浓度组相似,术后第9天可见完整皮肤结构。治疗组IL-1和TNF-α的表达明显低于空白组(P<0.01),高浓度组IL-1和TNF-α的表达较低浓度组低(P<0.05),壳聚糖组和壳聚糖季铵盐组IL-1和TNF-α的表达无统计学差异(P>0.05)。联合应用组IL-1的表达较高浓度组低(P<0.05),TNF-α的表达与高浓度组无统计学差异(P>0.05)。治疗组TGF-β和PDGF的表达明显高于空白组(P<0.05),高浓度组TGF-β和PDGF的表达较低浓度组高(P<0.05),壳聚糖组和壳聚糖季铵盐组TGF-β和PDGF的表达无统计学差异(P>0.05),联合应用组PDGF的表达较高浓度组高(P<0.05),TGF-β的表达无统计学差异(P>0.05)。
  结论:
  1.壳聚糖、壳聚糖季铵盐和消炎止痛中药均具有减轻炎症反应和促进生长因子表达的作用,进而促进创口愈合。
  2.高浓度壳聚糖和壳聚糖季铵盐减轻炎症反应和促进生长因子表达的作用较低浓度组好,具有更强的促进创口愈合能力。
  3.壳聚糖和壳聚糖季铵盐减轻炎症反应促进生长因子的能力大致相同,促进创口愈合的能力相似。
  4.壳聚糖/壳聚糖季铵盐和消炎止痛中药联合应用的减轻炎症反应和促进生长因子表达的能力最好,促进伤口愈合的能力最佳。
[博士论文] 林丁盛
骨外科学 南方医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:临床上,随意皮瓣已经成为修复组织缺损的常见技术之一。然而随意皮瓣因不含知名血管,当其长宽比超越1.5-2∶1,其远端将部分或者完全坏死,从而影响随意皮瓣在组织创面修复等中的临床使用。孕酮,又称黄体酮、黄体激素,具有促进血管内皮生长因子(VEGF)表达、下调炎性细胞因子水平及较强的抗氧化应激等能力,本课题旨在研究探讨孕酮对大鼠缺血随意皮瓣成活的影响及可能机制。
  方法:建立改良的McFarlane大鼠缺血随意皮瓣模型。将雄性成年Sprague-Dawley大鼠按随机对数表法分为孕酮实验组和生理盐水对照组。孕酮组/生理盐水组分别予腹腔注射10mg/kg孕酮/生理盐水,一天给药1次,接连注射7天。根据随意皮瓣血供情况,将皮瓣三等分为皮瓣近端区(Ⅰ区)、中间区(Ⅱ区)和远端区(Ⅲ区)。术后观察随意皮瓣存活大体情况及测算皮瓣存活面积比;术后第2天,测定大鼠Ⅱ区组织超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)水平;术后第7天苏木精-伊红(H&E)染色评估皮瓣组织病理学情况;免疫组化法测定VEGF表达;激光多普勒血流测量仪检测皮瓣血流灌注情况;明胶-氧化铅血管造影观测皮瓣新生血管情况。
  结果:1、术后第7天,孕酮实验组皮瓣存活面积比为(81.62±1.86)%,显著高于生理盐水对照组(49.78±1.36)%,差异有统计学意义(P<0.01)。2、术后第2天,孕酮实验组皮瓣Ⅱ区,每毫克蛋白SOD活性表达量(61.40±2.29)U显著高于生理盐水对照组(29.95±2.91)U(P<0.01)。孕酮组每毫克蛋白MDA表达量(16.25±3.08)nmol显著低于生理盐水组(62.32±5.38)nmol(P<0.01)。3、术后第7天,HE染色示:皮瓣Ⅱ区,孕酮组出现大量的新生血管,微血管密度(MVD)计数为(33.64±3.04)个/mm2显著高于生理盐水组(15.95±3.65)个/mm2(P<0.01)。4、孕酮组皮瓣Ⅱ区中性粒细胞浸润(30.10±2.67个/mm2)显著少于生理盐水组(44.80±3.54个/mm2)(P<0.01)。5、皮瓣Ⅱ区,孕酮组VEGF阳性表达量为(3479±68)ⅠA显著高于生理盐水组(1923±43)ⅠA(P<0.01)。6、孕酮实验组皮瓣Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区组织血流灌注分别为(406.82±15.21)PU、(210.45±6.93)PU、(109.95±4.91)PU,显著高于生理盐水组各区(P<0.01)。7、明胶-氧化铅造影示孕酮组皮瓣中端及远端血管增生显著(P<0.01)。
  结论:孕酮可以促进大鼠缺血随意皮瓣的成活,其机制可能:1、孕酮上调皮瓣血管内皮生长因子的表达、刺激皮瓣远端血管新生,改善皮瓣血供,从而提高皮瓣的成活面积;2、孕酮可以减轻组织炎症反应促进皮瓣存活;3、孕酮可以拮抗组织脂质过氧化反应、抑制皮瓣缺血再灌注损伤,促进随意皮瓣存活。
[硕士论文] 江晓声
护理学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  1.制定《烧伤住院患者护理需求调查表》.
  2.了解烧伤住院患者的护理需求及满足程度,探讨影响烧伤住院患者护理需求的相关因素.
  3.深入探讨影响烧伤住院患者护理需求满足程度的相关因素,提出应对措施.
  方法:
  1.在查阅文献的基础上,结合烧伤患者个别访谈和临床专家意见,经小组讨论拟定初始问卷,根据德尔菲法(Delphi)进行修订.运用选择率、变异系数、均值、标准差对专家意见集中程度进行统计分析,运用专家积极系数、肯德尔和谐系数、专家权威程度等指标对专家咨询的可靠性进行检验,对调查表进行信效度检验.
  2.采用便利抽样法,于2017年1月~9月,采用自行设计《烧伤住院患者护理需求调查表》,对某三甲综合医院379例烧伤住院患者进行调查.应用SPSS20.0进行统计分析,其中计数资料采用频数、百分比描述,计量资料采用均数±标准差描述;两组间均数比较采用独立样本t检验,多组间均数比较采用方差分析;样本率的比较采用卡方检验.
  3.采用目的抽样法,于2017年5月~7月,在福建省某三甲综合医院选取16例烧伤患者进行半结构式访谈,运用Colaizzi现象学法整理、分析资料.
  结果:
  1.制定了《烧伤住院患者护理需求调查表》.该调查表包含5个维度共42个条目.其中内容效度指数(S-CVI)为0.954,克朗巴赫系数(Cronbach'sα)为0.960.
  2.烧伤住院患者护理需求平均得分为(3.94±0.43)分,各维度平均需求程度得分从高到低分别为爱与归属需求维度(4.08±0.55)分、安全需求维度(4.02±0.49)分、生理需求维度(3.95±0.58)分、尊重需求维度(3.94±0.55)分、自我实现需求维度(3.73±0.65)分.烧伤患者在生理需求、安全需求、爱与归属需求、尊重需求和自我实现需求五个维度的满足程度分别为70.7%、71.2%、73.9%、73.1%和74.7%.将不同特征烧伤住院患者进行分类比较,结果显示:不同烧伤程度、部位、治疗方式、有无入住监护室、监护时长、住院时长、有无影响关节活动、受教育程度、付费方式的患者对护理需求维度得分比较均有统计学意义.
  3.访谈后,烧伤患者护理需求满足程度的影响因素共析出三个主题,分别是患者因素(未表达需求、不想麻烦护士)、护士因素(护士重视程度不够、细节处理不到位、操作技术有待提高、护士忙碌顾不上)、环境设施不足.
  结论:
  1.《烧伤住院患者护理需求调查表》具有良好的信度和效度,适用于成人烧伤住院患者护理需求的评估.
  2.烧伤住院患者护理需求程度较高、需求内容广泛.烧伤住院患者护理需求满足程度仍有较大的提升空间.烧伤程度、部位、治疗方式、有无入住监护室、监护时长、住院时长、有无影响关节活动、受教育程度和付费方式等因素是影响烧伤患者护理需求的主要因素.
  3.护士在工作中要注意提高自身操作技术,做到细节护理,并且引导、鼓励患者消除心理障碍主动提出护理需求,及时给予满足,同时合理优化环境,改善硬件设施,多举措共同提高烧伤患者护理需求满足程度.
[硕士论文] 吴晓蕾
护理学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  1.研究烧伤患者出院时、出院一个月、出院三个月、出院半年伤残接受度、希望水平、社会参与水平、生活质量现状及其影响因素。
  2.描绘烧伤患者出院半年内伤残接受度、希望水平、社会参与水平及生活质量变化趋势。
  方法:
  1.采用纵向研究设计,于2016年9月至2017年5月采用便利抽样的方法选取在福建省烧伤中心住院治疗的216例烧伤患者为研究对象,在患者出院前1-2天进行访视,解释本研究的目的,获得患者的同意并签署知情同意书,并进行院内资料收集,在患者出院当天配合责任护士进行健康宣教,告知患者出院一个月回院复诊。采用电话、网络(QQ或微信)及门诊复查相结合的调查方式,在患者出院后一个月、三个月、半年进行随访。
  2.以《国际功能、残疾和健康功能分类》(ICF)的理论模式为理论框架,采用自制烧伤患者一般资料调查表、伤残接受度量表修订版(ADS)、希望因子量表(HHI)、参与和自主影响量表(IPA)、精简烧伤健康量表(BSHS-B)、改良Barthel指数测量量表(MBI)、五级瘙痒评分法及视觉模拟评分法(VAS)调查烧伤患者的一般资料、伤残接受度、希望水平、社会参与水平、生活质量、日常生活自理能力、瘙痒状况、疼痛状况及康复信心。
  3.采用SPSS20.0统计软件进行数据分析,采用描述性分析对烧伤患者一般资料、伤残接受度、希望水平、社会参与水平、生活质量、日常生活自理能力、瘙痒状况、疼痛状况及康复信心进行描述。采用独立样本T检验、单因素方差分析(ANOVA)、多元回归分析及重复测量方差分析等方法探讨伤残接受度、希望水平、社会参与水平及生活质量影响因素及变化趋势。
  结果:
  1.随访完成情况:根据本研究纳入及排除标准,共纳入216例烧伤患者,经过半年的随访,失访9人,失访率为4.2%。
  2.烧伤出院患者出院时日常生活自理能力(ADL)得分为(80.38±17.80)分,出院一个月ADL得分为(88.24±15.96)分,出院三个月ADL得分为(91.46±14.16)分,出院半年ADL得分为(93.14±13.04)分。烧伤患者出院半年四个时间点的ADL均分呈现上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较结果表明,ADL均分差异均具有统计学意义(P<0.05)。烧伤患者出院半年四个时间点的瘙痒均分呈现下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较结果表明,瘙痒均分差异均具有统计学意义(P<0.05)。烧伤患者出院半年四个时间点的疼痛均分呈现下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较结果表明,疼痛均分差异均具有统计学意义(P<0.05)。烧伤患者出院半年康复信心均分呈现上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较结果表明,出院时至出院一个月康复信心差异不具有统计学意义(P>0.05),出院一个月至出院三个月,出院三个月至出院半年差异均具有统计学意义(P<0.05)。
  3.烧伤患者出院时伤残接受度总均分为(70.37±19.04)分,出院一个月伤残接受度总均分为(72.44±19.87)分,出院三个月伤残接受度总均分为(75.83±20.02)分,出院半年伤残接受度总均分为(77.36±20.33)分。四个时间点的伤残接受度均分呈现上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较结果表明,伤残接受度均分差异均具有统计学意义(P<0.05)。回归分析结果表明,经济状况、职业、烧伤严重程度、烧伤后遗症、ADL水平及疼痛程度是烧伤患者伤残接受度主要影响因素,可解释其57.9%的总变异。
  4.烧伤患者出院时希望水平总均分为(31.25±7.76)分,烧伤患者出院一个月希望水平总均分为(31.57±7.45)分,烧伤患者出院三个月希望水平总均分为(32.77±7.42)分,烧伤患者出院半年希望水平总均分为(33.34±7.58)分,四个时间点的希望水平均分呈现上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较结果表明,出院时至出院一个月患者希望水平差异不具有统计学意义(P>0.05),其余阶段差异均具有统计学意义(P<0.05)。相关分析结果显示,烧伤患者伤残接受度总分及各维度与希望水平总分及各维度均成显著正相关(r=0.5~0.8,P<0.01)。回归分析结果表明,经济状况、目前工作状况、ADL水平、瘙痒程度、康复信心是烧伤患者希望水平的主要影响因素,五个因素可解释希望水平得分总变异的64.2%。
  5.烧伤患者出院一个月社会参与水平总均分为(53.26±18.44)分,出院三个月社会参与水平总均分为(50.77±18.02)分,出院半年社会参与水平总均分为(43.88±19.21)分。三个时间点的社会参与水平均分呈现下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较结果表明,社会参与水平均分差异均具有统计学意义(P<0.05)。回归分析结果显示,经济状况、烧伤严重程度、ADL水平、疼痛程度、伤残接受度及亲密关系是烧伤患者社会参与水平的主要影响因素,可解释其73.0%的总变异。
  6.烧伤患者出院时生活质量总均分为(102.27±36.25)分,出院一个月生活质量总均分(110.83±35.96)分,出院三个月生活质量总均分(118.49±37.01)分,出院半年生活质量总均分为(121.93±36.87)分。四个时间点的生活质量均分呈现上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较结果表明,生活质量均分差异均具有统计学意义(P<0.05)。回归分析结果显示,吸入性损伤、瘙痒程度、ADL水平、康复信心、伤残接受度及社会参与水平是烧伤患者生活质量的主要影响因素,可解释其79.2%的总变异。
  结论:
  1.烧伤患者出院时、出院一个月、出院三个月、出院半年四个时间点ADL水平、康复信心有随着时间延长逐渐提升的趋势,瘙痒与疼痛状况有随病程延长逐渐缓解的趋势,提示医务人员应在敏感时间点采取针对性的干预措施,提高ADL水平与康复信心,改善瘙痒、疼痛状况。
  2.烧伤患者出院时、出院一个月、出院三个月、出院半年四个时间点伤残接受度均处于中度偏低水平。随着病程延长,患者伤残接受度逐渐提升,呈“急-缓-缓”增长趋势。医护人员应关注烧伤患者康复过程中伤残接受的心理变化过程,重视重度及特重度烧伤、存在烧伤后遗症、瘙痒反应剧烈、从事体力劳动、经济困难的烧伤患者伤残接受度水平,并以提高日常生活能力、缓解瘙痒反应、促进积极应对方式等方面为切入点实施针对性的干预项目,促进患者身心康复。
  3.烧伤患者出院时、出院一个月、出院三个月、出院半年四个时间点希望水平均处于中等偏高水平,患者希望水平有随时间逐渐提高的趋势,呈现“缓-急-缓”增长趋势。医务人员在临床工作中应重点关注经济困难、处于失业状态、瘙痒反应剧烈的患者,并以改善其躯体症状、提高日常活动能力以及提升其对康复治疗的信心等为切入点,结合烧伤患者希望水平的变化趋势,在适当时间点实施行之有效的心理干预项目,提升其希望水平。
  4.烧伤患者出院一个月、出院三个月社会参与水平处于差-一般之间,出院半年社会参与水平处于一般-好之间。社会参与水平随病程延长逐渐升高,呈“缓-急”增长趋势,医护人员应重点关注严重烧伤、经济状况较差患者的社会参与水平,早期实施康复护理介入,以提升患者康复信心与日常生活能力、提高患者伤残接受水平、促进患者与病友以及家人的亲密关系等为切入点制定并实施相关干预项目,以促进其社会参与水平的提升。
  5.烧伤患者出院时、出院一个月生活质量处于中等偏低水平,出院三个月、出院半年生活质量处于中等水平。生活质量随着时间延长逐渐改善,呈“急-缓-缓”增长趋势,医护人员在临床工作中,应重视烧伤患者长期生活质量,密切关注吸入性损伤、瘙痒反应剧烈、对康复持有消极态度的烧伤患者生活质量,并以提升其康复信心,提高其对自身伤残现状的接受度、促使患者积极参与社会生活等方面实施针对性的健康管理项目,促进患者综合健康状况的改善。
[博士论文] 范晓明
外科学(烧伤) 中国人民解放军海军军医大学;海军军医大学 2018(学位年度)
摘要:在创面愈合过程中,表皮细胞发挥着关键作用,其功能状态深刻影响着创面愈合的质量。而这其中,表皮细胞的增殖活性是影响创面愈合的重要机制之一。在表皮细胞的增殖过程中,诸多分子及信号通路参与了其增殖活性调控过程,其中链接黏附分子A(Junctional Adhesion Molecule A,JAM-A)近年来逐渐成为研究热点。
  JAM-A是一种跨膜蛋白,属于细胞间粘附分子家族,结构中包含PDZ结构域,同源二聚化后能够与胞内含PDZ结构域的分子结合,发挥信号转导功能。同时,JAM-A本身是粘附分子,与细胞的粘附、迁移功能密切相关,高表达于表皮细胞、内皮细胞、炎症细胞、间充质干细胞等多种细胞的膜表面,参与了上皮细胞屏障形成、调节免疫稳态和炎症、血管新生等过程。
  据最新的研究显示,除了调控细胞粘附、迁移以及信号转导外,JAM-A还能够正向调控肿瘤细胞的增殖活性,在骨髓瘤、乳腺癌、肺癌、睾丸癌、头颈部鳞癌等恶性肿瘤中,JAM-A的表达均显著提高,与癌细胞的增殖、侵袭、趋化等功能呈现出明显的正向相关关系。而我们前期通过预实验发现,干扰JAM-A表达后,表皮细胞增殖速度反而较高表达JAM-A的表皮细胞明显加快。显然,这与JAM-A在上述肿瘤组织中的功能是矛盾的,那JAM-A在正常表皮细胞中对增殖活性的调控到底是正向还是负向?此外,在这些肿瘤研究中,JAM-A表现出来的功能多是由蛋白来发挥的,鲜有学者关注其长达3600bp、内有大量非编码RNA结合位点的3'UTR区域,那JAM-A在正常表皮细胞中对增殖活性的调控是否依然是其蛋白分子发挥主要作用?
  由于microRNA主要通过与靶分子mRNA的3'UTR区结合发挥转录后抑制作用,所以我们猜想,JAM-A在正常表皮细胞中对增殖活性的调控是否也是通过microRNA来实现的?我们通过检索文献发现,miR-21、miR-31、miR-203、miR-205、miR-210等多种microRNA,参与了创面形成后表皮细胞增殖功能的调控。但目前尚无文献报道microRNA通过与JAM-A的3'UTR区结合调控细胞增殖。这提示我们,或许可以挖掘到与JAM-A3'UTR区结合的新的miRNA。
  因此,根据以上JAM-A、microRNA与细胞增殖有关的研究进展,结合我们预实验结果,我们拟从非编码RNA角度切入,在表皮细胞中深入探索JAM-A是否通过microRNA机制发挥与其在肿瘤细胞中相反的调控作用。
  我们拟在确认预实验现象的基础上,进一步通过高通量测序筛选差异表达的非编码RNA,结合生物信息学分析筛选潜在的非编码RNA靶向识别结合的分子,探索JAM-A通过非编码RNA调控下游增殖关键调控分子,进而负向调控表皮细胞增殖功能的新机制。这将有助于更加深刻地理解创面愈合过程,为后续在糖尿病足、压力性溃疡等慢性难愈性创面中探索促愈合机制、寻找潜在的临床治疗靶向药物奠定基础。
  JAM-A影响表皮细胞增殖活性,过表达JAM-A抑制表皮细胞增殖,干扰JAM-A促进表皮细胞增殖
  据课题组前期研究显示,干扰JAM-A表达后表皮细胞增殖速度加快,这与文献报道的并不一致。为了明确JAM-A在表皮细胞中的对增殖活性的影响,我们用慢病毒作为载体,分别构建了过表达JAM-A、干扰JAM-A的人永生化表皮细胞HaCaT,通过CCK-8和ki67实验证明,过表达JAM-A后表皮细胞增殖减慢,干扰JAM-A后表皮细胞增殖加快,与我们预实验结果一致,与文献报道JAM-A在肿瘤细胞中正性调控增殖功能相矛盾。
  JAM-A通过其mRNA的3'UTR区结合miR-221/222cluster调控表皮细胞增殖功能的作用
  既往文献报道,JAM-A在肿瘤细胞的迁移、增殖中发挥作用,往往通过蛋白质-蛋白质相互作用的方式。我们通过PubMed网站Gene数据库,发现JAM-A mRNA的3'UTR区有大量的microRNA结合位点,并从miRNA数据库中预测JAM-A3'UTR区能够结合多条microRNA。因此,我们拟从microRN的角度切入,探索JAM-A调控表皮细胞增殖功能的可能分子机制。为验证科学假设,我们在干扰JAM-A表皮细胞的基础上,分别构建了过表达CDS区、过表达3'UTR区的表皮细胞,通过PCR证明JAM-A调节表皮细胞增殖活性是通过其3'UTR区。接下来,我们设计了Dicer酶敲除实验,进一步证明JAM-A是通过其3'UTR区与microRNA结合的方式来发挥调节表皮细胞增殖的功效。
  基于上述发现,我们将过表达JAM-A、干扰JAM-A的表皮细胞进行RNA-seq高通量测序,结合生物信息学分析和文献检索,依据(1)在过表达组表达量明显下调、(2)在干扰组明显上调、(3)在细胞内基础丰度2000TPM以上、(4)靶点与细胞增殖有关的microRNAs。经过初筛,miR-221和miR-222完美符合上述标准,不仅排名靠前,而且同属一簇。通过RT-PCR,我们验证了干扰JAM-A后miR-221/222表达上调,而过表达JAM-A3'UTR区后miR-221/222表达下调。通过体外细胞实验,我们也证明了miR-221/222的拟似物促进表皮细胞增殖,抑制物抑制增殖。据此,miR-221/222cluster确立为研究对象,JAM-A3'UTR负向调控miR-221/222。
  miR-221/222cluster同时靶向结合JAM-A、PTEN发挥转录后抑制作用
  目前研究显示,microRNA主要通过与靶基因mRNA的3'UTR区识别结合,导致靶基因mRNA降解或者干扰其正常表达,从而发挥转录后抑制作用。为进一步阐明miRC在表皮细胞中发挥抑制增殖功能的分子机制,我们拟寻找与其功能吻合、直接识别结合的下游靶分子。通过对miRC靶分子的预测分析(microRNA.org、targetscan、miRbase)以及检索PubMed和Web of Science等文献数据库,我们锁定了PTEN为miR-221/222潜在的下游靶分子,并通过双荧光素酶报告基因实验验证了我们的设想,此外双荧光素酶报告基因实验还进一步证明了miR-221/222能够同时靶向JAM-A和PTEN。接下来,通过细胞和分子实验,我们进一步验证了miR-221-3p、miR-222-5p的拟似物负向调控JAM-A和PTEN表达,抑制物正向调控JAM-A和PTEN表达,随后又通过rescue实验发现过表达miR-221-3p、miR-222-5p后能够降低过表达JAM-A3'UTR后PTEN的表达水平,进一步证明了JAM-A mRNA保护PTEN免于被miR-221-3p/222-5p降解。
  JAM-A3'UTR突变体对PTEN无调控作用,对表皮细胞增殖功能无抑制效果
  最后,我们探索了miR-221/222cluster在JAM-A3'UTR区具体的结合位点。由于miR-221在JAM-3'UTR区有3个结合位点,在PTEN有2个结合位点,故而重点选择miR-221-3p为主要研究对象。基于JAM-A3'UTR区序列和miR-221-3p的3个结合位点,我们分别构建了各个位点突变体和全突变体质粒,根据双荧光素酶报告基因实验的结果,证明miR-221-3p与JAM-A3'UTR区三个位点均可结合。因此,后续实验皆以全突变体为实验对象,分别通过RT-PCR和CCK-8实验验证了JAM-A3'UTR突变体对PTEN无调控作用,对表皮细胞增殖活性无抑制效果。
  综上所述,在本研究中,明确了JAM-A参与负向调控表皮细胞增殖活性,这种调控方式依赖于其mRNA的3'UTR区,而非传统的蛋白-蛋白间直接的相互作用,筛选得到了miR-221/222cluster,并进一步筛选得到miR-221/222的下游靶分子PTEN。随后的机制研究中,我们明确了miR-221/222能够同时靶向结合JAM-A和PTEN,阐明了miR-221/222具体的结合位点,勾勒出JAM-A、miR-221/222cluster、PTEN之间清晰的关系网络。本课题对于从microRNA角度理解表皮细胞增殖活性的调控机制进行了有益的探索,加深了对创面愈合过程中表皮细胞增殖功能的调控机制认知,有利于将来针对性开发促进创面愈合的新药。
[硕士论文] 肖宇
烧伤整形外科 广西医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:通过对我科慢性难愈创面感染的病原菌种类的分布及耐药性的特点进行了解分析,从而为临床上防治慢性难愈创面的感染及合理选用抗菌药物提供参考依据。
  方法:对广西医科大学第一附属医院烧伤整形外科2013年1月至2017年12月共五年间收治的慢性难愈创面住院病人的一般资料、病原菌种类分布及药敏情况进行回顾性分析。
  结果:(1)符合纳入标准的病例有286例,共送检402份标本中分离出263株41种病原菌,其中革兰阳性菌50株(19.01%),革兰阴性菌169株(64.26%)和真菌44株(16.73%)。
  (2)检出率最高的四种感染病原菌依次为铜绿假单胞菌(54株20.53%),金黄色葡萄球菌(39株14.83%),大肠埃希菌(33株12.55%),鲍曼不动杆菌(17株6.46%)。
  (3)检出率高的三种革兰阴性菌依次为铜绿假单胞菌(54株20.53%)、大肠埃希菌(33株12.55%)、鲍曼氏不动杆菌(17株6.46%)。其中铜绿假单胞菌耐药性最高的为氨苄西林、头孢曲松及复方新诺明,其耐药性均为61.11%,对其它多数药物的耐药性较低,如对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星、环丙沙星、亚胺培南及米诺环素等的耐药性小于20%,而对阿米卡星及美罗培南的耐药性均只有5.56%;大肠埃希菌对哌拉西林、氨苄西林及复方新诺明的耐药性较高大于80%,但对阿莫西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢呋新酯及头孢哌酮/舒巴坦的耐药性小于10%,未发现对替加环素、亚胺培南、美罗培南及米诺环素耐药;鲍曼不动杆菌对多数抗菌药物均产生耐药,其耐药性总体偏高,多数药物的耐药性均在55%以上,但本次研究未发现对替加环素耐药。
  (4)革兰阳性菌中最常见的病原菌为金黄色葡萄球菌(39株14.83%),其对苄青霉素的耐药性高达94.49%,发现其对替考拉宁、万古霉素及利奈唑胺耐药性为0;在所检出的金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)12株占30.77%,耐药性较高,对苄青霉素、苯唑西林耐药性为100%,同时未发现其对替考拉宁、万古霉素及利奈唑胺耐药。
  结论:通过对我科慢性难愈创面病原菌感染的分布及耐药情况的综合分析,能够提前采取干预措施,可以更有效的治疗慢性难愈创面。
  1、在慢性难愈创面的感染中革兰阴性菌的检出率明显高于革兰阳性菌。
  2、慢性难愈创面感染中检出率最高的四种病原菌依次为铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌与鲍曼不动杆菌。
  3、鲍曼不动杆菌对抗生素的耐药性总体较高,因此临床上应予以高度重视。
  4、对金黄色葡萄球菌的治疗,万古霉素仍是其有效的治疗药物,同时研究发现金黄色葡萄球菌对替考拉宁及利奈唑胺的药物敏感性高。
  5、对于慢性难愈创面的治疗,若能及时准确的了解慢性难愈创面感染的病原菌分布及耐药性的情况,在抗生素的选用上具有重要的意义,能够快速有效地控制感染,从而可加速创面的愈合,缩短疗程。
[硕士论文] 陈鑫
急诊医学 南方医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  比较损伤严重度评分(injury severity score,ISS评分)与急性生理及慢性健康(acute physiology and chronic health evaluation,APACHE)Ⅱ评分、快速急诊内科评分(rapid emergency medicine score REMS)、修正创伤评分法(revised trauma score,RTS)对评估创伤患者病情危重程度及预测创伤患者死亡率的预测效能;探讨D-二聚体、ISS评分与创伤患者死亡率的相关性及D-二聚体与ISS评分联合预测创伤患者预后的价值。
  方法:
  回顾分析2014年1月1日至2016年12月31日我院急诊抢救室收治的1592例创伤患者的临床资料,排除年龄小于14岁、伤后时间>24小时、入院时已死亡、自动离院或数据不完整者;既往有凝血功能障碍性疾病者;既往有原发性肝功能损害者;受伤前6个月内曾使用抗凝药物者;受伤部位<2处的患者,最终纳入1167例。
  计算ISS评分、APACHEⅡ评分、RTS评分、REMS评分,并依据评分结果将各评分分为不同受伤严重程度组;以28天预后为观察终点,将患者分为存活组和死亡组。比较4种评分在死亡组和存活组之间的差异以及不同评分各个分组之间死亡率的差异和趋势。对4种评分预测患者死亡率生成受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,比较ROC曲线下面积,评估4种评分的预测效能。
  通过多因素logistics分析,筛选血液学检验指标中预测死亡的危险因素。选取入院静脉血D-二聚体,比较死亡组及存活组、ISS评分各分组D-二聚体值的差异及与死亡率之间的关系。同时通过ROC曲线下面积大小,比较D-二聚体、ISS评分及二者联合预测患者预后的准确度。
  结果:
  死亡组患者的ISS评分、APACHEⅡ评分、REMS评分均高于存活组(t分别为6.187、15.04、11.411,P<0.05),而RTS评分则低于存活组(t=-9.25,P<0.05);随着ISS评分、REMS评分、APACHEⅡ评分增加及RTS评分的降低,死亡率均有上升趋势(x2值分别为70.85、109.71、351.59、190.04,均P<0.05)。APACHEⅡ评分ROC曲线下面积最大(0.918±0.0176),REMS评分与RTS评分曲线下面积相近(分别为0.857±0.0231、0.858±0.0253),ISS评分曲线下面积最小(0.728±0.0296)。
  白细胞计数(WBC)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、D-二聚体(D-D)、总胆红素(Tbil)、直接胆红素(Dbil)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、C反应蛋白(CRP)等是对创伤死亡存在显著影响的血液学指标。
  存活组患者的D-二聚体水平显著低于死亡组(t=7.882,P<0.01);ISS评分、D-二聚体以及二者联合后ROC曲线下面积分别是0.728,0.765,0.800,D-二聚体预测患者预后的ROC曲线下面积大于ISS评分,但之间的差异没有统计学意义(Z=1.051,P=0.293);二者联合预测患者预后的ROC曲线下面积大于单用ISS评分、D-二聚体预测面积(Z值分别是3.028,2.272,均P<0.05)。
  结论:
  4种评分对患者预后都有一定的预测效能,APACHEⅡ评分系统对患者死亡率的预测效能最优,REMS评分与RTS评分的预测效能次于APACHEⅡ评分,ISS评分预测效能最差。创伤患者血D-二聚体水平与患者伤情严重程度及死亡率相关,ISS评分联合D-二聚体预测创伤患者死亡率具有较好的预测效能且优于D-二聚体、ISS评分单独预测创伤患者的死亡预后。
[硕士论文] 邓强宇
社会医学与卫生事业管理 中国人民解放军海军军医大学;海军军医大学 2018(学位年度)
摘要:背景:
  2016年6月23日,江苏省盐城市发生EF4(Enhanced Fujita4)级龙卷风,造成99人死亡,846人受伤,这是中国近半个世纪以来伤亡最严重的一次龙卷风灾害。2017年8月11日,内蒙古自治区赤峰市发生F3(Fujita3)级龙卷风,造成5人死亡,58人受伤。根据国际灾害数据库(EM-DAT,The International Disaster Database)统计结果,1900-2016年全球气象灾害(龙卷风、雾霾、极端气温)发生频率逐渐增加,死亡人数波动增加,龙卷风对人类的生命安全威胁值得关注。目前国内外关于龙卷风伤员的研究,多集中在现况调查,缺乏对龙卷风创伤发生过程的系统性分析及相关建模研究,国内研究更是匮乏,因此有必要开展相关研究。
  目的与意义:
  基于盐城、赤峰两次龙卷风调研,①收集龙卷风伤员创伤特征、龙卷风灾民创伤发生影响因素两类数据本底,有利于摸清龙卷风创伤特点,探明龙卷风对人群的致伤影响因素;②基于多主体建模方法,构建基于AnyLogic的龙卷风伤员创伤发生多主体模型,有利于分析龙卷风对伤员的致伤机理;③开展模型模拟与干预实验,有利于改进龙卷风伤员创伤发生预防策略。
  资料与方法:
  ①基于盐城、赤峰两次龙卷风6家医院龙卷风伤员病历,从伤部、伤类、伤势三方面分析创伤特征,并采用AIS(Abbreviated Injury Scale)进行伤势标准化评分。采用地理信息技术(GIS,Geographical Information Systems)和非参数检验,分析龙卷风不同破坏区和EF风级区伤员密度和伤势差异。②基于盐城、赤峰两次龙卷风灾民问卷调研,采用卡方检验和logistic回归,从人口学特征、受灾环境、个人行为三方面分析灾民创伤发生影响因素。③基于多主体建模方法和AnyLogic仿真建模软件,构建龙卷风创伤发生模型,开展模型模拟和干预实验。
  结果与结论:
  (一)龙卷风伤员创伤特征及地理分布。从两次龙卷风比较来看,盐城伤员受伤严重程度更高,伤口感染比例更高。盐城伤员前3位伤部为头部、体表、下肢,赤峰伤员前三位伤部为头部、上肢、下肢。盐城、赤峰前3位伤类均为软组织伤、骨折、脏器损伤。盐城龙卷风重伤员(AIS>=5)比例为2.5%,赤峰龙卷风中无AIS>=5的重伤员。重伤员伤部主要为头部、脊柱、胸部。45岁以上中老年人和未成年人占有较大比例,伤员年龄呈“类哑铃型”分布特征(即伤员年龄分布两头比例大中间比例小)。破坏程度高和EF风级大的区域伤员分布密度高,但是不同区域的伤员伤势没有统计学差异(p>0.05),提示灾后医疗救援力量部署应本着“同速不同数”的原则(即向不同区域同速部署医务人员但部署不同数量的医务人员)。
  (二)龙卷风灾民创伤发生影响因素。从盐城、赤峰两次龙卷风的比较来看,收入水平、能否找到避灾建筑等“硬件”设施对于高强度的盐城龙卷风灾民受伤有显著影响(p<0.05),而个人行为、演习意识等“软件”行为对于低强度的赤峰龙卷风灾民受伤有显著影响(p<0.05)。个人有效的避灾行为需根据龙卷风级别来判断,同时依赖于有效的预警时间。应加强灾民的防灾减灾科普宣传和教育,提高其防灾减灾意识和能力。与其它研究不同,本研究发现,室内外灾民受伤概率没有统计学差异(p>0.05),但房屋倒塌程度越大灾民受伤概率越高(p<0.05),提示房屋对龙卷风灾民的作用取决于房屋本身的抗风能力,不能笼统地认为室内就是保护因素,倒塌建筑不仅不能保护灾民更是灾民受伤的重要原因,应提高龙卷风高发地带的建筑抗风性能。
  (三)基于AnyLogic的龙卷风伤员创伤发生多主体模型。基于多主体建模理论,界定龙卷风伤员创伤发生的灾民、龙卷风、房屋三类主体,以及主体的行为规则,分析预警时间、个人行为等因素与创伤发生的逻辑关系,厘清龙卷风灾民创伤发生机制。运用AnyLogic仿真建模软件,构建龙卷风伤员创伤发生模型,实现模型计算机化。
  (四)龙卷风伤员创伤发生模型模拟。在盐城、赤峰两次龙卷风灾害的调研数据基础上,动态模拟两次龙卷风群体创伤的发生过程,分析模型模拟结果与灾害实际伤亡情况的差异,验证模型的稳定性和可靠性。
  (五)龙卷风伤员创伤发生模型干预实验。聚焦龙卷风创伤发生的预防,从预警时间、个人行为、房屋倒塌程度三方面,开展3类9组干预实验,发现提前预警能有效降低伤员数量,灾民远离奔跑行为导致伤员数量增加,而房屋倒塌程度越严重,伤员数量越多的致伤规律。
  政策建议:
  1.关注龙卷风伤员数据的整理,伤员救治中应关注头部伤、脊柱伤、胸部伤的危重伤员,同时注意脏器创伤和感染性创伤的预防和救治。
  2.龙卷风灾后医疗救援力量部署应本着“同速不同数”原则(即灾后向不同区域同速部署医务人员但部署不同数量的医务人员),以改进潜在医疗需求的预估,提高伤员整体救援效率。
  3.龙卷风防灾措施中,应改善龙卷风高发地域居民房屋的抗风性能,加强龙卷风灾害的提前预警,开展居民的防灾科普宣传和教育,提高其避灾意识和能力。
[硕士论文] 李海航
外科学(烧伤) 中国人民解放军海军军医大学;海军军医大学 2018(学位年度)
摘要:研究背景:组织工程学为皮肤替代物的研究提供很好的方法,但目前遇到瓶颈难以解决。本研究围绕生物3D打印构建人工皮肤进行开展,研发一种可用于进行人工皮肤构建的生物型3D打印机,并进行体外的生物3D打印构建人工皮肤的初步探索。
  第一部分:生物型3D打印机研发与测试
  研究目的:研发一种可用于进行生物3D打印人工皮肤的生物型3D打印机,并对其进行稳定性测试。
  研究方法:为实现通过生物型3D打印机体外构建人工皮肤,课题组提出课题研究需要的生物型3D打印机设备的设计要求,并交由器械公司完成设备的制造。完成生物型3D打印机PrototypeSK00的制造后,通过3D Studio Max软件设计2种不同参数的三维模型(Cylinder001.stl和Cylinder002.stl)并通过RepetierHost软件解析成GOC文件,配置1%、2.5%和5%的海藻酸钠溶液,基于2种不同参数的模型和3种不同的打印成分测试5种不同内径的打印头(0.09mm,0.16mm,0.25mm,0.41mm和1.00mm)的运行情况。将成纤维细胞和表皮细胞消化形成细胞密度为1×108/ml DMEM悬液,将2种细胞经过不同内径的打印头的直接打印种植于12孔板中,检测经过打印操作后0h、6h、24h和48h的细胞存活率,对照组为直接通过微量移液枪将细胞种植于培养孔中。此外,为检测生物型3D打印机PrototypeSK00构建人工器官的稳定性,设计一个仿真鼻的三维模型并基于2.5%海藻酸钠和0.41mm打印头进行体外打印运行测试,对照为相同的三维模型在工业型3D打印机构建的聚乳酸人工鼻模型。
  研究结果:经课题组设计并完成制造生物型3D打印机-PrototypeSK00。运行检测过程发现基于0.09mm打印浓度较高的海藻酸钠溶液时,容易发生堵头现象。打印浓度较低海藻酸钠溶液时,总体积较大的模型在打印后期,容易发生水分蒸发导致前期构建的模型干燥坍塌而致使打印失败。成纤维细胞和表皮细胞经过打印操作后,0h-48h的细胞存活率最低95%,最高100%,与对照组无明显统计学差异。通过生物型3D打印机PrototypeSK00的仿真鼻能够与工业型3D打印机构建的人工鼻模型接近。
  研究结论:课题组研发了一种运行相对稳定的生物型3D打印机-PrototypeSK00,其运行过程无明显错误发生,经过其打印操作后细胞存活率与微量移液枪无差异,通过该打印能稳定运行体外构建高级人工结构。
  第二部分:应用于生物型3D打印机的皮肤“生物墨水”的研发与检测
  研究目的:研制一种能够在生物3D打印机使用的进行体外构建人工皮肤需要的作为支架成分的“生物墨水”。
  研究方法:将重组胶原蛋白与藻酸盐溶液混合灭菌形成“生物墨水”,对照品为不含胶原蛋白成分的藻酸盐溶液。将部分样品冻干形成固态进行扫描电镜检测观察材料的物理表征,并于流体旋转流变仪上进行样品的流体力学检测。以传代培养旺盛的成纤维细胞和表皮细胞为实验体系,检测“生物墨水”的细胞毒性。通过bal/bc裸鼠及SD大鼠的全层皮肤缺损模型检测该“生物墨水”修复创面的作用,第1、2、3、4周取病理,观察创面愈合情况、血管化情况、胶原残留情况及表皮爬行情况。
  研究结果:通过重组人胶原蛋白构建了一种孔隙均匀的具有高生物活性的胶原蛋白“生物墨水”,对表皮细胞及成纤维细胞无明显毒性。裸鼠的创面治疗实验证实了含有胶原蛋白的“生物墨水”能够有利于促进创面血管化、促进皮肤真皮层厚度恢复以及提高创面的胶原蛋白含量。
  研究结论:本部分的研究内容为通过应用重组人Ⅲ型胶原蛋白作为本课题使用的“生物墨水”材料,构建一种与皮肤的细胞外基质相接近的“生物墨水”,检测其生物毒性与创面治疗作用,其本身具有加速创面愈合和改善创面愈合质量作用,为构建生物3D打印人工皮肤做准备。
  第三部分:基于生物型3D打印机的人工皮肤的初步构建与检测
  研究目的:基于自主研发生物型3D打印机PrototypeSK00和研制的胶原蛋白“生物墨水”,结合成纤维细胞和表皮细胞,进行通过生物3D打印的方式初步探索体外模拟构建生物3D打印人工皮肤的试验,并对其进行初步的生物学评价。
  研究方法:以计算机3D Studio Max程序(Autodesk公司,美国)作为模型建立软件,建立了模拟人皮肤真皮层和表皮层的多层次三维模型数据。将成纤维细胞与表皮细胞混合入“生物墨水”中,进行模拟人体皮肤结构的体外3D打印,并立刻进行冰冻切片的方式结合HE染色观察其显微结构。通过转染EGFP基因序列成纤维细胞中,并以嘌呤霉素进行筛选构建能稳定表达EGFP蛋白的成纤维细胞,以该细胞体系为种子细胞体外3D打印构建多层结构,并在荧光显微镜下观察体外培养7天后的细胞状态。
  研究结果:基于生物型3D打印机和“生物墨水”成果完成人工皮肤的体外生物3D打印构建,冰冻切片后的HE染色观察,能够明显区分“真皮层”和“表皮层”。体外培养7天后,具有稳定表达EGFP的成纤维细胞的通过3D打印构建的多层结构证明成纤维细胞在“生物墨水”中存活良好,并且底层的细胞呈贴壁增殖。
  研究结论:通过生物3D打印的方式,以胶原蛋白“生物墨水”为支架,成纤维细胞和表皮细胞为种子细胞,能够在体外模拟皮肤的结构仿生构建人工皮肤。
[硕士论文] 张永存
外科学(烧伤外科学) 中国人民解放军海军军医大学;海军军医大学 2018(学位年度)
摘要:在烧伤病人的救治工作中,皮肤移植和削痂是非常重要的基础治疗技术。皮肤移植不仅可以修复烧伤创面,亦广泛的应用于创伤、糖尿病溃疡、压疮、皮肤肿瘤以及疤痕切除后皮肤损伤的修复。随着负压封闭引流等技术的应用拓展,越来越多采用游离皮片进行创面修复,皮片种类包括刃厚皮片、中厚皮片、全厚皮片、含真皮下血管网皮片。皮片的厚度和创面修复的效果密切相关,合适的厚度不仅能很好契合创面修复需要,而且对供皮区损伤控制在最小程度,避免临床上主要依靠医生经验取皮所导致的厚度控制不佳,出现皮片过薄满足不了创面修复的需求,或者皮片过厚加重了供皮区损伤,以及疤痕形成、色素沉积、瘙痒、疼痛等问题。类似的问题在烧伤创面处理中并不少见,按烧伤经典的三度四分法,一度到浅二度可自愈,三度一般需要切削痂植皮治疗,这些在治疗上都是明确的,唯深二度烧伤的治疗存在较大的困惑,深二度烧伤深及真皮乳头层以下,没有损伤真皮全层,进一步可细分偏浅、偏深等深二度,同薄中厚皮片、厚中厚皮片的皮肤层次类似。理论上,偏浅深二度创面存在自愈可能,偏深深二度创面痂皮手术处理的方式有磨痂、削痂、剥痂等,达到创面广泛的点状出血之后再进一步处理。同取皮一样,这种通过手术去除痂皮的深度主要靠医生经验判断,具体深度因人而异,但对于烧伤创面而言,去除痂皮最理想的深度却只有一个,削痂过浅,坏死组织清理不彻底影响创面愈合,削痂过深则破坏了机体的健康组织。因此,无论取皮还是削痂,如何在术前获得这个最佳深度,对于治疗效果非常重要。同样,找到一个对取皮和削痂后的创面效果进行实时、无创的评价方法也很重要,其可决定下一步的医疗决策,提示医疗人员及时调整对创面的处理方法。
  高频超声具备超高的分辨率,被称为“超声显微镜”,测量结果可以精确到微米级,可对皮肤组织的纵深情况进行清晰地呈现,并计算不同层次皮肤组织的厚度,且无创、操作简单。皮肤镜也叫皮表透光显微镜,其通过自带光源模式的调整,分为偏振和非偏振法,是一种可以观察皮肤表面情况,并使表皮下解剖结构的可视化的技术,可充当临床观察和组织病理学的桥梁,又被称为皮肤科医生的“听诊器”。随着近年来人工智能在图像识别领域的快速进展,Andre Esteva等利用深度学习技术对皮肤癌和黑色素瘤的图片进行学习后,取得准确率高达91%的识别效果。2018年张康等利用基于图像的深度学习技术,采用“迁移学习”方式,已取得了对肺部、眼部部分疾病医学图像高达96.6%诊断准确度。基于此,未来人工智能图像识别技术在烧伤图像方面的应用值得期待。
  课题拟建立稳定的、易于获取的SD大鼠的供皮区模型、深二度烧伤削痂模型,通过组织学病理结果验证其稳定性,为涉及供皮区、深二度削痂方面的研究提供一个稳定的动物平台,并采用皮肤镜和高频皮肤超声对其鉴定,探索相关影像和创面层次之间的关系,进一步探究其在未来临床应用中的潜在价值。并为未来可能的人工智能图像识别技术在烧伤领域的应用提供基础数据和实验方法。
  研究目的:
  1.建立SD大鼠供皮区和深二度烧伤削痂模型,通过组织病理学切片验证其稳定性。
  2.在皮肤纵深维度,探索高频超声,对于精确取皮、削痂操作的应用价值。
  3.通过皮肤镜对取皮或削痂创面图像的获取和特征分析,探索皮肤镜在创面观察和评价中应用价值,为创面深度的评价提供一个新方法。
  研究方法:
  第一部分:20只SD大鼠随机分为2组(辊轴取皮刀取皮组、电动取皮刀取皮组),每组10只,使用各自的取皮刀在大鼠背部皮肤取皮,每只SD大鼠背部设定4个供皮区,通过皮下注射肿胀液形成局部隆起后,两名实验人员相互配合,设定取皮厚度分别为0.1mm、0.2mm、0.3mm、0.4mm进行取皮。取皮前后分别用数码相机记录大体形态;用皮肤镜采集图像,对图像特征,包括色彩、出血、毛细血管形态等进行观察、归纳、分析;通过高频超声仪图像,测量皮肤不同层次厚度,记录并保存。图像数据采集完成后,取皮肤创面标本,进行组织学病理观察,计算断层皮片厚度。比较分析正常皮肤表皮、真皮、全层(表皮+真皮)及断层皮片厚度的病理测量数据与高频超声所测量结果之间的关系。
  第二部分:采用15mm×15mm×30mm大小铜块,浸入沸水5分钟后,予以铜块15mm×15mm面紧贴背部皮肤,靠铜块自重作用于大鼠背部8秒可致大鼠背部深二度烧伤。20只SD大鼠随机分为2组(辊轴取皮刀削痂组、电动取皮刀削痂组),每组10只。使用铜块在大鼠背部制作四个深二度烧伤的创面两组使用各自取皮刀分别对各自组内10只深二度烧伤的SD大鼠背部皮肤削痂,置烫伤面积同样大小的铜块于待削痂的创面下方,左手固定创面平展于铜块上,右手进行削痂,每个大鼠背部四个创面设定削痂深度分别为0.1mm、0.2mm、0.3mm、0.4mm进行削痂,随后进行图像采集、分析和病理观察(方法同实验第一部分)。比较分析痂皮厚度的病理测量数据与高频超声所测量结果之间的关系。
  以上数据均采用用SAS9.4统计软件进行分析。
  研究结果:
  第一部分:SD大鼠供皮区模型的构建及高频皮肤超声仪、皮肤镜在其稳定性评估中的应用探索
  电动取皮刀组多次尝试,获得创面不理想。辊轴取皮刀组共获得不同深度的供皮区40个,每组10个,其中1个取皮过深导致皮下筋膜暴露,其余创面外观规整,形态均一性较好。
  图像特征:
  皮肤镜:设置0.1mm刻度取皮的创面可见粉白色,散在分布的点状出血点;设置0.2mm深度取皮的创面可见密度远高于前者的点状出血点,毛细血管末梢呈碎发样分布;设置0.3mm深度取皮的创面密集网状结构清晰可见,散在分布较大出血点,毛细血管分布可见,较多毛细血管纹路清晰呈现,设置0.4mm深度取皮的创面可见弥散性大出血点,毛细血管广泛可见,皮下筋膜隐约呈现。
  高频皮肤超声:SD大鼠表皮呈一条连续的平滑线状强回声,真皮层回声较表皮明显降低,真皮—皮下分界处呈不连续的线状回声,回声强度介于表皮、真皮之间,浅筋膜表现为规则的线状高回声。取皮后超声图像中表层线状强回声带消失,真皮层回声带宽度随着取皮厚度的递增而递减,随着取皮厚度进一步增加,真皮回声带亦消失。
  组织学观察:所取皮片、及相应的供皮区镜下厚薄均匀一致,无明显起伏。皮肤各层次组织结构清晰可见。
  使用SAS9.4统计软件对数据进行分析,SD大鼠背部皮肤表皮、真皮、全层病理厚度与其高频超声图像计算结果正相关,其中:表皮相关系数0.836,P<0.01;真皮相关系数0.932,P<0.01;皮肤厚度0.855,P<0.01。断层皮片病理厚度与超声检查结呈正相关。
  第二部分:SD大鼠深二度烧伤削痂模型的构建及高频皮肤超声仪、皮肤镜在其稳定性评估中的应用研究
  电动取皮刀组,削痂效果不理,创面起伏较大不均一,不进行图像分析。辊轴取皮刀组共获得不同深度的供皮区40个,每组10个,其中2个取皮过深导致皮下筋膜暴露,其余创面外观规整,形态均一性较好。
  图像特征:
  皮肤镜:设置0.1mm刻度削痂后创面呈现一片瓷白色,可见网样外观,网眼空隙较小,密集分布;;设置0.2mm刻度削痂后创面呈白色、淡红色相间,可见网样外观,空隙变大,网眼密度下降,散在较为规则、尺寸大小相仿的点状血管,局部可见细网状毛细血管纹路,;设置0.3mm刻度削痂后创面大部分呈现淡红色,依然可见网样外观,网眼空隙进一步变大,网眼密度稀疏,出血点分布较前者密集,可见广泛的毛细血管断端,血管纹路;设置0.4mm刻度削痂后创面呈鲜红色,弥漫性出血,毛细血管完整性和网样外观,不可见。
  高频皮肤超声:烧伤后可见真皮层水肿,厚度明显增加,削痂后超声图像中可见痂皮及削痂后的创面图像,痂皮回声带宽度随着削痂厚度的递增而递增。
  组织学观察:痂皮厚度镜下厚薄比较均一,无明显起伏。皮肤各层次组织清晰可见。使用SAS9.4统计软件对数据进行分析,病理结果和超声图像计算结果均比较稳定,变异性小,超声图像计算结果均大于病理结果,削下痂皮的病理厚度与超声检查结呈正相关。
  研究结论:
  1.通过辊轴取皮刀可以建立SD大鼠供皮区和深二度烧伤后削痂模型,该方法简单易行,稳定性和可重复性高。可以为涉及到上述两种创面的药物、敷料及治疗方研究提供一个稳定的动物模型平台。
  2.高频超声影像测量断层皮片、痂皮的厚度结果分别和各自病理测量结果正相关,可以为个性化、精确的取皮、削痂提供实时、无创的检测和参考。
  3.皮肤镜采集的平面图像,可以清晰地观察创面多维度的情况,尤其是对毛细血管损伤情况的清晰成像,能为供皮区及创面削痂效果的评价提供更准确、客观的方法。
[硕士论文] 张烨
外科学(烧伤) 南方医科大学 2018(学位年度)
摘要:烧伤是一种较为常见的突发性意外伤害,是门急诊常见的多发病,烧伤和烫伤在创面愈合过程中不仅引起患者疼痛加剧,而且还会使患者产生严重的心理负担,担心创面愈合后影响美观、功能,因此对于烧伤科医生来说,如何正确处理烧伤创面是目前最为关键的问题。除了预防创面感染及进一步加重以外,还需减轻患者在换药过程中的疼痛,减轻创面的渗出及水肿,因此找到合适的生物敷料对于烧伤创面的早期修复显得尤为重要,不仅能有效的防止创面感染及减轻疼痛,更能为皮肤提供潮湿、低氧的环境,促进皮肤附件形成在上皮化过程。
  烧伤创面是烧伤救治治疗始终的矛盾重点,几十年来,全世界医学学者都在致力于通过各种疗法积极促进烧伤创面快速修复。随着近几十年来科学家及医学界对创面的深入研究,烧伤敷料取得了突破性的进展,人们不仅认识到不能简单的对创面进行覆盖,还需要合适敷料促进创面的愈合和有效的防止感染。随着生物学、工艺学及材料学的进步,近年来各种不同创面敷料发展迅速,异种皮肤、复合应用敷料或者制成凝胶、药膜的形成敷料是目前研究和应用的热点。随着社会及医学的不断发展与进步,在临床上对烧伤敷料的要求一定也会越来越高,目前已公认早期积极有效的封闭创面是促进轻度烧伤快速愈合,明显提高中、大面积深度烧伤病人成活率是最关键也是最行之有效的措施之一,但各种生物烧伤敷料离理想烧伤敷料的要求还有一定的距离。但相信在未来,定会研出理想、优质的生物敷料,造福于全世界人民。
  研究目的:
  分析人工真皮替代物修复难愈性创面的价值,对临床研究提出相应建议。
  研究方法:
  抽取我院在2017年10月到2018年4月收治的各种难愈性创面患者5例,一期手术对患者创面进行彻底清创,移植人工真皮,3周后局部肉芽组织生长良好,外露肌腱或骨组织被类真皮组织覆盖。然后二期手术移植自体皮片,观察人工真皮替代物术后皮片成活率,同时观察创面愈后的瘢痕增生情况,对患者功能部位的关节活动以及色素沉着情况综合评价人工真皮联合自体断层皮片移植对修复难愈性创面的研究效果。
  临床结果:相对传统术式,手术次数、住院次数明显减少,自体组织供区损伤小,轻度瘢痕增生,无任何排斥反应,术后外观良好,可早期行功能锻炼。
  研究结论:
  人工真皮替代物对于修复难愈性创面有着积极的意义,可以降低瘢痕增生的程度,有助于患者恢复机体功能,对临床治疗有着一定的参考价值。
[硕士论文] 蒋桂
烧伤整形外科 广西医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:统计分析广西最大的烧伤救治中心广西医科大学第一附属医院烧伤整形外科2013年1月1日至2017年12月31日近五年130例电烧伤住院病人,探讨其流行病学并评估相关结果,为制定减少电烧伤发病率的相关预防措施,提供临床依据。
  方法:统计广西医科大学第一附属医院从2013年1月1日至2017年12月31日近五年收治的130例电烧伤住院病人,从病人的性别、电烧伤发生时间、年龄、人员类别、电烧伤类型、触电方式、是否手术、住院时间,电烧伤面积以及截肢、截指(趾)、死亡和昏迷情况这几个方面综合分析并得出结论。
  结果:130例电烧伤住院患者中,高电压电烧伤患者81例(62.3%),低电压电烧伤49例(37.7%);这些电烧伤病例大多发生在5-10月,期间共有99名患者(76.2%)受到了不同程度的电烧伤损害。电烧伤患者主要为男性,有115例(88.5%)。易受电烧伤损害的年龄阶层为青年及中年,分别为57例(43.8%)和46例(35.4%)。在职业方面,农民工最容易受到电烧伤损害,有34例(26.2%),同时,农民工也是最易受到高电压电击伤的职业,而学龄前儿童更易受到低电压电击伤。所有住院患者中,有110人因病情需要通过手术治疗,手术病人占84.6%;高电压电烧伤患者的主要触电方式是不甚触及高压电线,有62例(76.5%),低电压电烧伤主要通过插座导致触电,有19例(38.8%);仅有1例住院病人死于高电压电烧伤,死亡率为0.8%。高电压电烧伤的截肢及截指(趾)率分别为21.0%和29.6%,低电压电击伤为2.0%和10.2%。电烧伤患者接触电压的高低直接影响患者的住院时间、烧伤面积、截肢率、截指(趾)率以及昏迷病史,差异有统计学意义(P<0.05)。
  结论:1、与热力烧伤相比,电烧伤对病人的危害大,往往致深部组织损伤严重,致残率高,大部分患者需要多次手术治疗,住院时间长;2、与低电压电烧伤相比,高电压电烧伤更易导致电烧伤患者损伤严重,治疗难度更大,费用高,住院时间更长;3、用电安全是防范电烧伤的最重要环节。男性农民工以及学龄前儿童是防治的重点人群;4、农民工缺乏用电安全知识,是宣教重点人群;儿童缺乏自我保护意识,是成年人需要重点防范的对象。电线规范安全安装,用电作业规范操作以及提高人们防范意识才能做到用电安全。
[硕士论文] 刘飞
外科学 西南医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:通过建立创面愈合大鼠模型,在愈合过程的不同时间点观察外用芒硝后创面的愈合率、组织学变化,并检测创面组织中巨噬细胞浸润以及VEGF和TGF-β1的表达情况,以探讨芒硝外用对创面愈合的作用,并从细胞分子学角度分析其作用机制。
  方法:选取60只雄性SD大鼠,随机分为模型组、对照组、芒硝组,每组20只SD大鼠,在大鼠背部靠头侧建立直径大小约2cm的圆形皮肤全层创伤模型。损伤后第一天开始模型组、对照组、芒硝组大鼠皮肤创面分别予以不给药、外用1%DMSO、外用芒硝溶液敷料外敷干预,随后分别于损伤后3、5、7、10、14天观察创面愈合情况,并用描膜法测量创面面积,计算创面愈合率。同时每个时间点随机处死4只大鼠,取创面组织予HE染色观察创面愈合的组织学变化,并计算新生血管截面积,另外予Masson染色观察比较三组创面胶原纤维的增生情况,免疫组织化学法标记巨噬细胞、VEGF、TGF-β1染色,在高倍镜下用细胞计数、平均光密度值方法量化,比较三组每个时间点创面组织巨噬细胞的浸润以及VEGF、TGF-β1的表达情况。
  结果:肉眼观察发现芒硝组创面填充和收缩较模型组和对照组更快,早期创面更红润,渗出物更多。创面愈合率比较结果显示,模型组和对照组比较,两组五个时间点创面平均愈合率的差异不明显,且无统计学意义(P>0.05);损伤后3天,芒硝组的创面平均愈合率高于对照组,但差异无统计学意义(t=1.45,P=0.154),损伤后第5、7天时,芒硝组的创面平均愈合率高于对照组,差异有统计学意义(t=2.11,P=0.043;t=2.11,P=0.046),第10、14天时,芒硝组的创面平均愈合率高于对照组,但差异无统计学意义(t=1.40,P=0.183;t=0.79,P=0.461)。创面组织HE染色结果显示,损伤后3天,芒硝组与模型组、对照组的组织学改变无明显差别;损伤后第5、7天,芒硝组与模型组、对照组比较,新生血管组织更丰富,组织内细胞数量更多,组织致密程度更高;损伤后第10、14天芒硝组创面组织较模型组和对照组更为致密。新生血管截面积的比较结果显示,模型组和对照组在每个时间点的差异均无统计学意义(P>0.05);损伤后第5、7天,芒硝组创面新生血管截面积均值大于模型组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而损伤后3、10、14天,三组新生血管截面积的差异无统计学意义(P<0.05)。Masson染色结果显示损伤后第5、7天芒硝组胶原纤维的密集程度和沉积的厚度较模型组和对照组更大。免疫组化结果显示在损伤后每个时间点模型组和对照组创面中巨噬细胞的数量均无显著差异(P>0.05)。而芒硝组创面中巨噬细胞的数量在损伤后3、5、7天时都明显大于模型组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);损伤后10、14天时,虽然芒硝组巨噬细胞计数的均值大于模型组和对照组,但差别无统计学意义(P>0.05)。三组在损伤后3、5、7天,组织VEGF和TGF-β1表达强度较大,第10、14天表达降低。平均光密度值比较结果显示,模型组和对照组在创面愈合过程中VEGF和TGF-β1表达的平均光密度值差异均无统计学意义(P>0.05);芒硝组在损伤后3、5、7天创面VEGF和TGF-β1表达的平均光密度值明显大于模型组和对照组,且差别有统计学意义(P<0.05);损伤后10、14天,虽然芒硝组VEGF和TGF-β1表达的平均光密度值大于模型组和对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。
  结论:芒硝外用能在创面愈合过程中促进新生血管的形成、各种细胞的增殖和胶原纤维组织的增生,从而促进创面的填充和收缩,以加速创面愈合。芒硝外用可以在创面愈合早期(炎症期和增生期)增加创面组织中巨噬细胞的浸润和VEGF、TGF-β1的表达。调节创面巨噬细胞浸润可能是芒硝外用促进创面愈合最关键的机制。
[硕士论文] 吴浩
烧伤整形外科 广西医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:分析我院烧创伤并发肺栓塞病例的临床特点、存在的危险因素,加深对烧创伤患者并发肺栓塞的认识,以降低烧创伤患者发生肺栓塞的可能,提高治愈率。
  方法:对2013年1月至2018年3月我院收治的烧伤、创伤并发肺栓塞的17例患者进行数据收集,分析患者发病时间,发病时的临床症状和体征,发病后血浆D-二聚体的含量,CT肺动脉造影(CTPA)检查结果,按肺栓塞可能性Geneva评分及Wells评分给予患者危险程度分级,并统计患者存在的肺栓塞危险因素,寻找患者存在的最大诱发危险因素。
  结果:17例患者中15例发病于受伤后28天内,所占比例为88.2%,其中于伤后14天并发的为8例;发病时最常见的症状为呼吸困难、胸闷、胸痛,它们所占比例分别为70.6%、35.2%、17.6%;血浆D-二聚体>500μg/L者占94.1%;17例患者行CT肺动脉造影检查者均可见肺栓塞形成的直接或间接征象;17例患者中15例接受抗凝或溶栓治疗,2例患者死亡,15例患者痊愈,治愈率为88.2%;17例患者均存在至少3个肺栓塞相关危险因素,最大诱发因素为骨折或重大创伤。
  结论:1、烧创伤患者存在诸多发生肺栓塞的危险因素,骨折、重大创伤为最大的诱发因素;发生肺栓塞早期症状缺乏特异性,预防是防治肺栓塞的关键措施。
  2、烧创伤患者住院28天内,应积极监测患者发生静脉栓塞的可能,定期行下肢静脉彩超检查,并高度警惕疑似肺栓塞的突发症状,及时完善血浆D-二聚体及CTPA检查,明确诊断。
  3、确诊后按指南早期给予患者标准化治疗,可提高治愈率。
[硕士论文] 金剑
外科学(烧伤外科) 中国人民解放军海军军医大学;海军军医大学 2018(学位年度)
摘要:背景:
  人工真皮能有效修复累及真皮层的损伤,促进创面愈合,改善愈合后功能和外观。目前临床上使用的人工真皮多为双层结构,如Intgra、Pelanc等,主要由作为生长支架的胶原层和具有屏障功能的硅胶层两层结构构成。这些人工真皮主要作用于经清创等处理彻底清除坏死组织,且未发生感染的创面,因为人工真皮移植失败的主要原因是移植后感染。移植后感染多发生于移植后早期,该时期内,由人工真皮未能与创面建立良好的血供,抗菌能力较弱,且随着创面细菌侵入、增殖,细菌分泌胶原酶,降解人工真皮的胶原层,降解产物成为细菌增殖的良好培养基,进一步增加了其移植后感染风险。移植后一旦发生感染,不但会造成移植失败,还可能引发脓毒血症,威胁患者生命。移植前彻底清创、移植后加强换药、全身使用抗生素等一系列抗菌措施应用于预防人工真皮移植后感染的问题,虽然取得了一定成效,但仍无法避免移植后感染的出现。已有大量研究将各种生长因子加入人工真皮,以期进一步促进创面愈合,借鉴于此,有研究将抗菌成分加入其中以期研制一种本身就具有一定抗菌能力的人工真皮将为改善人工真皮移植后感染问题提供新的思路和方法,也将拓展人工真皮适用范围,为创面治疗提供更多的选择。本研究选择国内Lando(@)双层人工真皮修复材料作为基础人工真皮,筛选合适的临床抗菌制剂,进行人工真皮的抗菌修饰,并验证其持续抗菌能力及促创面愈合的效果。
  第一部分:赋予人工真皮持续抗菌能力的抗菌成分选择
  目的:选择一种具有较强抗菌能力的抗菌制剂,作为后续研究赋予人工真皮抗菌能力的成分。
  方法:选择临床创面消毒常用消毒剂作为备选抗菌制剂,本研究所选择消毒剂包括:碘伏、洗必泰、新洁尔灭、PHMB、复合溶菌酶、呋喃西林。采用微量肉汤法测定创面常见细菌菌种(金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌、肺炎克雷伯菌)标准菌株和临床菌株(各20株)对以上消毒剂的MIC、MBC,以消毒剂临床应用于创面的浓度作为消毒剂初始浓度,计算MIC、MBC分别为消毒剂初始浓度的稀释倍数,记为MIC稀释、MBC稀释。比较临床菌株和标准菌株对同一消毒剂的MIC、MBC,将MIC和/或MBC大于标准菌株的临床菌株认为是对该消毒剂敏感性降低的菌株,计算敏感性降低菌株百分比,初步判断临床菌株对各消毒剂的敏感性情况。选择具有较小MIC稀释和MBC稀释且临床菌株对其具有较高敏感性的消毒剂成分作为本次研究的候选抗菌制剂,用以下一阶段实验制备具有抗菌能力的人工真皮。
  结果:金黄色葡萄球菌对碘伏、洗必泰、新洁尔灭、PHMB、复合溶菌酶、呋喃西林的MIC稀释分别为2-5、2-6、2-6、2-7、2-6、2-1,MBC稀释分别为2-5、2-5、2-6、2-7、2-6、-(MBC大于创面常用浓度),敏感性降低菌株百分比分别为30%、30%、55%、5%、5%、50%。鲍氏不动杆菌对碘伏、洗必泰、新洁尔灭、PHMB、复合溶菌酶、呋喃西林的MIC稀释分别为2-4、2-4、2-5、2-5、2-2、2-1,MBC稀释分别为2-3、2-4、2-4、2-5、2-1、-(MBC大于创面常用浓度),敏感性降低菌株百分比分别为40%、25%、60%、10%、45%、55%。肺炎克雷伯菌对碘伏、洗必泰、新洁尔灭、PHMB、复合溶菌酶、呋喃西林的MIC稀释分别为2-4、2-6、2-6、2-7、2-2、2-1,MBC稀释分别为2-4、2-5、2-6、2-7、2-1、-(MBC大于创面常用浓度),敏感性降低菌株百分比分别为35%、20%、40%、10%、40%、45%。
  结论:金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌、肺炎克雷伯菌对PHMB具有较小MIC稀释、MBC稀释,且临床菌株对其敏感性较高,故PHMB被选择为赋予人工真皮持续抗菌能力的抗菌成分。
  第二部分:具有抗菌能力的人工真皮的制备及性状检测
  目的:以PHMB作为抗菌成分,分别采用浸泡法、微球法、夹层法处理人工真皮,检测3种方法处理后的人工真皮可持续抗菌时长,并检测相关性状。
  方法:将人工真皮分别进行如下处理:1.浸泡法:分别浸泡于0.1%、0.5%、1%、2%浓度PHMB溶液中24h;2.微球法:制作直径50μm、100μm的明胶微球,每种直径明胶微球各自分别含0.1%、0.5%、1%、2%PHMB,将人工真皮浸泡于上述明胶微球水溶液中24h;3.夹层法:制作含0.1%、0.5%、1%、2%PHMB的水凝胶,加入人工真皮的硅胶层和胶原层之间。分别将制备好的实验样品制成直径5mm的圆形,放置于涂抹金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌、肺炎克雷伯菌标准菌株的培养皿,每天更换新的涂抹细菌的培养皿,记录每天形成得抑菌圈大小,分析各方法可持续形成有效抑菌圈时间。选择具有最长可持续形成有效抑菌圈时间且PHMB浓度较低的实验样品用于后续研究,检测性状。体外细胞毒性卖验,以未加入抗菌成分的人工真皮作为对照,分别观察实验样品和未加入抗菌成分韵人工真皮在第3、7、14、21d对人成纤维细胞和人血管内皮细胞存活率的影响。体外自然降解实验,观察在自然环境下实验样品降解情况。体内埋植实验,将实验样品埋入大鼠皮下,观察埋入部位大体反应,并记录降解情况。扫描电子显微镜观察,比较实验样品和未加入抗菌成分的人工真皮结构差异。
  结果:使用浸泡法制备的不同浓度的实验样品对各菌种仅在浸泡后0d形成了有效抑菌圈;使用微球法制备的实验样品对3个菌种最长可持续形成有效抑菌圈时间均为1d,由浸泡于直径50μm、PHMB浓度为1%和2%的明胶微球溶液后形成;使用夹层法,1%和2%PHMB水凝胶加入人工真皮后对金黄色葡萄球菌、鲍氏不动杆菌、肺炎克雷伯菌标准菌株可持续形成有效抑菌圈时间分别为8d、7d、7d。综合分析1%PHMB水凝胶加入人工真皮胶原层和硅胶层间可作为赋予人工真皮持续抗菌能力的方法,行下一步研究检测性状。细胞毒性实验结果显示,具有抗菌能力的人工真皮对人成纤维细胞和人血管内皮细胞存活率产生影响较小,与不含抗菌成分的人工真皮比较无明显差异,P>0.05。体外自然降解实验显示,1%PHMB水凝胶降解率较低,至第6周时降解率为27.388±1.943%。体内埋植实验显示,1%PHMB水凝胶埋入部位未出现明显炎症反应,切口生长较好,水凝胶至第3周降解率为23.648±2.336%。扫描电子显微镜检查结果显示,加入1%PHMB水凝胶后,人工真皮胶原层结构无明显改变,胶原层孔隙内可观察到PHMB晶体分布。
  结论:1%PHMB水凝胶加入人工真皮胶原层和硅胶层间,能有效赋予人工真皮较长时间持续抗菌能力,生物毒性较低,降解较慢,且不改变人工真皮胶原层原结构。
  第三部分:具有抗菌能力的人工真皮的在体效果验证
  目的:验证加入1%PHMB水凝胶的人工真皮对创面愈合的影响以及抗菌能力。
  方法:清洁创面移植实验:取40只SD大鼠,制备全层皮肤缺损创面模型,随机分为2个组,分别为人工真皮组(Artificial Dermis Group,ADG)、具有抗菌能力的人工真皮组(Anti-infection Artificial Dermis Group,AADG),各组创面分别给予不做特殊处理、覆盖人工真皮、覆盖1%PHMB水凝胶、覆盖具有抗菌能力的人工真皮,分别于第3、7、14、21d换药,观察创面愈合及感染情况,计算每次换药时的新发感染率。换药时每组大鼠随机选取5只大鼠处死,取创面组织,分别行病理切片HE染色和CD31免疫组化,计算微血管密度(Micro-vascular Density,MVD),并行创面组织细菌定量实验。感染创面移植实验:取20只SD大鼠,随机分为人工真皮组2(Artificial Dermis Group,ADG)、具有抗菌能力的人工真皮组(anti-infection Artificial Dermis Group,AADG),每组10只,制备感染创面模型,ADG2覆盖人工真皮,AADG覆盖具有抗菌能力的人工真皮。于第3、7、14、21d换药,观察创面感染情况,计算每次换药时的感染率,于21d换药时处死所有大鼠,取创面组织行细菌定量实验。移植后持续暴露于感染环境实验:取20只SD大鼠,随机分为人工真皮组(Artificial Dermis Group,ADG)、具有抗菌能力的人工真皮组3(anti-infection Artificial Dermis Group,AADG),每组10只,制备全层皮肤缺损创面模型,ADG覆盖人工真皮,AADG覆盖具有抗菌能力的人工真皮,每日于硅胶层外滴注1mL鲍氏不动杆菌标准菌株细菌悬液,于移植后3、6、9、12d换药观察创面感染情况,计算每次换药时的感染率。
  结果:清洁创面移植实验:ADG于第7d换药时出现1个感染创面,新发感染率均为6.67%。AADG在第3d MVD少于ADG,P<0.05,但后期AADG与ADG的微血管密度间无明显差异,P>0.05。排除感染创面后,各组未感染创面细菌含量检测,第3、7、14d AADG创面组织细菌含量明显少于ADG,P<0.05。
  结论:具有抗菌能力的人工真皮对创面愈合影响较小,移植于感染创面后能有效控制感染,且对移植后可能导致创面感染的因素具有一定抵抗能力。
[硕士论文] 贺金秋
烧伤整形科 西南医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:研究糖尿病大鼠烫伤创面局部联合rhGM-CSF和胰岛素治疗对创面愈合的影响,并探索其相关机制。
  方法:在动物实验室用常规饲料喂养60只健康雄性SD大鼠1周,编号并按随机数字表法,抽取50只SD雄性大鼠,制造糖尿病模型,12h禁食(不禁水)后,并根据大鼠体重以55mg/kg,给予新鲜配制的1%链尿佐菌素(STZ)溶液腹腔单剂量注射;并用相同剂量柠檬酸缓冲液腹腔单剂量注射实验对照组A组。3天后测血糖(取大鼠尾静脉血),对不达标者的,再次使用新鲜配制的1%STZ腹腔注射(10~15mg/kg)。大鼠的血糖稳定后(注射后继续喂养3-4周),在大鼠的背部两侧各自造成一处深Ⅱ度烫伤创面,糖尿病烫伤模型成功后(未成功造模有10只),编号并按随机数字表法分为5组:糖尿病烫伤对照组(B)、胰岛素组(C)、rhGM-CSF组(D)、胰岛素联合rhGM-CSF治疗组(E),剩余的10只大鼠为正常烫伤对照组(A)。其中A组创面覆盖浸有5mL生理盐水的纱布治疗;B组创面覆盖浸有5mL生理盐水的纱布治疗;C组创面覆盖浸有5U诺和灵30R+5mL生理盐水的纱布治疗;D组创面覆盖浸有25ug rhGM-CSF+5mL生理盐水的纱布治疗;E组创面覆浸有5U诺和灵30R+25ug rhGM-CSF+5mL生理盐水的纱布覆盖。第3、第7、第11、第15、第21天肉眼察看各组创面的愈合情况,测定创面的愈合率,并用免疫组化检测创面的CD31、HIF-1α和VEGF阳性表达及荧光PCR法测量HIF-1αmRNA的含量。
  结果:通过随机抽取糖尿病大鼠的胰腺组织,进行组织学的观察,全部证实胰岛组织的细胞大部分遭受破坏,即糖尿病模型诱导成功。随机抽取各组烫伤创面的全层皮肤,行HE染色切片均证明:为深Ⅱ度的烫伤创面。伤后第3、7、11、15、21天各组大鼠创面均逐渐缩小或愈合,愈合率逐渐升高,其中尤以A组、E组大鼠创面组织内成纤维细胞及新生毛细血管等生长速度最快,愈合最快。烫伤后第7、11、15、21天A、C、D、E组创面愈合率较B组明显增高(p<0.01),具有统计学意义;A、E组创面愈合率较C、D组增高(p<0.05),具有统计学意义;A组与E组,C组与D比较(p>0.05),无统计学意义。各组VEGF阳性表达伤后就有表达,其浓度较低,之后增加,达到峰值,后逐渐回落;烫伤后第3、7、11、15、21天,A组、C组、D组、E组VEGF阳性表达高于B组(p<0.05),具有统计学意义;A、E组VEGF阳性表达高于C组、D组(p<0.05),具有统计学意义。HIF-1α的阳性表达各组在伤后就有表达,其浓度较低,之后增加,达到峰值,后逐渐回落;烫伤后第3、7、11、15、21天,A、C、D、E组HIF-1α的阳性表达明显低于B组(p<0.01),具有明显统计学意义;烫伤后第3、7、11天,C、D组HIF-1α的阳性表达高于A、E组(p<0.05),具有明显统计学意义。HIF-1αmRNA相对量开始含量较低,之后增加,达到峰值,后逐渐回落;第7、11、15、21天:E组HIF-1αmRNA相对量低于A、B、C、D组(p<0.01),具有明显统计学意义;C、D组HIF-1α的阳性表达低于B组(p<0.01),具有统计学意义;C组与D组之间比较(P<0.05),具有差异性。CD31的阳性表达伤后浓度较低,之后增加,达到峰值,后逐渐地回落;烫伤后第3、7、11、15、21天,A、E组CD31阳性表达高于B、C、D组(p<0.05),具有统计学意义;烫伤后第3、7、21天,C、D组CD31阳性表达高于B组(p<0.05),具有统计学意义;第11、15天,C、D组与B组比较无明显差异。
  结论:糖尿病烫伤创面局部联合应用胰岛素与rhGM-CSF可加速创面愈合,可能是通过促进创面的微血管再生、纠正糖尿病烫伤创面缺血缺氧、改善创面的血供等,进而加速创面愈合。其机制可能与促进VEGF的表达、抑制HIF-1α的表达有关。
[博士论文] 孙明亮
外科学整形 南方医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  创面愈合是一个非常复杂的过程,是现代医学的重大挑战。造成创面不愈合的因素很多,其中细胞因子的分泌的减少及血管形成受限是重要原因。由于具有多向分化潜能,免疫调节功能以及旁分泌作用,以间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)为核心的细胞疗法逐渐成为治疗创面的新选择。其中,脂肪来源干细胞(Adipose-Derived Stem Cells,ASCs)可轻易并大量地从脂肪组织中获取,是细胞疗法中重要的干细胞来源。然而,目前分离及培养ASCs需要胶原酶及血清的使用,增加了生物污染的风险。此外,在体外扩增出一定量的ASCs需要特定的实验条件且可能耗费数天到数周的时间。另外,许多研究表明,单纯将ASCs悬液注入创面后,ASCs常因局部缺血而死亡且部分存留的ASCs易被宿主免疫系统消除。所有这些因素都会对削弱以ASCs为基础的细胞疗法的疗效以及应用。最近我们实验团队制作并命名了一种新的脂肪组织来源的,可注射的脂肪干细胞胶(Extracellular Matrix/Stromal Vascular Fraction Gel,ECM/SVF-Gel)。通过物理剪切力的作用,ECM/SVF-Gel消除了脂肪中大部分脂类和其他不需要的成分,留下的主要是细胞外基质(ECM)和SVF细胞,从而大大提高ASCs细胞的密度。因为ECM/SVF-Gel中含有丰富的ASCs,我们推测,ECM/SVF-Gel可以发挥细胞疗法的作用,促进创面愈合。为了检验这一假设,我们开展体内外实验进行ECM/SVF-Gel对于创面修复治疗的评估。
  方法:
  我们在体外评估了ECM/SVF-Gel提取物中血管生成因子的表达及其促进血管生成的作用(成管能力鉴定)。接下来,我们在小鼠体内评估了ECM/SVF-Gel促进创面愈合的能力。体内将ECM/SVF-Gel应用于裸鼠创面,对照组使用SVF细胞悬液和磷酸盐缓冲生理盐水注射液。在不同时间点对体内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)进行分析并测定了皮肤血管密度。
  结果:
  与对照组相比,ECM/SVF-Gel提取物含有高浓度的VEGF和bFGF并可以在体外诱导血管生成。体内表明ECM/SVF-Gel相较于对照组能够有效促进创面愈合,炎症趋化因子MCP-1在创面愈合早期阶段呈高表达,而在后期急剧降低。
  结论:
  1、ECM/SVF-gel能促进创面愈合,其效果优于SVF细胞悬液,在创面干细胞治疗领域有较好的应用前景。
  2、ECM/SVF-gel能够通过分泌成血管因子促进创面血管化。
  3、ECM/SVF-gel成血管因子的分泌可能与早期强烈的炎症反应有关。
  4、ECM/SVF-Gel中高度浓缩的ECM成分可能是促进其更好地发挥细胞疗法的重要因素。
[硕士论文] 祁永军
外科学(烧伤外科) 山东大学 2018(学位年度)
摘要:皮肤是人体最大的组织器官,覆盖于体表,具有维持机体内环境稳定、抵御外界有害物质入侵等十分重要的作用。烧伤、创伤等因素均会造成严重的皮肤缺损,如得不到及时适当的处理,后期的功能恢复将是极大的挑战,影响患者的美观和生活质量,甚至危及患者生命。目前,大面积深度烧伤的治疗方式通常为切痂手术后进行自体皮肤移植,自体皮肤移植不仅造成供皮区损伤,而且存在自体健康皮源不足等问题。异体(种)脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)等皮肤替代物,是创面修复领域研究的一种新策略,其临床应用将一定程度上缓解上述问题。但ADM通常来源于异体或异种皮肤,存在一定的抗原性和潜在微生物感染等风险。早期研究表明,变性脱细胞真皮基质(denatured acellular dermal matrix,DADM),由烧伤创面切痂手术丢弃的自体烧伤皮肤经脱细胞处理后制备而来,能够保持部分胶原网状结构,表现出良好的生物相容性,可作为真皮替代物覆盖创面,为创面的愈合提供一定量的真皮组织。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)因其多分化潜能和强大的组织再生能力而作为一种创面治疗策略被应用于创面,是目前创面修复与再生方向的理想种子细胞之一。基于以上理论,可推测DADM将利于种植细胞的定殖与渗透,种植BM-MSCs的DADM支架生物学性能优于DADM,可作为真皮替代物用于创面,促进创面的愈合。目前,对烧伤皮肤进行组织工程学加工的研究不断增多,但对DADM及种植BM-MSCs的DADM支架用于创面的研究仍然较少。
  目的:
  将小鼠BM-MSCs种植到DADM支架中,制备具有生物活性的烧伤变性脱细胞真皮基质(DADM/MSC),并对其生物学性能进行离体和在体实验检测评估,探索DADM/MSC支架作为皮肤替代物用于创面的可行性,为大面积深度烧伤创面的治疗提供新的策略。
  方法:
  水浴烫伤法(54℃,25s)制备小鼠深Ⅱ度烫伤创面,24h后无菌条件下取小鼠烫伤皮肤,利用0.25%中性蛋白酶于4℃条件下处理烫伤皮肤5h,换用0.02%EDTA-0.25%胰蛋白酶溶液持续震荡24h,脱细胞处理制备成DADM;通过扫描电镜、HE和免疫荧光技术检测DADM支架的组织结构和胶原组成,证实无细胞等成分残留。将CM-Dil标记的小鼠BM-MSCs种植到DADM支架中,体外培养24h后,对DADM/MSC支架进行生物性能检测,包括支架的组织形态、种植细胞的增殖活力以及支架的生物相容性。随后将生理盐水、DADM支架和DADM/MSC支架移植到小鼠背部全层皮肤缺损创面,对创面的愈合质量进行评估,于术后7d、14d和21d通过组织学和免疫荧光实验技术分别观察生理盐水、DADM支架和DADM/MSC支架对创面愈合过程的作用,包括创面组织的上皮化、血管化和皮肤附件的再生等。
  结果:
  小鼠深Ⅱ度烫伤皮肤经脱细胞处理后,DADM外观完整,呈白色,质地柔软,具有一定的弹性和韧性;HE和免疫荧光实验结果显示支架中无细胞和皮肤附件等成分的残留,胶原纤维保留一定的三维多孔网状结构。种植的BM-MSCs在DADM支架中成功存活并进行增殖和渗透,其分布较均匀,形成类真皮结构;体内埋植实验表明DADM和DADM/MSC支架均表现出较好的生物相容性,未见明显的感染和排斥反应,但DADM/MSC较DADM支架血管化快,开始降解和新胶原合成时间早。体内实验表明,生理盐水、DADM和DADM/MSC支架植入小鼠背部全层皮肤缺损创面后,创面愈合过程中均未见明显感染,但DADM/MSC组创面愈合时间明显缩短,创面的上皮化、血管化和皮肤附件的再生速度显著优于DADM组及对照组。
  结论:
  (1)DADM支架胶原保持一定的三维多孔网状结构,利于细胞的粘附、定殖和渗透;
  (2)DADM/MSC支架具有良好的生物相容性,体内移植后血管化快,有望作为真皮替代物用于深度烧伤创面的治疗;
  (3)DADM/MSC支架作为真皮替代物用于小鼠全层皮肤缺损创面,通过加快上皮化、血管化和皮肤附件的再生促进创面的愈合。
[硕士论文] 黄海峻
整形烧伤外科 西南医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:探讨不同剂量高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对大鼠Ⅲ度烫伤缺血带的影响。
  方法:取雄性Sprague-Dawley大鼠(体重介于250-300g)30只用于实验模型的建立,根据随机字母表分成五组。其中四组为接受HMGB1治疗的实验组:200ng、300ng、400ng、600ng/0.1ml HMGB1,以及用磷酸缓冲盐溶液(PBS)处理的对照组(每组n=6)。根据文献要求定制了一把由黄铜铸成的梳状模具(20×25×55毫米,150克)。该模具的底部由四个等大的长方形平面构成(10×20毫米),四个长方形由三个等大的凹槽(20×5毫米)分隔。在建立烫伤模型前24小时用8%硫化钠溶液对大鼠背部皮肤进行脱毛(硫化钠溶于蒸馏水中)。在实施烫伤前,用2%戊巴比妥通过腹膜内注射(0.9%氯化钠溶液稀释)对大鼠进行全身麻醉(0.1ml/100g)。全身麻醉起效后,将梳状烫伤模具在沸水(100摄氏度)中预热3分钟,使模具表面温度达到100摄氏度,之后将预热的黄铜块置于大鼠背部的一侧20秒,产生四个Ⅲ°烫伤创面,四个烫伤创面由三个非烫伤区域间隔。这四个烫伤创面便代表热力损伤的凝固坏死区,而分隔烫伤创面三个间隙则代表创周的缺血带。此后,将模具重新加热至100摄氏度,并如上所述施用于背部的另一侧。这样,便能在大鼠背部两侧造成相同的烫伤模型。烫伤模型建立后,将由PBS稀释的HMGB1(HM-100,HMGBiotech)分别皮下注射到背部每个烫伤缺血坏死带中,按照组别浓度分别为200、300、400和600ng/0.1mL PBS/组(每组n=6)。对照组的6只大鼠烫伤后立即于缺血坏死带皮下注射0.1mL PBS。每个缺血坏死带均进行两次皮下注射(于缺血带两端分别进针),每次注射量为50μL,以保证HMGB1在缺血带分布的尽可能均匀。烫伤模型建立24小时后,脱颈法处死大鼠,并从大鼠背部烫伤缺血带取全层皮肤组织,采用免疫组化、荧光定量反转录—聚合酶连反应和免疫印迹法检测缺血带血管内皮生长因子(VEGF)、CD31(血管内皮及血小板抗原决定簇)、CD45(炎症细胞抗原决定簇)。所得数据使用单因素方差分析(ANOVA)进行分析,组间两两比较应用LSD法,P值<0.05被认为差异具有统计学意义。
  结果:①免疫组织化学法染色(200×)显示,缺血带接受200ng/0.1mL HMGB1组的CD31的表达显著高于接受300、400、600ng/0.1mL HMGB1组和对照组的CD31表达(P<0.01)。随着在缺血带内使用HMGB1剂量的增加,CD31的表达量反而下降(P<0.01),而600ng/0.1mL HMGB1组与PBS组CD31表达量结果无明显统计学差异(P>0.05)。②免疫组织化学法染色(100×)显示,与对照组相比,所有HMGB1组缺血带的VEGF表达量均显着增加(P<0.05)。免疫印迹法分析结果显示,相比于300、400、600ng/0.1mLHMGB1组和对照组,200ng/0.1mLHMGB1组的VEGF蛋白水平显着增高(P<0.01)。实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(PCR)结果显示,在200ng/0.1mL HMGB1组VEGF mRNA的表达明显增加(P<0.01)。300、400ng/0.1mL HMGB1组的VEGF mRNA的表达高于600ng/0.1mLHMGB1组和对照组(P<0.01),而300和400ng/0.1mLHMGB1组间差异无统计学意义(P>0.05),600ng/0.1mL HMGB1组和对照组差异也无统计学意义(P>0.05)。③免疫组织化学法染色(100×)显示,与对照组相比,实验组缺血带的CD45表达均上调(P<0.01)。300和600ng/0.1mLHMGB1组CD45的表达高于200和400ng/0.1mL HMGB1组(P<0.01)。其中,300ng/0.1mL HMGB1组与600ng/0.1mL HMGB1组比较,差异有统计学意义(P<0.01);200ng/0.1mLHMGB1组和400ng/0.1mL HMGB1组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫印迹法结果显示,300、600ng/0.1mL HMGB1组CD45蛋白表达水平高于200ng/0.1mL HMGB1组和对照组(P<0.05),但300ng/0.1mL HMGB1组与400、600ng/0,1mLHMGB1组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。PCR结果显示,相比于200和600ng/0.1mL HMGB1组,300和400ng/0.1mL HMGB1组的CD45mRNA表达显着升高(P<0.01)。而对照组的CD45mRNA表达高于200和600ng/0.1mLHMGB1组(P<0.05),但与400ng/0.1mL HMGB1相比,差异无统计学意义(P>0.05)。
  结论:1.在大鼠皮肤Ⅲ度烫伤缺血带局部应用外源性HMGB1对创面的早期进展是有促进作用的。2.外源性HMGB1可能通过VEGF依赖性机制促进局部缺血带的血管生成,在本实验中给予大鼠皮下注射200ng/0.1mL的HMGB1能使该效果达到峰值。3.随着HMGB1剂量的增加,缺血带局部的炎症反应增强,其促血管生成作用减弱。
  (已选择0条) 清除
公   告

北京万方数据股份有限公司在天猫、京东开具唯一官方授权的直营店铺:

1、天猫--万方数据教育专营店

2、京东--万方数据官方旗舰店

敬请广大用户关注、支持!查看详情

手机版

万方数据知识服务平台 扫码关注微信公众号

万方选题

学术圈
实名学术社交
订阅
收藏
快速查看收藏过的文献
客服
服务
回到
顶部