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[硕士论文] 徐可冬
口腔医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:观察分析三例骨性Ⅲ类畸形病例在临床的治疗特点及评价其疗效。
  材料和方法:选取福建医科大学附属口腔医院正畸科于2015年收治的骨性Ⅲ类病例三例。病例A:患者白某,女,23周岁。主诉:地包天求治。诊断为骨性Ⅲ类畸形,下颌前突,侧貌凹,高角;第一磨牙近中关系,前牙反覆牙合、反覆盖,右侧后牙反覆盖,上牙列4mm拥挤,下牙列2mm拥挤,下中线偏右2mm。该病例使用正畸-正颌联合治疗,于术前正畸排齐牙齿,整平牙列并匹配弓型,去除代偿及咬合干扰,随后转诊口腔颌面外科行“双侧下颌骨矢状劈开截骨(BSSRO)术”,后退下颌骨,术后6周进行精细调整。病例B:患者杨某某,女,8周岁。主诉地包天求治。诊断为骨性Ⅲ畸形,上颌后缩,侧貌凹,高角;双侧第一磨牙近中关系,前牙反牙合,上牙列3.5mm拥挤,下牙列2.5mm拥挤。采用功能矫治器进行早期矫治,引导上颌骨向前,抑制下颌骨发育,纠正矢状向不调。病例C:患者欧某某,男,11周岁。主诉:牙列不齐求治。诊断为骨性Ⅲ类畸形,上颌后缩,侧貌凹,高角;第一磨牙近中关系,前牙对刃,个别牙反牙合,上牙列5mm拥挤,下牙列3mm拥挤。矫治方法采用双期矫治,一期矫治利用上颌骨前牵引装置前牵引上颌骨,调整上下颌骨矢状向不调,二期矫治利用直丝弓矫治技术,排齐上下颌牙齿,整平上下牙列,调整咬合关系,建立正常覆牙合覆盖。
  结果:经过治疗,三例病例均解除了前牙反牙合,牙齿排列整齐,前牙覆牙合、覆盖及后牙覆盖均正常,咬合关系好转,软组织侧貌得到改善。
  结论:骨性III类畸形病例进行正确的诊断,良好的矫治方案设计及有效的治疗实施,能取得理想的疗效。
Orthodontics and Dento-facial Orthopaedics 大连医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:矫治牙列间隙的正畸方法有很多,临床上正畸医生最担心的往往是牙列间隙错合畸形矫治后的高复发趋势、咬合紊乱,甚至由于缺乏对该类患者病因的全面分析和对治疗方案的正确制定而导致不良美学结果的出现。因此,在制定该类错合畸形矫治方案时,我们要全面分析并找出其病因,彻底去除病因,从而避免后期的复发。在我们对五位牙列间隙患者进行的研究中,我们将介绍由不同的致病因素所导致的牙列间隙病例。其中一个病例在治疗前因病因的持续存在而逐渐偏离正常合并继续向不良的情况发展。应当指出的是,牙列间隙被认为是正常的咬合类型,存在于近三分之一的人口中,牙列间隙最恰当的治疗时机是恒牙列,主要解决患者美观和心理问题。
  材料和方法:本研究选取就诊于XXX五例无医源性原因的牙列间隙病例,主诉均为牙有缝,影响美观。在对五例入选病例进行全面彻底的诊断后,我们分析出导致每位患者牙列间隙的致病因素,根据分析结果我们制定出正确的矫治方案,并对以下五例入选病例进行了讨论:第一例患者诊断为假性巨舌症,是由于患者先前有扁桃体炎病史而导致安氏Ⅲ类错合畸形进而引起舌体位置异常,该患者舌体位置较正常舌体位置靠前,口腔内外肌力失衡,导致牙列出现间隙。矫治方案是去除假性巨舌症的病因,纠正安氏Ⅲ类错合畸形并结合指导患者自己进行舌位调整训练。第二例患者诊断为上中线间隙,是由于患者上颌侧切牙体积先天过小而导致的牙列间隙,由于上颌侧切牙过小,左右两侧上颌中切牙向远中漂移,进而导致左右上颌中切牙之间出现间隙,矫治方案是采用隐形矫治器关闭牙列间隙。第三例患者是由于缺失上颌尖牙(上颌骨发育不全)而导致的牙列间隙,这在许多研究报道中较为少见。该患者矫治方案是在上颌尖牙区域集中间隙后进行修复治疗,该治疗方案为第三例患者的首选治疗方法。第四例患者是处于恒牙早期的牙列间隙,矫治方案包括排齐牙齿,采用链状圈关闭牙列间隙。第五例患者诊断为上中线间隙,经进一步临床检查发现上中线间隙是由于上颌中切牙间的多生牙导致的牙列间隙,矫治方案是先由口腔外科将多生牙拔除,然后采用固定矫治器和链状圈关闭牙列间隙。
  结果:五例患者的牙列间隙全部关闭,同时达到建立了最佳咬合关系。所有病例治疗后均显示稳定,该五例患者矫治疗程为11个月至一年半。
  结论:恒牙列的牙列间隙主要涉及到口腔美学问题,该类错合畸形的诊断和矫治目标是找出导致牙列间隙的致病因素,彻底去除治疗前,治疗中和治疗后的致病因素,矫治方案的选择则需要根据患者具体情况和致病因素来决定。
[硕士论文] 谢腾飞
口腔医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:牙髓根尖周病是一类主要因细菌感染引起的、发生于牙髓及根尖周围组织的炎症性疾病,发病率高,是口腔常见病、多发病,也是导致牙痛的主要原因之一。目前认为,根管治疗术是治疗该类疾病最根本、也是最有效的治疗方法。根管治疗术成功的影响因素很多,而根管遗漏通常是RCT(Root Canal Therapy,根管治疗术)失败的主要原因之一。恒牙根管系统的变异性和复杂性是导致根管遗漏的重要因素。在过去的几十年里,牙体牙髓专业取得了很多革命性突破:如DOM(Dental Operating Microscope,牙科手术显微镜)的推广、超声仪器在根管治疗中的使用、CBCT(Cone-Beam Computed Tomography,锥形束CT)的应用等。由于这些革命性的进步,根管治疗的长期成功率大大提高,根管治疗的结果更可预期[1]。本文通过报告几例变异根管的治疗过程,旨在探讨CBCT结合显微超声技术下的根管治疗及其操作要点,并对治疗疗效做出初步评价,积累临床经验。
[硕士论文] 彭佳梅
口腔医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:收集采用不同修复方案修复美学区缺损的病例,对其修复效果进行初步评价,并分析探讨影响其修复效果的相关临床因素。
  方法:选取2016年3月至2018年3月就诊于福建医科大学附属口腔医院修复科的美学区缺损修复病例5例,根据患者的口腔情况及其主观诉求进行完善的医、患、技沟通后,分别采用贴面、单冠、联冠、固定桥和种植的修复方式,修复材料选用玻璃陶瓷材料或氧化锆陶瓷材料,并严格按照相关操作标准进行临床操作。修复3-6个月后对患者进行修复体整体效果的满意度调查,对修复效果进行评估。
  结果:5例病例均根据患者的口腔情况及主观诉求等因素,采用不同的修复方式及修复材料进行修复。修复3-6个月后患者复查或进行回访,5位患者对修复效果均表示满意。远期效果有待进一步观察。
  结论:全瓷修复体最终修复效果受众多因素的影响,因此在美学区缺损修复中,应根据患者的实际情况选择合适的修复方案,以取得较好的美学效果,并能在最大程度上保存患者剩余牙体组织、恢复患者缺损前的功能状态,提高患者的满意度。
ORAL AND MAXILLOFACIAL SURGERY 大连医科大学 2018(学位年度)
摘要:背景:放射性颌骨坏死(ORN)是患者接受颌面部放射治疗后最为严重的并发症之一。不论是根治性放疗或是辅助性放疗均可能导致放射性颌骨坏死。临床上治疗方法不一而足,包括抗生素治疗、超声治疗、高压氧治疗以及外科手术治疗。保守治疗避免了侵入性操作,简单易行,但治疗周期长,见效慢。病情严重者经保守治疗无效,往往需要外科手术校正病变进展造成的损害。相对保守的外科手术术式通过死骨清创和伤口灌洗去除坏死组织和其中定植的细菌,较为激进的术式对坏死灶进行扩大切除的同时可能进行组织缺损的修复重建。随着近年来外科理念和技术的发展,血管化游离组织瓣越来越多地应用于颌面部缺损修复重建,包括放射性骨坏死的修复重建,且显著改善患者的生存质量。然而手术效果受到诸多因素的影响,既往放射治疗对受区组织及血管条件造成的损伤可能导致血管化游离皮瓣修复失败,给颌面外科医生造成困扰。本研究统计分析了北京大学口腔医院治疗放射性颌骨坏死的临床资料,包括手术术式、皮瓣类型、受区血管以及术后近期并发症等,并为进一步研究打下基础。
  目的:回顾北京大学口腔医院放射性颌骨坏死病例并收集患者住院信息。收集手术方法和修复重建方法对治疗相关资料进行分析。统计血管化修复重建病例组织缺损修复所使用的皮瓣和受区血管,分析血管蒂位于健侧相对于患侧对皮瓣成活的影响。
  方法:收集北京大学口腔医院诊断为放射性颌骨坏死患者,回顾病例资料并按照标准纳入和排除。分析2013-2016年北京大学口腔医院颌面外科收治的放射性颌骨坏死病例67例病例资料并根据手术方法分为3组。提取患者基本信息,包括年龄、性别、既往史、全身情况和烟酒史,收集原发肿瘤部位、诊断和治疗史。收集放射性颌骨坏死相关资料,包括临床体征、手术术式、皮瓣类型、受区血管名称及是否为放射性颌骨坏死病灶同侧血管。并分析近期并发症及可能原因、再次手术方法等。
  结果:研究共纳入67例放射性颌骨坏死病例,男性45例,女性22例,平均年龄58.42岁(标准差1.953),所有患者均接受手术治疗。67例患者按照治疗方式归纳为3组:第一组,病灶清创刮治组(38.8%),本组患者接受了死骨刮治和周围受累组织的清创。第二组,扩大切除同期修复重建组(52.2%),其中应用的血管化游离组织瓣有腓骨瓣(80%)和股前外侧皮瓣(11.4%);带蒂皮瓣有胸大肌瓣(5.7%)和颏下岛状瓣(2.9%)。第三组,扩大切除未行修复重建组(9%),本组患者截除病变骨组织后直接关闭伤口。所有病例均有放射治疗史,但原发肿瘤治疗方法不一,包括以下四种:进行单纯放射治疗者占13.4%(9/67例),手术和辅助放射治疗者占52.2%(35/67例),放射治疗和化学药物治疗者占11.9%(8/67例),手术联合放射治疗和化学药物治疗者占22.4%(15/67例)。原发肿瘤诊断包括鳞状细胞癌(41.8%),鼻咽癌(22.4%),腺样囊性癌(14.9%),淋巴瘤(6%),粘液表皮样癌(1.5%)和口腔转移癌(3%)。手术在放疗后4-360个月,中位时间间隔60个月,IQR(36-108)月。统计所有修复重建病例,血管化游离组织瓣修复受区使用放射性骨坏死同侧血管吻合者占比85.7%(30/35),使用对侧血管吻合者占比5.7%(2/35),带蒂皮瓣修复而未行血管吻合者占比8.6%(3/35)。最常用的受区动脉为面动脉,占比42.9%(15/35),此外依次为舌动脉25.7%(9/35),甲状腺上动脉17.1%(6/35),颈动脉2.9%(1/35)和颞浅动脉2.9%(1/35)。用于吻合的静脉按照频率大小依次为颈外静脉48.6%(17/35),颈内静脉28.6%(10/35),面静脉8.6%(3/35),颈前静脉2.9%(1/35)和颞浅静脉2.9%(1/35)。第一组患者并未发现明显的近期术后并发症,而另外两组的并发症发生率分别为第二组20%(7例)和第三组16.7%(1例)。对其进行归因分析发现,第二组中2例(5.7%)起自动脉危象,2例(5.7%)起自静脉危象,低钾血症1例(2.9%),部分皮瓣坏死1例(2.9%)以及面神经损伤1例(2.9%)。
  结论:放射性颌骨坏死早期经常采用保守的手术方式来控制病情,避免进一步损伤。然而,有许多患者需要进行多次死骨和组织清创术,甚至需要进行扩大切除手术以控制病情。放射性颌骨坏死的外科治疗有多种方法,而腓骨瓣是下颌骨放射性骨坏死截骨术后最为常用且可靠的修复方法,而股前外侧皮瓣则更多地应用于上颌骨切除术后。带蒂皮瓣则用于游离皮瓣修复失败后的挽救性手术或不具备游离皮瓣修复条件的患者。术后密切监测并及时发现皮瓣危象对颌面外科医生探查挽救皮瓣具有至关重要的作用。
[硕士论文] 吴筱昀
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  生活中发现,长期饮茶者其牙齿表面容易沉积色素。我们从中得到启发:茶叶中的某些物质在牙面有一定的附着能力。本课题在前期研究已证明:相比于绿茶、白茶和乌龙茶,红茶在年轻恒牙窝沟处的色素粘附量达到最大,并且随着红茶浓度的增加,窝沟处色素的粘附量也随之增加。本实验通过茶色素能在年轻恒牙窝沟中粘附而达到龋病的预防,进一步探讨茶色素作为龋病预防措施的可行性。
  方法:
  1.茶色素抑制变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)和粘性放线菌(Actinomyces viscosus,A.viscosus)生长产酸的体外实验:将S.mutans和A.viscosus分别接种于茶色素浓度为0.1875g/L、0.375g/L、0.75g/L、1.5g/L、3g/L、6g/L、12g/L、24g/L的BHI-茶色素混合液(实验组)、0.3125g/L的NaF溶液(阳性对照组)以及不含茶色素的BHI溶液(阴性对照组)中37℃厌氧(80%N2、10%CO2、10%H2)培养12h。将对照组和实验组培养12h的S.mutans和A.viscosus菌液通过稀释平板计数法计算菌落形成单位(Colony Forming Units,CFU),继续培养12h后测定实验组和对照组上清液的pH值。
  2.不同干燥时间下茶色素粘度的改变:通过65℃恒温干燥箱(茶色素烤焦温度>65℃)来改变其粘稠度。每干燥1d的茶色素溶液设定为1个实验组(有1d-19d即第1-第19个实验组),对照组为茶色素原溶液。利用NDJ-1S数字粘度计测定每组茶色素粘度,探究其粘度与干燥时间的关系。
  3.将消毒处理过的102颗离体牙随机分到不同粘稠度的茶色素组中,通过渗透实验,观察茶色素进入窝沟的深度,计算渗透率,并用扫描电镜(Environmental Scanning Electron Microscope ESEM)观察不同粘度的茶色素在窝沟中的粘附情况。
  结果:
  1.1)S.mutans组和A.viscosus组菌落计数值经方差分析,各组间数值差异有统计学意义;各实验组CFU值均小于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);S.mutans组中(0.1875g/L T、0.375g/L T、0.75g/L T)组CFU值大于(3g/L T、6g/L T、12g/L T、24g/L T)组,差异有统计学意义(P<0.05);A.viscosus组中(0.3125g/L NaF、0.1875g/L T、0.375g/L T、0.75g/L T)组CFU值大于(1.5g/L T、3g/LT、6g/LT、12g/LT、24g/LT)组,差异有统计学意义(P<0.05)。2)S.mutans和A.viscosus组中,两组培养基上清液的pH值随茶色素浓度的增加而升高(P<0.05)。S.mutans组中,培养基上清液pH值在茶色素浓度为6g/L时候达到最大;A.viscosus组中,培养基上清液pH值在茶色素浓度为3g/L时候达到最大,两组与对照组差异显著均有统计学意义(P<0.05)。
  2.随着干燥时间的增加,茶色素的粘度有增高趋势,当干燥时间为11d时,茶色素粘度达最大值,随后粘度下降并逐渐趋于稳定。Pearson相关性分析显示,时间和粘度的相关系数为0.692,(0.3<0.692<0.8),两者呈中度相关性,对应的显著性(P<0.05),差异显著,有统计学意义。
  3.干燥时间为4-7d的实验组渗透率与对照组差异不明显,无统计学意义(P>0.05);干燥时间为8-19d的实验组渗透率均高于对照组(P<0.05)。干燥时间为9d、10d、11d三个实验组渗透率与粘度呈正相关,组间差异有统计学意义(P<0.05)。
  结论:
  茶色素对S.mutans和A.viscosus生长和产酸均有抑制作用,当茶色素浓度为12g/L,粘度为1.86667mPa·s时,其在年轻恒牙窝沟中的渗透率较高,粘附效果较好。
[硕士论文] 许雄程
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:牙周炎是由菌斑微生物所致的慢性炎症性疾病,可破坏牙周支持组织。如何利用引导性组织再生术(guided tissue regeneration,GTR)实现重度牙周炎患者牙周组织的再生,尤其是在患牙拔除后余留形态不良的骨缺损上进行引导性骨再生术(guided bone regeneration,GBR),是临床医生长期以来关注的重点。随着工程技术的发展,采用3D打印技术之一的选择性激光熔化技术(selective laser melting,SLM)有望根据患者牙周组织缺损的形态制备个性化钛网作为屏障膜应用于重度牙周炎患牙的GTR及患牙拔除后的GBR治疗,以期最大程度地获得牙周组织的再生。
  目的:
  采用SLM制备含铜钛合金,并与巨噬细胞RAW264.7、成骨细胞MC3T3-E1、骨质疏松(osteoporosis,OP)大鼠的巨噬细胞和成骨细胞共培养,探讨该含铜钛合金对上述细胞生物学行为的影响。
  方法:
  1.采用SLM制备含铜钛合金Ti6Al4V-Cu,通过SEM、XRD、EDS、ICP与XPS对材料的性能进行检测。2.将Ti6Al4V-Cu与巨噬细胞RAW264.7共培养,检测Ti6Al4V-Cu对细胞增殖、黏附、细胞极化和炎症相关因子的表达;通过RANKL诱导材料表面RAW264.7细胞向破骨细胞分化,荧光显微镜观察破骨细胞的发生,Real-time PCR检测细胞中破骨分化基因的表达。3.将Ti6Al4V-Cu与成骨细胞MC3T3-E1共培养,观察MC3T3-E1细胞在Ti6Al4V-Cu表面的黏附,检测MC3T3-E1细胞的增殖、碱性磷酸酶活性和成骨相关基因的表达。4.采用双侧卵巢切除术建立SD大鼠OP模型,分离培养OP大鼠巨噬细胞与成骨细胞,并分别与Ti6Al4V-Cu共培养。5.检测Ti6Al4V-Cu表面OP巨噬细胞的增殖、黏附与极化,通过Real-time PCR、ELISA、western blot和免疫荧光染色在基因与蛋白水平检测炎症因子与巨噬细胞极化标志物的表达。6.采用RANKL破骨诱导对Ti6Al4V-Cu表面OP巨噬细胞进行破骨诱导,观察破骨细胞的形成,通过real-time PCR、western blot和免疫荧光染色检测破骨分化相关基因与蛋白的表达。7.观察Ti6Al4V-Cu表面OP成骨细胞的黏附与增殖,并检测细胞成骨分化基因的表达,通过real-time PCR、western blot和免疫荧光染色检测成骨细胞胞外基质I型胶原(collagen1α1,Col-1α1)和赖氨酸氧化酶(lysyl oxidase,LOX)的表达。
  结果:
  1.SLM制备的含铜钛合金Ti6Al4V-Cu中铜以Ti2Cu的形式存在,铜离子可从Ti6Al4V-Cu中析出,其表面氧化膜中的铜以Cu2O或TiCuOx的形式存在。2.Ti6Al4V-Cu抑制巨噬细胞RAW264.7的激活、增殖以及促炎细胞因子的表达,促进抗炎细胞因子的表达,在下调M1型巨噬细胞标志物的表达的同时可上调M2型巨噬细胞标志物的表达。3.Ti6Al4V-Cu可抑制巨噬细胞RAW264.7细胞分化形成破骨细胞以及破骨分化相关基因的表达。4.Ti6Al4V-Cu对成骨细胞MC3T3-E1的黏附、增殖与成骨分化功能无显著影响。5.Ti6Al4V-Cu可抑制OP大鼠巨噬细胞的增殖与黏附,下调细胞促炎细胞因子和M1型巨噬细胞标志物的表达,上调细胞抗炎细胞因子和M2型巨噬细胞标志物的表达。6.Ti6Al4V-Cu可抑制OP大鼠巨噬细胞分化为破骨细胞,下调OP大鼠巨噬细胞破骨分化相关基因与蛋白的表达。7.Ti6Al4V-Cu不影响OP大鼠成骨细胞的黏附、增殖及成骨分化,可上调细胞胞外基质Col-1α1和LOX的表达。
  结论:
  1.采用SLM可成功制备含铜钛合金Ti6Al4V-Cu。2.Ti6Al4V-Cu可抑制巨噬细胞炎症反应与破骨分化,不影响成骨细胞的增殖与成骨分化,促进成骨细胞胞外基质的形成。3.Ti6Al4V-Cu有望应用于个性化屏障膜的制备,对重度牙周炎患者尤其是伴有OP的牙周炎患者的GTR及GBR治疗具有潜在的应用价值。
[硕士论文] Watinee Ampawa
Orthodontics and Dentofacial Orthopaedics 大连医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:成人错(牙合)畸形矫治不同于青少年及儿童,其特殊性和复杂性往往导致成人正畸治疗难度明显增加,如伴有Ⅱ类、Ⅲ类、开(牙合)、深覆(牙合)、下颌偏斜等骨性各错(牙合)。本文通过分析两例伴有开成人错(牙合)畸形患者应用MEAW技术治疗,了解并探究MEAW技术的治疗要点,为正畸临床治疗选择治疗方案提供参考。
  方法:对两例成人错(牙合)畸形病例进行报告,一例为24岁男性,主诉关节疼痛,检查为骨性Ⅲ类错(牙合),下颌左偏,前牙开(牙合),左侧尖牙反(牙合)及左侧颞下颌关节疼痛。治疗方案为通过MEAW技术配合弹性牵引直立牙齿获得间隙,排齐整平牙列,建立良好的覆(牙合)覆盖关系。经过MEAW治疗后,患者侧貌得到了改善。笑线与下唇线一致,颏部稍向左偏,左侧颞下颌关节间隙增大,关节症状消失。前牙开(牙合)解除,覆(牙合)覆盖达到正常,咬合关系基本改善。
  另一例是19岁女性,主诉牙齿不齐,检查为骨性Ⅱ类错(牙合),下颌右偏,下颌后缩,深覆(牙合)深覆盖。治疗方案为先用(牙合)垫来打开咬合,去除(牙合)干扰,MEAW技术配合弹性牵引直立牙齿及调整咬合关系,并引导下颌向前,实现正常的覆(牙合)覆盖关系。
  结果:治疗完成后,患者侧貌得到了改善,下颌向前并向左侧移动,颏部稍向右偏,双侧颞下颌关节间隙增大。磨牙和尖牙关系达中性关系,覆(牙合)覆盖正常,建立较理想咬合关系。
  结论:由于MEAW可以通过单独调整牙齿三维方向来调整咬合,可以一次性直立数颗牙齿,所以在一些复杂的错(牙合)畸形病例治疗中,尤其是利于更加精确地控制(牙合)平面,获得牙列间隙,尽量避免拔牙治疗。
[硕士论文] 蓝春华
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:构建体外人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)炎症模型,研究姜黄素对该模型hDPCs炎症相关细胞因子mRNA表达水平及成骨分化的影响.
  方法:1、CCK8法检测不同浓度大肠杆菌来源的LPS(Escherichia coli lipopolysaccharide,E.coli LPS)对hDPCs的细胞毒性作用.2、实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative polymerase chainreaction,Real-time PCR)检测不同浓度E.coliLPS刺激hDPCs3、6、12、24h后炎症相关因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及COX-2的mRNA表达水平,ELISA检测E.coli LPS刺激hDPCs其IL-6的蛋白表达水平,从而筛选构建体外hDPCs炎症环境最适宜的E.coli LPS浓度及相应刺激时间.3、CCK8法检测不同浓度姜黄素作用hDPCs24、48h后细胞活力值.4、Real-time PCR检测姜黄素对炎症环境下hDPCsIL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及COX-2的表达调控作用,并检测不同浓度姜黄素与LPS组合后,hDPCs NLRP3的mRNA表达水平.5、成骨诱导培养7、14天,通过碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色及ALP活性实验检测姜黄素对LPS刺激的hDPCs ALP活性表达水平.
  结果:1、CCK8实验可见1,5,10μg/ml E.coli LPS刺激组与对照组相比,hDPCs细胞活力值均无显著差异(p>0.05).2、1μg/ml E.coli LPS刺激hDPCs3h,可见IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及COX-2的mRNA表达水平上调(p<0.05).且IL-1β、TNF-α、IL-6及IL-8的mRNA表达量在第3h达到高峰.此外,ELISA结果亦可见1μg/ml E.coli LPS刺激组IL-6的蛋白表达含量增加(p<0.05).3、0.5,1,5μmol/L姜黄素组分别与对照组相比,48h内hDPCs活力值均无明显差异(p>0.05),10μmol/L姜黄素组hDPCs活力降低(p<0.05).4、Real-time PCR结果可见,与单独1μg/ml LPS刺激组相比,0.5μmol/L姜黄素+LPS刺激组hDPCs TNF-α表达下调(p<0.05);1μmol/L姜黄素+LPS刺激组hDPCs IL-1β、TNF-α及COX-2表达下调(p<0.05);5μmol/L姜黄素+LPS刺激组hDPCsIL-1β、TNF-α及IL-6表达下调(p<0.05);而0.5,1或5μmol/L姜黄素+LPS刺激组hDPCs IL-8的mRNA表达水平均未有显著改变(p>0.05).5、Real-time PCR结果可见,5μmol/L姜黄素+LPS刺激组hDPCsNLRP3基因表达下调(p<0.05).6、ALP染色及ALP活性实验可见,连续培养7天,单独LPS成骨诱导组与无LPS成骨诱导组相比,hDPCs ALP活性未见明显差异(p>0.05).0.5,1μmol/L姜黄素+LPS成骨诱导组与单独LPS成骨诱导组相比,hDPCs ALP活性均无显著差异(p>0.05);连续培养14天后,单独LPS成骨诱导组hDPCs ALP活性表达降低(p<0.05).1μmol/L姜黄素+LPS成骨诱导组与单独LPS成骨诱导组相比,hDPCs ALP活性表达上调(p<0.05).
  结论:通过1μg/ml E.coli LPS刺激hDPCs3h,可成功构建体外hDPCs炎症模型.0.5~5μmol/L姜黄素抑制炎症环境下hDPCs多种炎症细胞因子基因的表达,发挥一定抗炎作用.1μmol/L姜黄素可能通过抑制hDPCs炎症因子的表达从而改善其ALP活性表达水平,有利于其成骨或成牙本质向分化.
[硕士论文] 黄志超
口腔医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:运用根管治疗术、活髓切断术、根尖外科手术对牙髓根尖周病进行治疗,观察其临床疗效。
  方法:选择2016年9月~2018年3月在福建医科大学附属协和医院口腔内科就诊患者,对其进行临床相关检查,作出临床诊断,根据患者病情制定合适的治疗方案。选取其中4个典型病例进行展示,其中一例行活髓切断术;两例行根管治疗术;一例行根尖外科手术。治疗完成后,对患者进行定期随访以评估临床疗效。
  结果:4例典型病例中,1例上颌第一磨牙6根管;1例上颌第二磨牙融合根4根管;1例下颌第一磨牙牙髓炎行活髓切断术;1例上颌侧切牙根尖周囊肿行根尖手术。所有病例均顺利完成治疗,病例短期追踪随访,疗效满意。
  结论:根管治疗术、活髓切断术、根尖外科手术能够有效治疗牙髓根尖周病,达到保存活髓或保存患牙的目的。适当的使用CBCT和配合显微镜能提高其治疗水平。
[硕士论文] 李群
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  观察骨膜蛋白(Periostin、PN或OSF-2)在口腔白斑和鳞状细胞癌患者组织及血清中的表达,分析其在口腔鳞癌发生发展过程中的作用,为监测口腔癌前病变白斑及鳞状细胞癌的发生、发展及预后等提供参考指标。
  方法:
  第一部分:(1)选择门诊和住院患者,收集40例口腔白斑和45例口腔鳞癌组织的石蜡切片,并以30例口腔正常黏膜作为对照,进行骨膜蛋白免疫组织化学染色(IHC)从蛋白的水平对骨膜蛋白的表达部位以及表达量进行检测,同时分析其表达与临床病理因素的相关性;(2)收集25例口腔白斑和45例口腔鳞癌新鲜组织,以30例口腔正常黏膜作为对照,进行实时荧光定量-聚合酶链式反应(Q-PCR),观察骨膜蛋白mRNA水平的表达。
  第二部分:(1)选择门诊和住院患者,收集25例口腔白斑和45例口腔鳞癌患者血清,并以30例健康人群作为对照,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中骨膜蛋白的浓度;(2)对口腔鳞癌患者中骨膜蛋白的表达与患者的年龄、性别、TNM分期、分化程度、浸润深度以及淋巴结有无转移进行相关性分析。
  结果:
  第一部分:(1)骨膜蛋白免疫组织化学染色显示,正常口腔黏膜、单纯增生白斑、异常增生白斑和口腔鳞癌组组织骨膜蛋白阳性细胞面积指数和积分光密度值(integrated optical density,IOD)分别为(2.51±1.30/15.41±1.63)、(2.70±1.26/15.66±1.17)、(14.23±0.42/33.13±1.07)、(33.47±1.77/51.29±2.67),口腔正常黏膜组、单纯增生白斑组、异常增生白斑组和口腔鳞状细胞癌组中骨膜蛋白的阳性细胞面积指数和IOD值逐步升高,除单纯增生白斑组与正常口腔黏膜组无统计学意义外,其余各组间均有统计学意义(P<0.05)。在口腔鳞癌组织中骨膜蛋白的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期以及有无淋巴结转移有关(P<0.05)。(2)三组组织中均有骨膜蛋白mRNA的表达,正常口腔黏膜、异常增生白斑和口腔鳞癌组组织骨膜蛋白mRNA分别为0.326074±0.412194、0.751156±0.250896、1.37044±0.500052,与正常口腔黏膜组织相比,口腔白斑、口腔鳞癌组织中骨膜蛋白mRNA升高,表达水平亦有统计学差异(P<0.05);(3)免疫组化实验方法和荧光定量PCR方法对骨膜蛋白检测结果一致性较好(Kappa=0.932>0.81)。
  第二部分:(1)通过酶联免疫吸附试验测得健康人群血清中骨膜蛋白的浓度为20.64±5.3ng/ml、异常白斑患者血清中骨膜蛋白的浓度为54.23±3.8ng/ml,口腔鳞癌患者血清中骨膜蛋白的浓度为81.06±10.1ng/ml。口腔白斑和鳞癌患者血清中骨膜蛋白的表达水平显著高于健康人群(P<0.05);(2)将鳞癌患者的基本临床信息与血清中骨膜蛋白的表达水平进行相关性分析,发现鳞癌患者肿瘤的TNM分期、侵袭浸润深度以及有无淋巴结转移等因素影响着血清中骨膜蛋白的表达(P<0.05)。
  结论:
  1.mRNA基因和蛋白水平均证明骨膜蛋白从正常口腔黏膜发展为口腔白斑最后恶变成鳞癌的过程中表达逐渐增强,提示骨膜蛋白参与口腔黏膜癌变的发生发展。
  2.通过对免疫组化法与荧光定量PCR法相关性进行分析发现两者具有一致性,可以采用免疫组化这种相对简便且低廉的方法对骨膜蛋白基因的表达变化进行初步检测。
  3.血清中骨膜蛋白的表达水平可作为监测口腔黏膜白斑向口腔鳞状细胞癌发展的参考指标,同时也可为口腔鳞癌侵袭以及预后提供判断依据。
[硕士论文] 诸葛继娜
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  研究赤藓糖醇对牙周致病菌牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)、伴放线聚集杆菌(Aggregatibacter actinomycetemcomitans,Aa)和粘性放线菌(Actinomyces viscosus,Av)生长及粘附功能方面的影响;同时探索不同浓度赤藓糖醇作用后的致病菌对牙周膜细胞炎症相关细胞因子mRNA表达水平的影响.
  方法:
  1.将Pg、Aa、Av三种致病菌接种于2、4、8、16、32、64、128g/L的赤藓糖醇-BHI液、及不含赤藓糖醇的BHI液中,37℃厌氧(80%N2、10%CO2、10%H2)培养一定时间,液体清亮无浑浊、沉淀生长的最低赤藓糖醇浓度为最低抑菌浓度.
  2.将实验溶液按赤藓糖醇质量浓度递增的顺序从左至右依次加到96孔板,接种Pg、Aa和Av,37℃厌氧(80%N2、10%CO2、10%H2)条件下培养一定时间,去上清,生物膜用甲醇固定后经结晶紫染色,乙酸置换生物膜中的结晶紫,酶标仪测置换液的OD值.
  3.将Pg、Aa、Av分别接种于MIC、1/2、1/4、1/8MIC这4个赤藓糖醇质量浓度的培养基以及不含赤藓糖醇的培养基,37℃厌氧(80%N2、10%CO2、10%H2)培养至对数期.将各浓度组的每种细菌分别离心并清洗后加入细胞DMEM培养基重悬,与培养至第4代的人牙周膜细胞共培养24h,设不含细菌的空白对照组,去上清,裂解细胞提取总RNA,逆转录,实时荧光定量PCR测IL-1β,IL-6,TNF-α的mRNA相对表达量.
  结果:
  1.以下为赤藓糖醇对三种细菌的最低抑菌浓度:
  牙龈卟啉单胞菌:64g/L
  伴放线聚集杆菌:128g/L
  粘性放线菌:128g/L
  2.赤藓糖醇对Pg、Aa、Av粘附功能影响的分析
  赤藓糖醇可影响Pg的粘附功能,且粘附能力与赤藓糖醇质量浓度有关.当赤藓糖醇质量浓度较低时(≤4g/L),各浓度组与对照组之间OD值相似;随着赤藓糖醇质量浓度的增加(≥8g/L),Pg OD值有所降低,且质量浓度越高的实验组,OD值越低;当质量浓度达到128g/L时,肉眼观察无生物膜形成,此时即使增加赤藓糖醇浓度也不会有更强抑制能力.
  赤藓糖醇对Aa、Av的作用效果与Pg相类似,但需要更高浓度的赤藓糖醇才能产生抑制效果.赤藓糖醇质量浓度为0g/L、2g/L、4g/L和8g/L这四个浓度时,细菌Aa、Av OD值无明显差别;随着赤藓糖醇质量浓度升高达16g/L以及更高时,细菌所产生的粘附功能有不同程度下降,128g/L时赤藓糖醇对Aa、Av抑制能力最强.综上所述,赤藓糖醇可抑制Aa、Av的粘附功能,且抑制效果呈浓度依赖性.
  3.经赤藓糖醇作用后的Pg、Aa、Av对牙周膜细胞IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA相对表达量影响的分析
  Pg组基因表达情况.不同浓度赤藓糖醇条件下培养的细菌,刺激牙周膜细胞产生IL-1β、IL-6、TNF-α的能力不同.当赤藓糖醇浓度为8g/L时,炎症因子量与不加赤藓糖醇的对照组无明显差别;浓度升高达到16g/L时IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA相对表达量才有所降低,且浓度越高,炎症因子mRNA相对表达量越低;但是,所有实验组炎症因子量始终高于未加细菌的空白对照组.
  Aa组基因表达情况.16g/L的赤藓糖醇浓度未对细菌的致炎性起明显作用,32g/L浓度下培养的Aa致病性开始受影响,诱导产生IL-1β的mRNA表达量下降,且浓度越高,抑制作用越强;64g/L浓度下TNF-α的基因相对表达量开始有显著降低,浓度越高,TNF-α量越低;128g/L赤藓糖醇浓度下Aa刺激牙周膜细胞产生IL-6的mRNA表达量开始下调,且程度较大;所有实验组炎症介质mRNA相对表达量均高于未加细菌的空白对照组.
  Av组基因表达情况.加入赤藓糖醇的实验组中,赤藓糖醇质量浓度在32g/L时已经开始抑制IL-6的mRNA表达量,64g/L时对IL-1β的基因表达量有明显抑制作用,128g/L时才开始对TNF-α的mRNA表达量起作用,且以上均有一个共同趋势,即随赤藓糖醇质量浓度升高,炎症介质mRNA相对表达量不断下降,所有实验组炎症因子mRNA表达量均高于未加细菌的空白对照组.
  结论:
  赤藓糖醇对Pg、Aa和Av的生长及粘附能力均有抑制作用,且在一定范围内,赤藓糖醇质量浓度越高抑制效果越明显;赤藓糖醇还可以通过某种方式对致病菌毒力因子起抑制作用,进而降低细菌的牙周致炎性,减少牙周膜细胞IL-1β,IL-6,TNF-α的mRNA相对表达量.
[硕士论文] 吴丽璇
口腔医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  比较不同冲洗液(蒸馏水/EDTA)协同PIPS(Photon induced photoacoustic streaming,光子诱导光声流效应)对根管壁玷污层的去除效果和牙本质显微硬度的影响,并探究不同根管表面微环境对人SCAP(Stem cells of apical papilla,根尖牙乳头干细胞)黏附形态和增殖的影响。
  方法:
  选取144个第三恒磨牙单根管牙根进行标准化预备及固定,将其随机分为6组,每组n=24:(1)NaClO组;(2)NaClO+EDTA组;(3)NaClO+PIPS(dH2O)组;(4)NaClO+PIPS(EDTA)组;(5)NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组;(6)NaClO+EDTA+PIPS(EDTA)组。实验均采用1.5%NaClO和17%EDTA进行根管冲洗,处理后的每组样本再随机分为四部分(每部分6个样本),分别进行以下实验研究:(1)扫描电镜观察根管表面清洁效果;(2)显微硬度计检测根管壁牙本质显微硬度;(3)SCAP与Ⅰ型鼠尾胶原支架混合植入根管培养7d,扫描电镜观察根管表面的细胞形态;(4)化学发光法检测根管内SCAP活细胞数量。
  结果:
  (1)根管表面清洁效果:NaClO组和NaClO+PIPS(dH2O)组牙本质表面覆盖厚而不均质玷污层,未见牙本质小管口开放;NaClO+EDTA组、NaClO+PIPS(EDTA)组和NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组牙本质表面部分覆盖玷污层,较多牙本质小管口开放;NaClO+EDTA+PIPS(EDTA)组牙本质表面未见玷污层覆盖,全部牙本质小管口开放。根管表面清洁度评分:NaClO+PIPS(dH2O)组与NaClO对照组清洁度评分相近,NaClO+PIPS(EDTA)组分数显著低于对照组和NaClO+PIPS(dH2O)组(p<0.05)。NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组与NaClO+EDTA对照组评分接近,NaClO+EDTA+PIPS(EDTA)组评分最低,与NaClO+EDTA对照组和NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组相比,结果均有统计学差异。
  (2)根管壁牙本质显微硬度检测结果:NaClO+PIPS(EDTA)组与NaClO组和NaClO+PIPS(dH2O)组相比,显微硬度值无显著性差异。NaClO+EDTA+PIPS(EDTA)组与NaClO+EDTA组和NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组显微硬度值也无显著差异。
  (3)扫描电镜观察细胞形态:NaClO组和NaClO+PIPS(dH2O)组根管壁表面完全被玷污层覆盖,贴壁生长的细胞呈长梭形,边缘呈钝角状或瘤状。其余各组根管表面清洁度越高,细胞越舒展,呈多边形且有更多细胞质突起。
  (4)细胞活力检测结果:NaClO+PIPS(dH2O)组与NaClO组活细胞数量无明显差别,而NaClO+PIPS(EDTA)组活细胞数量显著高于NaClO组和NaClO+PIPS(dH2O)组(p<0.05)。NaClO+EDTA+PIPS(dH2O)组与NaClO+EDTA组活细胞数量无统计学差异,而NaClO+EDTA+PIPS(EDTA)组活细胞数量最多且显著高于NaClO+EDTA组。
  结论:
  PIPS活化EDTA荡洗40s能有效去除根管玷污层,且对牙本质显微硬度无明显影响,其形成的根管表面微环境还能显著促进SCAP黏附和增殖。
[硕士论文] 吴玉铭
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:体外培养大鼠骨髓基质细胞(rat bone marrow stromal cells,rBMSCs),构建携带人牙骨质蛋白(cementum-protein,CEMP)1基因的慢病毒载体并转染rBMSCs,探讨CEMP1基因修饰对rBMSCs生物学行为的影响。
  方法:1.全骨髓贴壁法体外分离培养rBMSCs,通过成骨和成脂分化能力以及细胞表面标志物检测对rBMSCs进行鉴定;2.构建含人CEMP1基因的重组慢病毒过表达载体,通过RT-PCR及基因测序对重组载体进行鉴定;3.通过荧光显微镜观察转染后细胞荧光表达,流式细胞术检测转染效率,RT-PCR、Real-time PCR、免疫细胞化学和Western Blot检测转染后细胞CEMP1基因和蛋白的表达情况;4.通过检测转染后rBMSCs的成牙骨质相关基因表达,探讨CEMP1基因修饰对rBMSCs的影响。
  结果:1.成功分离培养rBMSCs;流式细胞术显示细胞高表达CD29和CD90;2.rBMSCs成骨诱导21d,茜素红染色可见红染的矿化结节;成脂诱导21d,油红O染色可见红染的空泡样脂滴;3.RT-PCR及基因测序证实成功构建携带人CEMP1基因的慢病毒表达载体;4.转染后rBMSCs在荧光显微镜下可见大量绿色荧光表达,流式细胞术检测结果证实具有较高表达率;5.经RT-PCR、Real-time PCR、免疫细胞化学及Western Blot检测,被转染的细胞高表达CEMP1基因和蛋白;6.Real-time PCR检测结果显示LV-CEMP1-EGFP组细胞BSP、OPN表达较LV-EGFP组和未转染组明显增高,差异具有统计学意义。
  结论:成功构建携带人CEMP1基因的慢病毒载体并转染BMSCs,CEMP1基因可促进rBMSCs成牙骨质相关基因的表达。
[硕士论文] 孙观文
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  研究不同浓度CGF(Concentrated Growth Factors,浓缩生长因子)、PRF(Plate Rich Fibrin,富血小板纤维蛋白)提取液对hDPSCs(human Dental Pulp Stem Cells,人牙髓干细胞)增殖的影响;获得最佳促增殖浓度,探讨该浓度提取液对牙髓干细胞迁移、成牙本质分化及相关因子表达的影响.
  方法:
  (1)组织块结合酶消化法获得牙髓细胞,单克隆法从中获得hDPSCs,采用免疫组化染色检测波形丝蛋白和角蛋白的表达,流式细胞术检测hDPSCs表面特异性标志物,成骨及成脂分化诱导鉴定其细胞干性.(2)反复冻融法制备CGF、PRF凝胶提取液,酶联免疫吸附法检测各提取液中TGF-β1和PDGF-AA的浓度;分别使用对照组:10%FBS组,实验组:10%、20%、30%、40%CGF和PRF提取液组与hDPSCs共培养,CCK-8法检测细胞活性,获得最佳促hDPSCs增殖浓度.(3)细胞划痕实验比较10%FBS、20%CGF、20%PRF对hDPSCs迁移的影响.(4)茜素红染色、ALP染色和ALP活性试剂盒分别检测10%FBS、20%CGF、20%PRF对hDPSCs成骨诱导分化的影响.(5)qRT-PCR检测10%FBS、20%CGF、20%PRF对hDPSCs成牙本质诱导分化过程中相关特异性基因表达的影响.
  结果:
  (1)本实验条件下使用酶消化法结合单克隆法从新鲜离体牙中获得具有间充质干细胞特性的hDPSCs;
  (2)100%CGF、100%PRF提取液中,TGF-β1和PDGF-AA的含量无统计学差异,10%、20%、30%、40%CGF和PRF提取液促进hDPSCs增殖能力不同,20%CGF组和20%PRF组促进hDPSCs增殖能力最强(P<0.05),20%CGF组促进hDPSCs增殖能力比20%PRF组强(P<0.05);
  (3)与对照组相比,20%CGF和20%PRF均抑制hDPSCs迁移能力(P<0.05),20%PRF组抑制hDPSCs迁移能力最强(P<0.05);
  (4)茜素红染色和ALP染色结果显示在促进hDPSCs成骨分化能力由强到弱依次为20%PRF组、20%CGF组、10%FBS组,ALP活性检测显示20%PRF组和20%CGF组促进hDPSCs成骨分化能力相对于对照组强(P<0.05),20%PRF组优于20%CGF组(P<0.05);
  (5)qRT-PCR检测结果显示:第3天时,20%CGF组DSPP表达量最高(P<0.05);20%PRF组BMP-2和TGF-β1表达量最高(P<0.05),各组之间DMP-1表达量无统计学差异;第7天时,20%PRF组高表达TGF-β1和DMP-1(P<0.05),各组之间DSPP、BMP-2表达量无统计学差异;第14天时,20%CGF组和20%PRF组DSPP、BMP-2、TGF-β1、DMP-1表达量与对照组相比,具有统计学差异,其中20%CGF组DSPP、BMP-2表达量最高(P<0.05),20%PRF组中TGF-β1、DMP-1表达量最高(P<0.05).
  结论:
  (1)本实验条件下成功获得具有良好增殖和分化能力的hDPSCs;
  (2)10%、20%、30%、40%CGF和PRF提取液促进hDPSCs增殖,20%CGF组促hDPSCs增殖能力更强;
  (3)20%CGF和20%PRF均抑制hDPSCs迁移能力,20%PRF组抑制hDPSCs迁移能力更强;
  (4)20%CGF和20%PRF均促进hDPSCs成骨分化能力,20%PRF组促进hDPSCs成骨分化能力比20%CGF组强;
  (5)20%CGF、20%PRF提取液均能促进hDPSCs成牙本质分化,20%CGF组促进DSPP、BMP-2基因表达;20%PRF组促进TGF-β1、DMP-1基因表达.
[硕士论文] 熊瑶
口腔临床医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:牙周炎是由菌斑生物膜引起的,累及牙周支持组织(牙周韧带、牙槽骨和牙骨质)的炎症性、破坏性疾病,是成年人牙齿缺失的最主要原因,是危害人类口腔和全身健康的主要口腔疾病。治疗牙周炎的最终目标是创造一个在健康牙周组织条件下能行使良好功能的牙列。传统的治疗方法只停留在去除病因、控制炎症的阶段,而临床上常用的手术方法包括引导性组织再生术、骨移植术、各种生长性因子的探索应用等,虽然有一定的疗效,但仍然无法完全恢复牙周组织的功能和生理状态。因此,再生和重建具有功能学意义的牙周韧带、牙骨质和牙槽骨,才是彻底治愈牙周炎的重点。在临床上,获得牙槽骨的再生常较容易,但往往新生的牙槽骨与牙根之间会形成长结合上皮或根骨粘连,而长结合上皮对牙周感染抵抗能力较差,根骨粘连属于病理性愈合,很难形成牙骨质-牙周韧带-牙槽骨间的双向界面,从而导致牙周病复发。因此,如何获得牙周组织功能性的再生关键在于形成牙槽骨-牙周韧带和牙骨质-牙周韧带间有效的结合,这对于恢复牙列的正常生理功能至关重要。
  近年来,随着组织工程学的诞生和发展,依赖种子细胞、支架材料、生物活性因子三者之间的相互作用,用于牙周组织再生,成为目前牙周病学研究的热点。因此,寻找来源丰富、取材便利、具有增殖分化潜能的种子细胞,良好的细胞移植载体及两者赖以生存的有效微环境是目前牙周再生组织工程研究中的热点领域。有效的微环境对于组织工程来说是非常重要的。干细胞因其独有的自我更新能力和多向分化潜能,可在不同的环境诱导条件下向不同的方向分化,如成骨/成牙本质、成肌腱、成脂等方向分化。因此,本实验利用干细胞的这一特性,以及本课题组前期的干细胞和支架材料相关研究成果,运用聚乙醇酸PGA复合材料结合周期性力学刺激及成骨诱导液联合诱导牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs),从体内和体外两个方面,研究双向(成骨/成牙本质向、成肌腱/韧带向)诱导对人牙髓干细胞分化能力的影响。
  本研究内容包含:第一部分检测人牙髓组织中肌腱/韧带及牙体硬组织相关蛋白表达情况,发现牙髓组织显著表达肌腱/韧带及牙本质相关蛋白,特别是在成牙本质细胞层;同时,发现牙髓组织表达成骨相关蛋白;第二部分分离培养了人成体牙髓干细胞,并证实其成骨向分化潜能;同时,研究聚乙醇酸(polyglycolic acid,PGA)复合支架及成骨培养液联合诱导牙髓干细胞双向分化,发现双向诱导培养可刺激牙髓干细胞同时向肌腱及骨组织方向分化,且肌腱/韧带及骨组织相关的基因可在不同时间点表达;最后,我们在前两部分的实验结果基础上,进一步研究成骨向诱导的DPSCs-PGA支架在裸鼠模型体内力学刺激的条件下形成相关组织的情况。经组织学染色等方法观察形成的胶原情况,发现形成的组织外侧可观察到波浪状胶原纤维,组织中间部位可形成矮柱状紧密排列的成骨样细胞,且可同时表达肌腱及牙体硬组织相关蛋白,推测可形成肌腱及牙体硬组织样组织。本实验的研究成果和发现为利用干细胞和生物材料修复牙周软硬组织提供了新的理论依据和技术手段。
[硕士论文] 施志宏
口腔医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:运用树脂嵌体、复合树脂间接导板技术对恒牙牙体缺损病例进行修复,观察其临床疗效。
  方法:收集因龋坏、外伤等因素造成的恒牙牙体缺损的临床病例,对病例进行诊断、治疗,选取其中4个典型病例进行展示,其中二例恒后牙行树脂嵌体修复,两例恒前牙行复合树脂间接导板修复术,并对临床效果进行评估以及跟踪随访。
  结果:树脂嵌体修复后牙龋源性牙体缺损,咬合功能良好,可保留更多牙体组织,为后期的治疗提供更多的选择。复合树脂间接导板分层技术在修复前牙冠折、间隙关闭病例中,美学效果理想,成本低廉。病例通过短期随访,效果良好。
  结论:树脂嵌体和树脂间接导板修复技术修复不同类型的牙体缺损,微创美观,是值得推荐的方法。
[硕士论文] 黄艳华
口腔医学 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:髓室底穿孔是由于牙髓治疗时操作不当、病理性吸收等造成的髓腔和牙周组织的贯通,其中相当大的一部分比例是由于牙髓治疗时操作不当造成,严重的可能要拔除患牙,给患者口腔健康及生理功能带来不良影响。治疗时除了要熟悉掌握牙齿的解剖形态,还要小心谨慎,规范操作,防止意外的髓室底穿孔。如果发生髓室底穿孔,要正确评估患牙。根尖未闭合的牙齿,根管治疗时,常因根尖孔粗大,采用常规的根管充填不能很好的封闭根尖区,导致治疗的失败。MajoranaA等的研究报道称17.24%的外伤牙即使完善根管治疗,也可能出现牙根外吸收。无机三氧化矿物聚合(MTAmineral trioxide aggregate)具有的生物相容性优良、封闭效果好,边缘渗漏少、在潮湿的工作环境中也可以正常固化,广泛应用于临床上髓室底穿孔、根管侧穿的修补,根尖屏障等,MTA的强碱性还能中和牙根外吸收酸性环境,产生对牙根外吸收细胞不利的环境。本文主要就MTA材料在髓室底穿孔及根尖屏障术中的应用展开阐述,重点观察根管内充填MTA后牙根外吸收的变化,并对各病例的病因以及树脂嵌体修复、瓷嵌体修复、树脂分层修复、根管治疗等治疗的相关问题进行讨论。病例一为医源性髓室底穿孔患者,应用MTA进行髓室底穿孔的修补,常规根管治疗,全冠修复恢复患牙的美观和功能,对36采用尽量保存牙体组织的瓷嵌体修复;病例二为牙外伤导致牙髓坏死和根尖周组织炎症,根尖发育停止,根尖未完全闭合,伴牙根中部发生外吸收的年轻恒牙,通过使用MTA进行根尖屏障,通过锥束形CT(CBCT cone beam CT)观察到根尖阴影明显缩小,牙根外吸收停止;病例三是36、46龋病导致的慢性牙髓炎,采用常规的根管治疗术(RCTroot canal therapy)后行36的树脂分层充填修复和46的树脂嵌体修复;病例四是44龋病导致的急性牙髓炎,外院治疗无法缓解疼痛,通过拍摄X线及显微镜配合发现44牙根管为近远中向的1-2型根管,对遗漏的远中根管予以治疗后症状消失,根管治疗后树脂分层充填修复。
[硕士论文] 王英姿
口腔临床医学 山东大学 2018(学位年度)
摘要:正畸牙移动是指在矫治力的作用下,压力侧发生骨吸收、张力侧发生骨沉积,从而使牙齿在牙槽骨中的位置产生改变的过程;这主要通过成骨、破骨细胞的骨形成和骨吸收作用实现的。近年来,人们口腔健康意识的提高和生活水平的改善,使尼古丁相关性牙周炎要求正畸治疗的患者数量越来越多。牙周炎患者的骨丧失,也与成骨、破骨细胞功能密切相关。在尼古丁相关性牙周炎患者正畸治疗中,矫治力、炎性牙周组织、尼古丁均可通过不同的方式参与调控成骨、破骨细胞的活化、分化和成熟的过程,影响牙周骨组织的改建进程,此外,这些因素间也可互为影响因素,不利于牙周组织健康。因此,如何高效、安全的移动牙齿,保护骨组织,成为一个亟待解决的问题。研究证明,α7乙酰胆碱受体抑制剂,如美加明、银环蛇毒素等,可通过拮抗尼古丁对α7nAChR的激活作用,抑制炎症相关细胞因子表达量的增加及破骨促进作用。新斯的明是α7nAChR拮抗剂,猜测其对骨改建的作用与α-BTX近似,抑制尼古丁的破坏作用。因此,本实验从新斯的明对尼古丁相关性牙周炎患者正畸牙移动的作用着手,探讨可能的分子生物学机制,以期为临床治疗提供新的思路。
  目的:
  本研究通过对大鼠建立尼古丁相关性牙周炎牙移动模型,探索α7nAChR拮抗剂新斯的明在该模型牙移动过程中对骨改建的影响,以便为控制牙齿高效、安全的移动提供新的实验依据。
  方法:
  选取6月龄雄性Wistar大鼠36只,根据随机数表法将其分为3组:低浓度尼古丁组(0.83mg/kg/d,A组)、高浓度尼古丁组(1.67mg/kg/d,B组)、对照组(C组),每组内分为7d、14d、21d3个亚组。首先建立大鼠牙周炎模型,建模前3d开始实验组(A、B组)分别腹腔注射不同量的尼古丁溶液,对照组(C组)腹腔注射0.5ml生理盐水。2周后,去除结扎丝线,建立大鼠OTM模型,实验组(A、B组)每天肌肉注射1ml/kg甲硫酸新斯的明注射液,对照组(C组)肌肉注射0.5ml生理盐水。在加力后第7、14、21d,每组处死4只老鼠,得到包括磨牙在内的左侧上颌骨标本,测量第一磨牙向近中移动的距离。所有标本完成脱钙后包埋,制作组织切片,进行苏木精-伊红染色、抗酒石酸碱性磷酸酶染色,观察骨组织在多因素联合作用下的改建情况。
  结果:
  1.OTM距离:随加力时间增长,OTM距离逐渐增大。肌肉注射新斯的明后第7、14d,低浓度尼古丁组与对照组的数值差无统计学意义(P>0.05),仅21天的距离差有意义(P<0.05)。在3个时间节点,高浓度尼古丁组与另外两组的数值差均有统计学意义(P<0.05)。在第1、2、3个7d内,3组大鼠牙移动的距离先增加后减小,在第7~14d时,牙移动最为明显。高浓度组与对照组相比较,在第1、2、3w内的差异均有统计学意义(P<0.05),而与低浓度组相比,仅在第1、2w的差异有统计学意义(P<0.05),第3w的差异无统计学意义(P>0.05)。
  2.染色:切片进行HE染色观察见,各组的压力侧牙周膜内纤维排列紊乱,牙周膜间隙变窄,牙槽骨表面可见破骨细胞形成的骨陷窝(Howship陷窝),其内有多核巨细胞存在。3组大鼠标本破骨细胞的数量变化趋势一致,7天时观察到破骨细胞数量最多,14天、21天依次减少。在张力侧血管受牵拉、直径增大,牙周间隙增宽,牙槽骨表面排列着成骨细胞。在新形成的骨质与原有的骨质之间,可见明显的分界线。
  3.TRAP染色:在7d、14d、21d3个时间节点上,破骨细胞计数均为高浓度尼古丁组破骨细胞计数数值最高,对照组数值最低,低浓度尼古丁组介于二者之间。各组的破骨细胞数值在加力第7d时最高,14d、21d依次降低。第7、14d,高浓度组与另外两组间的差异在均有统计学意义(P<0.05),而低浓度组与对照组比较,差异无意义(P>0.05)。各组间破骨细胞数值在第21d时近似,差异无统计学意义(P>0.05)。
  结论:
  1.新斯的明在大鼠体内能拮抗尼古丁通过激活α7nAChR而产生的促进破骨细胞的活化、分化、成熟作用,使骨改建过程趋于稳定。
  2.该过程可能与NF-κB通路、RANKL/RANK/OPG轴等骨偶联机制的调控有关。
[硕士论文] 朴世上
中西医结合临床 延边大学 2018(学位年度)
摘要:目的:通过灌胃清肺泻肝汤治疗2型糖尿病胰岛素抵抗小鼠,来测定小鼠的体重、空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数的变化。最后通过上述结果来探讨清肺泻肝汤对2型糖尿病胰岛素抵抗小鼠的保护作用。
  方法:把60只小白鼠饲养21天后,随机选择10只作为正常的标准,50只给它们吃高脂肪高糖量的食物,并在它们的腹腔打入链脲佐菌素诱导T2DM,造模成功后,随机分为清肺泻肝汤高、中、低剂量组,消渴丸组、糖尿病模型组,每组10只,每组给予对应药物治疗28天。观察并且测量小白鼠的体重、空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素水平。
  结果:高脂高糖饮食喂养的小白鼠体重显著地上升,造模型之后小白鼠之体重显著减少,灌胃以后体重减少不太显著。与糖尿病模型组比较,清肺组能够降低空腹血糖,有统计学意义(P<0.05);与糖尿病模型组比较,清肺组能够降低胰岛素抵抗指数,有统计学意义(P<0.05);与糖尿病模型组比较,清肺组能够降低甘油三酯,有统计学意义(P<0.05);与糖尿病模型组比较,清肺组能够降低低密度脂蛋白,有统计学意义(P<0.05)。
  结论:经过研究分析发现清肺泻肝汤具有降血糖及降血脂等作用,也可改善胰岛素抵抗指数,可缓解胰岛素抵抗。清肺组与消渴丸组比较降血糖、降血脂、降低胰岛素抵抗指数等作用相当,表明清肺泻肝汤对降低链脲佐菌素诱导2型糖尿病模型小鼠对降低血糖和血脂有一定的治疗效果。并能有效改善胰岛素之抵抗。
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