绑定机构
扫描成功 请在APP上操作
打开万方数据APP,点击右上角"扫一扫",扫描二维码即可将您登录的个人账号与机构账号绑定,绑定后您可在APP上享有机构权限,如需更换机构账号,可到个人中心解绑。
欢迎的朋友
万方知识发现服务平台
获取范围
  • 1 / 92
  (已选择0条) 清除 结果分析
找到 1831 条结果
[硕士论文] 赵慧姝
中西医结合临床 黑龙江中医药大学 2018(学位年度)
摘要:目的:观察中药结核丸对难治性肺结核阴虚火旺型患者的中医证候积分、肺部CT空洞直径改变情况、肺部空洞闭合率、痰菌转阴率,评价其疗效及安全性。
  方法:选择2017年1月至2017年6月就诊于哈尔滨市胸科医院门诊的100例患者,所有符合纳入标准的患者随机分为治疗组和对照组,每组各50例。对照组:给予异烟肼每日一次口服,每次0.3g;利福平每日一次口服,每次0.45g;乙胺丁醇每日一次口服,每次0.75g;吡嗪酰胺每日三次口服,每次0.5g。治疗组在对照组的基础上给予结核丸治疗,每日两次口服,每次20粒,疗程为3个月。观察两组患者总体疗效、中医症候疗效、中医证候积分、肺部CT空洞直径改变情况、肺部空洞闭合率、痰菌转阴率及安全性指标,评价其疗效及安全性。
  结果:1.治疗组临床控显例数与总效果例数都优于对照组,组间比较有统计学差异(P<0.05)。治疗组中医证候疗效为100%,与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。
  2.治疗组所有中医症状积分治疗前和治疗后比较,均有有显著差别(P<0.05),而对照组中潮热盗汗和骨蒸发热的症状治疗前后有显著差别,其它症状积分治疗前后虽有降低,但无显著性差异(P>0.05)。
  3.治疗后治疗组空洞直径值低于对照组,组间比较有显著性差异(P<0.05)。治疗组治疗后空洞直径低于治疗前,与治疗前比较有显著性差异(P<0.05)。
  4.治疗组闭合例数和空洞缩小程度均高于对照组,治疗后对照组和治疗组空洞闭合率有显著差异(P<0.05)。
  5.治疗组痰菌转阴率在疗程监察时点均高于对照组,治疗后对照组和治疗组痰菌转阴率有显著差异(P<0.05)。
  结论:1.中药结核丸联合西医治疗肺结核阴虚火旺型患者临床疗效显著。
  2.中药结核丸联合西医治疗能够改善肺结核阴虚火旺型患者的中医症状。
  3.中药结核丸联合西医治疗能够降低肺结核患者肺部空洞直径及改善空洞闭合情况。
  4.中药结核丸联合西医治疗能够提高肺结核患者痰菌转阴率
  5.中药结核丸临床使用安全性良好。
[博士论文] 李培
预防兽医学 华中农业大学 2018(学位年度)
摘要:结核病(tuberculosis,TB)主要是经呼吸道吸入结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)和牛结核分枝杆菌(Mycobacterium bovis,M.bovis)的气溶胶而引起的人畜共患传染病。M.bovis能够感染包括人和牛在内的多个宿主,并且能在牛和人之间广泛传播,从而严重危害着食品安全和公共卫生健康。全球大约三分之一的人感染了M.tb并长期处于潜伏性感染状态(Latent TB infection,LTBI)。然而LTBI患者缺乏典型的结核病临床病理特征,大约有5%~10%的LTBI患者中会发展成活动性结核病,一旦感染了人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)后LTBI患者结核病的发病率将提高21~34倍。目前,唯独被批准用于预防结核病的疫苗为卡介苗(Bacille Calmette-Gue'rin,BCG),其是人工体外培养M.bovis连续传代所得的减毒活疫苗。但卡介苗对成人肺结核患者免疫保护力约为60%,并且在免疫缺陷的接种人群中容易发展为散播性卡介苗(Disseminated BCG)。骨髓源细胞表达的触发受体(Triggering receptor expressed on myeloid cells,TREM),通过调控Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)诱导的信号而调节先天免疫反应,并因此在微调炎症反应过程中发挥着关键作用。TREM1在传染性急性炎症疾病中具有诊断前景,包括结核胸膜肺炎;并且在非传染性炎症疾病及癌症中有治疗前景,例如动脉粥样硬化。目前,全球结核病面临的挑战包括:对M.bovis感染人致病的传播机制缺乏认识,BCG对肺结核患者保护力低下的机制仍然并不清楚,而且对潜伏性结核患者缺乏有效诊断方法和治疗手段。
  因此本课题通过同位素标记相对与绝对定量(Isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术分析了两种强毒性分枝杆菌复合体(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)菌株,包括M.tb-H37Rv和M.bovis,以及疫苗菌株BCG感染的人巨噬细胞(Human monocytes,THP-1)的差异蛋白质组。探讨了强毒株M.bovis感染人细胞过程中,潜在的免疫应答和传播机制。并以减毒疫苗株BCG感染小鼠,解析宿主的免疫应答过程和宿主细胞杀伤BCG的机制。接着以TREM1基因缺失小鼠作为动物模型,探讨TREM1介导的BCG感染宿主后差异应答反应。进一步揭示了,BCG诱导宿主的免疫应答及肺外结核病发展的分子机制。并且利用温敏性噬菌体转染的方法,高效而快速的获取phoP、Rv1759c和LprG等相关基因的缺失株。在获取结核分枝杆菌基因缺失菌株的基础上,探索相关基因与细胞及小鼠互作过程中的差异反应。通过病原菌基因改造、免疫调节和药物调控三方面并从病原与宿主互作的过程开展研究,为结核病的防治提供新思路。主要研究内容如下:
  1.强弱毒株感染人巨噬细胞差异蛋白组学分析
  成功获得MTBC强弱毒株感染THP-1细胞的差异蛋白表达谱,特别是牛源强毒株M.bovis诱导人巨噬细胞蛋白质改变。共同鉴定了2032个蛋白质,其中61个具有显著性差异。利用Ingenuity Pathway Analysis(IPA)进一步分析发现,强毒株诱导的差异蛋白最显著的是吞噬体成熟通路和TNF信号通路,所涉及差异蛋白包括IFIT1、IFIT3、CCL20和ICAM1。61个差异蛋白中31个参与囊泡运输,由强毒株诱导的五个共同的差异蛋白包括NCF1和ICAM1,彼此相互作用且涉及免疫相关的信号通路,如白细胞跨内皮细胞迁移通路。BCG与H37Rv诱导THP-1不同的吞噬体成熟通路。不同毒力的分枝杆菌菌株感染巨噬细胞后,都能诱导大量差异显著的炎性细胞因子上调表达,但M.bovis诱导细胞IL-4表达水平显著性下调。溶酶体适配器蛋白LAMTOR2可能是牛分枝杆菌胞内物质运输的潜在靶标。揭示由M.bovis感染独特地诱导的MTHFD2,VPS26A和TBC1D9B蛋白,为结核病由牛到人的宿主传播靶点和新的生物诊断标识物。
  2.PMN在宿主应答BCG感染过程中的功能探索
  C57BL/6小鼠经呼吸道滴鼻方式感染BCG后,经流式细胞分析发现宿主通过中性粒细胞(Neutrophils,PMN)杀伤BCG,并且发现组织脏器存在不同程度的病理损伤。随着感染时间的推移,小鼠肺部的BCG逐渐被清除,在感染28天肺部检测不到BCG。经不同的感染途径,TREM1-/-小鼠所产生的病理损伤程度不相同,宿主免疫应答过程也存在差别。经呼吸道滴鼻方式感染BCG相比于尾静脉注射感染方式,TREM1-/-小鼠能产生更严重水平的肺部损伤和体重下降,并且伴随着肺脏、脾脏质量增加,及在感染7天肺组织能够分离出BCG。不同的感染途径,免疫组化分析TREM1-/-小鼠脾脏和肺脏组织均能产生高水平的PMN,但是对病原菌在肺部的杀伤能力不同。经尾静脉注射BCG感染后50天,施用免疫抑制剂地塞米松药物处理2周,TREM1-/-小鼠存活时间延长。通过尾静脉注射人源强毒株H37Rv后,TREM1-/-小鼠能够产生差异显著的IL-1β与IL-12。综上说明,宿主通过PMN能够有效的杀伤BCG,但是缺乏TREM1后肺部杀伤能力减弱。TREM1与PMN可能是结核分枝杆菌感染过程中,衔接宿主天然免疫与适应性免疫应答的纽带。而TREM1抑制剂与地塞米松可能为未来临床肺外结核病患者治疗提供新的思路。
  3.H37RvΔphoPΔRv1759cΔLprG基因缺失菌株的构建
  利用噬菌体转染通过同源重组,成功构建了H37RvΔphoPΔRv1759cΔLprG及M.bovisΔphoPΔLprG缺失菌株。通过菌落形态试验肉眼观察,H37RvΔphoP与H37RvΔphoPΔRv175cΔLprG的嵴状蜿蜒程度与亲本菌株相比减弱,特别是H37RvΔphoP。接着进行了细胞与小鼠感染,H37RvΔphoPΔRv175cΔLprG缺失对菌株入侵巨噬细胞的能力显著性降低,且能诱导细胞显著性上调IL-1β。小鼠经尾静脉注射后,相比于亲本菌株:H37RvΔRv1759c与H37RvΔphoPΔRv175c对小鼠的致病力均有所减弱;感染小鼠血清细胞因子检测,缺失菌株H37RvΔRv1759c、H37RvΔphoP、H37RvΔphoPΔRv175都能够引起小鼠产生显著的TNF-α和IL-1β应答反应。本研究有助于进一步了解结核分枝杆菌自身基因改造与宿主免疫应答的互作关系。
[硕士论文] 彭永崇
预防兽医学 华中农业大学 2018(学位年度)
摘要:结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)是导致人类结核病(Tuberculosis,TB)的主要病原菌,是全球十大致死性疾病之一。结核分枝杆菌能够不被机体有效清除,很大程度上得益于结核分枝杆菌能够调节宿主的免疫应答反应。在结核分枝杆菌复合群中,结核分枝杆菌和牛分枝杆菌可以致病,而减毒的BCG却是一种抗结核的疫苗。RD(Region of difference)区是强弱毒株之间的差异区域,研究这些细菌基因组之间的差异,可以为揭示强弱毒株致病性之间的差异提供思路。本研究利用本实验室构建的RD区蛋白表达文库和巨噬细胞模型,对影响宿主免疫反应的蛋白进行筛选,进一步研究了其生物学意义以及调控的细胞信号通路,为揭示结核分枝杆菌的免疫机理和致病机制奠定基础。本实验将原核表达的Rv0309蛋白作用于LPS刺激下的RAW264.7细胞,ELISA检测细胞培养上清中的IL-6含量,与对照组相比,Rv0309能够抑制LPS诱导的IL-6的分泌,并且呈剂量依赖性。本研究成功构建过表达Rv0309蛋白的重组耻垢分枝杆菌和重组BCG菌株,并利用Western blot验证Rv0309蛋白成功在重组菌株中表达。将Rv0309重组菌株和空载菌株以MOI为10∶1感染RAW264.7细胞,收取RNA样品、蛋白样品和细胞上清。利用实时荧光定量RT-PCR和ELISA检测发现,与对照组相比,重组菌株能够抑制巨噬细胞炎性细胞因子表达和产生,统计学差异显著。Western blot检测发现,与对照组相比,重组菌株能够抑制TLR2的表达和MAPKs信号分子ERK、p38的磷酸化。将Rv0309重组菌株和空载菌株以MOI为10∶1来感染RAW264.7细胞,在37℃条件下测定重组菌株的抗吞噬能力和胞内存活能力,结果证明Rv0309能够显著增强重组菌株的抗吞噬能力和胞内存活能力。在4℃条件下测定重组菌株的黏附能力,结果证明Rv0309能够显著增强重组菌株的黏附能力。本研究构建了包含Rv0309上下游同源臂的等位交换质粒,并将该质粒与含有分枝杆菌温敏型噬菌体元件的载体phAE159连接,含有敲除同源臂的重组质粒经噬菌体转导进入待敲除BCG菌株中。利用抗性平板筛选阳性克隆子并进行鉴定,结果表明Rv0309基因BCG敲除株构建成功。
[硕士论文] 伍享
预防兽医学 华中农业大学 2018(学位年度)
摘要:结核病(Tuberculosis)是一种古老的慢性消耗性人兽共患传染病,主要由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)引起。结核病不仅造成巨大的经济损失,还严重危害着人类的健康。结核分枝杆菌在宿主细胞寄生过程中会分泌一些蛋白,然而这些分泌蛋白的作用机制并不清楚,探讨这些分泌蛋白在结核分枝杆菌致病的过程中的作用机制,能够为新的结核疫苗研发提供理论基础。另外,我国结核病的状况十分严峻,传统的检测方法已经不能满足临床需求,此种状况同样存在于我国牛场。本实验针对结核病的诊断方法及疫苗研发的分子机制这两个方面展开研究:
  1.利用CRISPR/Cas9的系统构建稳定表达ESAT6,MPT64和串联亲和层析标签ZZtag-3×Flag的三个Raw264.7细胞系。成功扩增如下片段:Neomycin、ZZtag、TEV剪切酶识别位点,3×Flag,mCherry以及重组同源臂Arm1和Arm2,经过多次重叠PCR成功融合这7个片段后获得串联亲和层析用重组载体命名为pMD18T-TAP。本实验成功构建用于串联亲和层析的6个重组质粒pMD18T-TAP、pMD18T-TAP-ESAT6、pMD18T-TAP-CFP10、pMD18T-TAP-HspX、pMD18T-TAP-MPT64和pMD18T-TAP-Ag85B,利用CRISPR/Cas9系统分别构建稳定表达结核分枝杆菌分泌蛋白(ESAT6、MPT64)以及串联亲和层析标签组合ZZtag-3×Flag的Raw264.7细胞系,然后利用串联亲和层析联用质谱的方法成功筛选出与ESAT6互作的宿主蛋白为Serine/arginine repetitive matrix protein1,后续将验证ESAT6与Serine/arginine repetitive matrix protein1的互作。
  2.本实验初步建立能在实验室检测结核分枝杆菌H37Ra的三种方法:TB-LAMP、MDA-PCR以及HCR。实验选取IS6110基因为靶基因,发现TB-LAMP、MDA-PCR能在几十个结核分枝杆菌H37Ra存在时扩增出阳性,且比直接菌液PCR扩增的灵敏度高一个数量级。本实验首次尝试改进传统HCR的方法将其用于结核分枝杆菌H37Ra的检测,得到阳性结果,且靶定三个基因(IS6110,CFP10,GryB)时,提高了HCR方法检测的检出率。本实验研究建立了TB-LAMP、MDA-PCR以及HCR这三个方法,能够用于结核分枝杆菌H37Ra的基因IS6110的检测,并且首次将MDA-PCR和HCR的方法用于结核分枝杆菌H37Ra的检测。
[博士论文] 任宁宁
预防兽医学 华中农业大学 2018(学位年度)
摘要:结核病(tuberculosis,TB)是一种慢性消耗性的人兽共患传染病,由结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis Complex,MTBC)所引起。据世界卫生组织(WHO)估计,2016年的全球结核病的发病例约为1040万,死亡约130万例。结核病已经成为了单一病原菌致死疾病的首位。近来,WHO制定了“消灭结核病策略”,最终目标在2035年消灭结核病。众所周知,早期的诊断和适当治疗可以预防大多数人死于结核病。因此,亟待需要开发一种高效的结核病诊断方法。
  基于血清学诊断技术而建立起来的间接ELISA检测、操作简单迅速,且以WHO倡导的无痰样本为检测对象,是结核病诊断技术的研发热点。然而,目前并没有较为理想的商品化ELISA诊断试剂盒,特别是针对肺外结核(EPTB)及早期痰涂片阴性肺结核(PTB-SN)的诊断。因此,开发新的诊断方法潜在策略之一就是筛选新的抗原候选物。本实验从牛分枝杆菌(M.bovis)、卡介苗相对结核分枝杆菌(M.tb)基因组的差异区域入手,对差异区(RD)的129个开放阅读框(ORFs)分别进行克隆和原核表达与纯化,利用临床肺结核(PTB)及肺外结核(EPTB)样本对RD蛋白进行筛选,以期筛选出针对不同类型结核病的新型诊断标识;同时,构建BCG突变体库,从突变库中筛选生物膜成膜能力加强的突变体。主要研究内容和结果如下:
  (1)RD区基因的克隆、表达与纯化
  对RD区的129个基因分别进行克隆,选择pET-32a作为融合载体,经过酶切、连接和测序鉴定,成功构建了78个重组质粒,涉及到除RD12区域外的其他15个RD区的基因。经过IPTG诱导,获得68个表达的蛋白。根据功能注释,数量较多的前5类蛋白为:假想蛋白、噬菌体蛋白、膜/跨膜蛋白、分泌型蛋白、转录调控蛋白。最后对蛋白进行纯化,其中有7个蛋白是可溶性表达,它们分别为Rv0222、Rv0311、Rv1766、Rv1767、Rv1976c、Rv2660c和Rv3120;其他均为非可溶性表达。
  (2)RD蛋白的初步筛选
  临床PTB、EPTB标准阳性血清的确定:从武汉市医疗救治中心收集有明显临床症状并确诊的肺结核及肺外结核病人血清,经过实验室建立的人IFN-γ体外释放法(IGRA)及TB-DOT商品化试剂盒对临床结核病人血清做进一步检测,选择6份双阳性血清,每3份进行等量混合作为标准阳性血清。标准阴性血清的确定:来自本校的志愿者样本,经过PPD皮试、IGRA法及TB-DOT商品化试剂盒检测,选择6份3种方法检测均阴性的血清,每3份进行等量混合作为标准阴性血清。以OD630阳性血清/OD630阴性血清(P/N)≥2作为初筛标准,用iELISA方法对68个蛋白分别进行筛选,得到29个蛋白与标准阳性血清有特异性识别反应。其中肺结核组阳性血清筛选到19个抗原,包括Rv3872、Rv3874、Rv3875及Rv1981c等,所在区域分布在RD1-RD4、RD6、RD8、RD10-RD11、RD13、RD15-RD16;肺外结核阳性血清筛选到14个抗原,如Rv3872、Rv1577c、Rv1508c及Rv1514c等,所在区域分布在RD1-RD4、RD6、RD8、RD10、RD13-RD14、RD16。而Rv3872(RD1)、Rv0222(RD4)、Rv0309(RD8)和Rv3403c(RD16)四种抗原被以上2种结核病阳性血清共同筛选到。
  (3)潜在标识抗原的复筛
  经过受试者工作曲线(ROC)分析,在PTB组,Rv0222与Rv3403c显示出最高的曲线下面积(AUC)值,分别为0.8247(95%CI,0.7496-0.8997)和0.8223(95%CI,0.7431-0.9015),对应ESAT6/CFP10的AUC值为0.7468(95%CI,0.6576-0.8360)。即Rv0222和Rv3403c在肺结核涂片阳性组(PTB-SP)中表现出最高的诊断能力(83.3%/80%,79.1%/80%),而Rv3403c在PTB-SN中表现出最高的诊断能力(敏感性:70%,特异性:80%)。在EPTB组,Rv0222展示出最高的诊断价值(AUC:0.7706,敏感性:70%,特异性:82.5%),对应ESAT6/CFP10的AUC值为0.7394(95%CI,0.6092-0.8695),敏感性为60%,特异性为70%。且联合Rv0222与Rv3403c蛋白能提高PTB-SN患者的检出率,对应的敏感性特异性分别为86.6%和72.5%。
  (4)Rv0222与Rv3403c蛋白的免疫学评估
  Rv0222与Rv3403c蛋白免疫小鼠后,小鼠血清中抗Rv0222的抗体总IgG效价为211×100,同时也测得IgG1与IgG2a亚型的效价为212×100与210×100;检测抗Rv3403c总抗体IgG效价为212×100,IgG1与IgG2a亚型的效价同样为212×100与210×100。PBS免疫组并未检测到抗体滴度。分离的脾淋巴细胞经Rv0222和Rv3403c刺激后,蛋白免疫组与PBS免疫组的刺激指数有差异(p<0.05)。且蛋白免疫组的细胞上清中IFN-γ,与TNF-α的浓度高于PBS免疫组,差异极显著(p<0.01和p<0.001)。
  (5)卡介苗生物膜相关突变体库的构建
  用MycoMarT7转座子系统获得了3170株卡介苗突变体文库,随机挑取1000株突变体进行PCR鉴定,有960株扩增出目的条带,预估转导效率高达96%。进而对鉴定成功的突变体转接到Sauton液体培养基进行成膜能力的初步筛选,其中148株突变体成膜能力较BCG增强。
  综上所述,来自RD4区的Rv0222和RD16区的Rv3403c均具有潜在的结核病抗体诊断能力,特别在难以诊断的肺外结核、早期的涂阴肺结核的检测灵敏度高于其他候选抗原。且这2个抗原免疫小鼠后,均能诱导高滴度的总IgG、IgG1与IgG2a抗体产生和高浓度IFN-γ和TNF-α的分泌,表明这两个蛋白在小鼠体内能诱导Th1/Th2混合型免疫应答。其中,未知功能蛋白Rv3403c的相关结果为首次报道。此外,构建了卡介苗生物膜相关的突变体文库,为后期研究分枝杆菌生物膜与疫苗的相关性提供了基础。
[硕士论文] 季翔
遗传学 扬州大学 2018(学位年度)
摘要:结核病(Tuberculosis,TB)是全球最严重的人兽共患病之一,严重危害人类身体健康,给全球公共卫生安全带来严重的挑战。自1882年德国科学家Koch揭示了结核分枝杆菌分离株(Mycobacterium tuberculosis)是结核病的病原菌,开启了对结核病深入研究。结核分枝杆菌分离株是一种体积微小,为杆状的革兰阳性菌,无鞭毛、无芽孢。通过抗酸染色法(acid-fast stain)可以检测出病样中是否存在结核分枝杆菌分离株。在临床上,结核分枝杆菌分离株主要感染人的肺部,患者往往表现出剧烈的咳嗽,并伴有痰或者血丝、身体无力、胸口疼痛、低烧、盗汗等症状。根据世界卫生组织报道,2016年全球新发结核病人约1040万,TB/HIV双重感染约为103万,MDR-TB感染患者60万,并列出了2016年全球有14个国家同时面临着TB、TB/HIV和MDR-TB的挑战,其中包括中国。因此,对结核分枝杆菌分离株临床诊断、药物治疗和结核病防控,成为我国重大传染病防控工作中的重中之重。本研究以扬州市结核病作为研究对象,对结核分枝杆菌分离株进行流行病学调查和药敏试验;采用MLVA分子分型方法研究扬州市结核分枝杆菌分离株的基因型特点,分析基因型与耐药、性别、年龄和时间上是否有潜在的相关性;基于全基因组序列对结核分枝杆菌分离株进行谱系分析、耐药性预测并对其预测的结果准确性进行评估。
  1扬州市结核分枝杆菌分离株流行病学研究
  从人口分布上看,扬州市结核病患者中男性多于女性,流动人口超过本地人口的1.5倍。在年龄分布上,在35岁以下和60岁以上,女性患者比其他年龄阶段人数要多,呈现出“双峰”现象。在职业分布方面,结核病患者主要集中在农民、离退休人员、家政服务人员这三个职业,以农民居多。从时间分布上看,扬州市结核病主要流行于春夏两个季节。
  对扬州市收集的327例临床菌株,采用PNB/TCH检测法和多位点PCR两种方法鉴定出311株为结核分枝杆菌分离株,16株为非结核分枝杆菌分离株,其中包括1株M.canettii和1株M.africanum subtypeⅠ。对176株结核分枝杆菌分离株进行药敏试验,有76株菌株表现耐药,总体耐药率为43.18%,比全国第五次结核病流行病学抽样调查高出1.08个百分点,说明扬州市分离株总体耐药水平较高,复发患者比新患者更容易出现耐药情况。从细菌学方面看,涂阴培阳菌株具有很高的耐药性风险,要重视对涂阴培阳患者药物敏感性试验,及时准确诊断,防止产生耐药性。
  2扬州市结核分枝杆菌分离株的MLVA研究
  采用24个MIRU-VNTR基因位点对收集的扬州市325株结核分枝杆菌分离株进行分子分型研究,发现有11株结核分枝杆菌分离株为混合感染菌株。对314株单一型的结核分枝杆菌分离株进行VNTR基因位点重复次数分析,发现不同菌株对不同VNTR基因位点都存在偏好性。通过计算,成簇率为11.46%,并对成簇菌株可能存在传染性风险因素进行分析,使得走访调查具有导向性。
  同时对24个MIRU-VNTR基因位点多态性进行了分析,计算出高分辨力位点有Mtub21和QUB11b;中分辨力位点有Mtub04、MIRU40、MIRU10、MIRU16、MIRU26、MIRU31;ETRE、QUB26、QUB4156、MIRU39和ETRA,这12个位点更适合作为扬州市的结核分枝杆菌分离株分子分型研究。与相关国际数据库比较发现扬州市结核分枝杆菌分离株基因型具有明显的聚集性,具有一定的保守性。
  3扬州市结核分枝杆菌分离株的全基因组测序初步分析
  从扬州市临床分离株中选取94株结核分枝杆菌分离株进行全基因组测序,获取全基因组序列,并对每株结核分枝杆菌分离株的全基因组进行耐药性预测。通过与药敏试验结果比较,一致率都超过了70%,其中对INH、RFP、EMB、SM四种一线抗结核药物一致率分别为:82.56%、95.24%、86.90%和86.90%,对CPM、AK、PAS、LVFX四种二线抗结核药物一致率分别为:92.86%、91.67%、94.40%、73.81%。这也表明了基于全基因组序列对临床分离株的耐药性预测准可靠性较高,但是对LVFX的耐药性预测可靠性不高。
  利用核心SNVs数据库对扬州市94株结核分枝杆菌全基因序列进行谱系分析,84株菌株为Lineage2、10株菌株为Lineage4,其中以Lineage2为扬州市主要的谱系,而这些Lineage2的菌株又都为北京家族。基于全基因组序列对94株结核分枝杆菌分离株进行聚类分析,其结果与谱系分析结果一致。
[硕士论文] 王明春
方剂学 黑龙江中医药大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  运用中医方剂配伍理论结合现代信息处理技术,对龚居中《红炉点雪》所载方药信息进行综合统计、挖掘、归纳、分析,进而探讨龚居中的治痨思想和组方配伍特点,以期更好发挥名家学术思想,为当今肺结核的防治提供借鉴和指导。
  方法:
  1.文献法:通过查阅历史文献及期刊的方法,探讨历代医家对于痨瘵认识及治疗过程。
  2.统计学方法:运用Excel、SPSS22.0软件,对药物的频数、性、味、归经进行统计,并建立量化数据库。
  3.数据挖掘技术:运用关联规则Apriori算法,挖掘出常用药对,软件采用IBM SPSS Modelerl8.1进行;针对高频药物,运用系统聚类分析法,挖掘具有相似数据特征的药团,软件采用SPSS22.0进行。
  结果:
  1.根据纳入排除标准,从《红炉点雪》中共选出53首治痨方,110味常用药物分为补虚药、清热药、化痰止咳平喘药、收涩药等16大类,使用547次。补虚药使用次数最多,为241次,占药物使用总次数的44%;其次是清热药,使用次数为94次,占总比例的17%。化痰止咳平喘药位列第三,为54次,约占总比例的10%。
  药物频次统计结果表明,频次由高至低依次为:甘草34次、人参26次,其次为麦冬25次、茯苓24次、黄芪23次、当归22次、白芍17次、天冬16次,均为补虚药。其次为清热药,如:知母21次、生地黄16次、黄柏11次。化痰止咳平喘药,如:桔梗13次,川贝母9次。
  2.药物四性结果表明,寒性占总比例的40%,平性药占比为30%,温性药占比为:28%;五味结果表明,甘味药物最多,出现392次,约占总比例的42%,苦味药物出现273次,约占总比例的29%,辛味药物出现113次,约占总比例的12%;归经分析结果表明,药物多入肺、心、肾、肝、脾、胃经。
  3.关联分析结果:常用药对有人参配伍黄芪、人参配伍麦冬、麦冬伍甘草、麦冬配伍知母、白芍配伍甘草、当归配伍白芍、黄芪配伍当归、麦冬配伍天冬、当归配伍熟地、麦冬配伍五味。
  4.聚类分析结果:31味高频药被聚为7类。第一类:知母、天冬、玄参、北沙参、麦冬、生地黄、牡丹皮、黄柏,功效为滋阴降火;第二类:地骨皮、鳖甲、柴胡、秦艽、紫菀,功效为退热除蒸;第三类:川贝母、阿胶、桔梗,功效为清金化痰、止血;第四类:乌梅,功效为敛肺生津;第五类:黄芩,功效为清热泻火、止血;第六类:茯神、酸枣仁、熟地黄、五味子、山药,功效为宁心安神、益精填髓;第七类:当归、白芍、白术、陈皮、人参、黄芪、茯苓、甘草,功效为益气补血。
  结论:
  1.龚居中认为痨瘵病机为“水亏火炽金伤”,提出“益水清金降火”的治则。针对不同的证候特点,综合采用滋阴降火、退热除蒸、清金化痰、补益肺肾、健脾宁心等治法。用药多以甘寒、甘平为主,少用苦寒败胃之品。
  2.龚氏治痨重视肺肾,兼护脾胃,认为肺为生化之源,肾为生生之本。重视未病先防,强调防治结合。
  3.龚氏组方原则是:以脉验证,因证立法,由法定方。常用配伍法为:方证对应配伍、气味配伍。
  4.龚氏治痨善用参芪,综合运用以脉验证、甘温除热、阴阳互根的原理,依证而施。
[硕士论文] 骆佳
生物化学与分子生物学 宁夏大学 2018(学位年度)
摘要:结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)是引起人和动物结核病的病原,巨噬细胞是其主要宿主细胞;有研究报道巨噬细胞可通过自噬作用清除胞内的Mtb,而Mtb却有相应的机制逃避巨噬细胞的自噬清除作用。MAPK信号转导通路等多条途径参与自噬调节,双特异性磷酸酶(dual specificity protein phosphatases,DUSPs)蛋白家族是MAPKs蛋白的内生性抑制因子,在调控MAPK信号转导中有着重要的作用。DUSP5是DUSPs蛋白家族成员之一,它在多种细胞的自噬调控作用已有报道,但它是否也参与调节Mtb感染所诱导的自噬却未有相关研究报道。
  为探究DUSP5在BCG感染诱导巨噬细胞自噬中的调控作用及其作用机制,本研究用慢病毒转染的方法建立DUSP5过表达/干扰RAW264.7稳定转染细胞株;并用雷帕霉素(Rapamycin,Rapa)和巴弗洛霉素A1(Bafilomycin A1,BafA1)分别刺激稳定转染细胞株初步探究DUSP5对巨噬细胞自噬的调控;进而采用BCG和ERK1/2抑制剂PD98059刺激DUSP5过表达/干扰RAW264.7稳定转染细胞株以探究DUSP5在BCG诱导巨噬细胞自噬的调控作用及其机制。实验结果如下:
  1.用慢病毒转染的方法成功获得了DUSP5过表达及干扰的RAW264.7稳定转染细胞株,为后续探究DUSP5在巨噬细胞自噬中的调控作提供了良好的实验材料。
  2.雷帕霉素刺激后,DUSP5过表达的RAW264.7稳定转染细胞株中自噬相关蛋白LC3Ⅱ表达量显著下调,而DUSP5干扰的RAW264.7稳定转染细胞株中自噬相关蛋白LC3Ⅱ表达量显著上调,说明DUSP5抑制LC3Ⅱ蛋白表达。
  3.用巴弗洛霉素A1刺激DUSP5干扰的RAW264.7稳定转染细胞株,LC3Ⅱ表达量升高且自噬体数量增多。说明DUSP5可能通过抑制自噬体形成参与调控巨噬细胞RAW264.7自噬。
  4.BCG刺激后,DUSP5过表达RAW264.7稳定转染细胞株中自噬相关蛋白Beclin1、Atg5、Atg7和LC3Ⅱ表达量显著降低且胞内自噬体数量减少;DUSP5干扰RAW264.7稳定转染细胞株中自噬相关蛋白Beclin1、Atg5、Atg7和LC3Ⅱ表达量升高显著,自噬体数量增多。说明DUSP5抑制BCG感染巨噬细胞RAW264.7自噬相关蛋白的表达,其可能在BCG感染诱导巨噬细胞RAW264.7自噬中发挥负调控作用。
  5.BCG刺激后p-ERK表达量上调,然而过表达DUSP5,巨噬细胞RAW264.7中p-ERK1/2表达量显著下调,抑制DUSP5表达,巨噬细胞RAW264.7中p-ERK1/2表达量上调,而total-ERK1/2的表达量均无明显变化,说明BCG可诱导巨噬细胞ERK1/2信号途径活化,而DUSP5却抑制了ERK1/2磷酸化。
  6.用PD98059抑制BCG刺激细胞中ERK1/2信号传导,DUSP5过表达和干扰RAW264.7稳定转染细胞株中自噬相关蛋白Beclin1的表达量均下调显著,而LC3Ⅱ没有显著变化,说明自噬相关蛋白Beclin1的表达受到ERK1/2途径的调控。
  综上所述,在结核分枝杆菌诱导巨噬细胞自噬的过程中,DUSP5参与此过程的调节。DUSP5通过抑制ERK1/2磷酸化调控ERK1/2信号转导通路活化所引起的蛋白表达,其中在自噬相关蛋白的表达调控中,此过程主要介导自噬相关蛋白Beclin1的表达。Beclin1是自噬的起始蛋白,它参与了自噬体膜的形成。由此推测,DUSP5参与调控BCG诱导巨噬细胞RAW264.7自噬可能是通过抑制ERK1/2信号传导通路,抑制Beclin1表达,致使自噬体膜形成受阻,进而在自噬中发挥负调控作用。
[硕士论文] 王瑞
预防兽医学 华中农业大学 2018(学位年度)
摘要:结核病(tuberculosis,TB)是人或动物主要感染结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)而引起的传染病。有研究表明,双组份信号转导系统中的孤儿反应调节因子Rv3143与结核分枝杆菌的耐药性有关,但是Rv3143基因与药物的相互作用机制尚不清楚。本研究中,我们通过在耻垢分枝杆菌上构建Rv3143的重组菌株,并对重组菌株在药物刺激下引起的差异反应进行了研究,确定了Rv3143能够调节结核分枝杆菌的药物敏感性。
  1.Rv3143增加了分枝杆菌对药物的敏感性
  本研究通过测定H37Ra、H37Ra-△Rv3143和H37Ra-Rv3143菌株的细胞活性及mc2155、mc2155-pMV261和mc2155-Rv3143菌株的MIC值,发现药物对互补菌株H37Ra-Rv3143的抑制率高于野生菌株和缺失菌株,mc2155-Rv3143的MIC值均低于mc2155和mc2155-pMV261的MIC值。通过测定mc2155-pMV261和mc2155-Rv3143菌株的OD600以及CFU与时间的对应关系曲线,发现mc2155-pMV261和mc2155-Rv3143在正常培养情况下生长特性没有显著的差异,但当RIF刺激培养时,mc2155-Rv3143菌株比mc2155-pMV261菌株生长更加缓慢。上述结果共同显示,Rv3143增加了结核分枝杆菌对药物的敏感性。
  2.Rv3143增强了耻垢分枝杆菌细胞内的存活能力和药物敏感性
  在细胞内的药敏实验中,通过测定细胞内mc2155-pMV261和mc2155-Rv3143的CFU,检测细菌的胞内存活情况。结果发现在感染细胞后48h和72h时mc2155-Rv3143菌株表现出更强的细胞内存活能力;但当利福平(RIF)存在时,mc2155-Rv3143菌株在巨噬细胞内的生长受到了明显的抑制。说明Rv3143能够增强了耻垢分枝杆菌细胞内的存活能力,但在RIF处理时胞内存活能力显著性下降。
  3.耻垢分枝杆菌的Rv3143过表达菌株在RIF刺激下引起的差异基因的分析和筛选
  利用转录组测序技术对mc2155-pMV261和mc2155-Rv3143在药物刺激下引起的差异基因的确定,共筛选出2356个差异基因。并将这些基因根据基因功能分为与细胞壁合成、信号通路、脂代谢和呼吸代谢等相关的10类。并从差异基因中筛选出基因功能中差异表达高的基因,即MSMEG_4740、MSMEG_3615、MSMEG_2130等15个Rv3143潜在调控的基因。
  4.Rv3143蛋白结合MSMEG_4740基因
  通过纯化表达的Rv3143蛋白,利用表面等离子共振技术对转录组测序结果中潜在的调控的基因进行筛选,并用EMSA实验对筛选结果进行进一步的验证,最终成功的筛选到了MSMEG_4740基因为Rv3143蛋白特定结合并调控的基因。
  5.Rv3143增加了耻垢分枝杆菌细胞壁的通透性
  通过测定mc2155-pMV261和mc2155-Rv3143菌株对EB的积累后的荧光强度,探索细菌细胞壁通透性的改变。发现mc2155-Rv3143比mc2155-pMV261的荧光强度更强,说明Rv3143能够增加菌株细胞壁的通透性。
[博士论文] 王洁茹
预防兽医学 华中农业大学 2018(学位年度)
摘要:结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性消耗性人畜共患病。我国属于全球结核病疫情高发区。随着环境污染,多耐药菌株的出现和艾滋病传播的不断加剧,结核病的发病率也越来越高,严重威胁着人类健康。结核病防治面临的瓶颈问题是缺乏特异性的早期诊断标识,因此迫切需要寻找灵敏度高、特异性好的分子靶标以及发展低成本,无创取样的检测程序。目前蛋白质组学和转录组学已广泛应用于血液、尿液等各种体液研究中,成为各种疾病研究的组学工具。本研究以肺结核病人的尿液及血液诊断标志物为出发点,从尿液中筛选到能作为肺结核病诊断的生物标志物甘露糖结合凝集素2(MBL2),35kDa间α胰蛋白酶抑制剂H4(ITIH4-35k),视黄醇结合蛋白4(RBP4)和miR-625-3p,并建立了尿液蛋白质-microRNA联合诊断模型;从血液中筛选到具有潜在诊断意义的分子标志物miRNA-362-5p,并对其调控结核分枝杆菌介导巨噬细胞炎症反应的具体机制进行了深入研究;同时对结核分枝杆菌RD区炎性蛋白YrbE3A(Rv1964)进行了深入研究,从体内和体外水平证实了YrbE3A激活机体固有免疫的致病机制,为揭示结核分枝杆菌持续致病及RD区蛋白作为结核病特异性诊断抗原提供理论依据。主要研究内容如下:
  (1)肺结核病新型诊断标志物的筛选及鉴定
  应用双向电泳和基质辅助激光解吸/电离时间的飞行质谱对45例初治肺结核患者和45例卡介苗免疫健康对照者尿液样本进行了检测,初步筛选出19个差异表达尿蛋白。随后基于Western-Blotting和SYBR green qRT-PCR方法对122例初治肺结核患者和73例卡介苗免疫健康对照者尿液样本进行了翻译和转录水平的验证。最终结果显示:MBL2,ITIH4-35k,RBP4具有较高的灵敏度和特异性。进一步对其进行尿蛋白-靶标microRNA互作网络分析,筛选出11个靶标mcroiRNAs,并利用SYBR green qRT-PCR在痰涂片52例阴性结核患者,46例阳性结核患者和48例健康对照组尿液中进行了验证,确定RBP4和ITIH4-35k的共同靶microRNA:miR-625-3p具有肺结核病诊断的潜在价值。因此,MBL2,ITIH4-35k,RBP4和miR-625-3p均可作为肺结核病诊断标识独立检测。进一步基于多元逻辑回归构建肺结核尿液临床诊断蛋白和microRNA联合诊断模型:Y=0.329miR625-3p+0.639MBL2+0.746ITIH4-4.502。联合检测诊断肺结核的诊断效能优于各指标单项检测,敏感性达到85.87%(95%CI77.05%-92.26%),特异性为87.50%(95%CI74.75%-95.27%)。新型尿液蛋白和microRNA诊断标识为结核病的诊断提供新的思路与进步。
  (2)miR-362-5p对结核分枝杆菌逃避宿主免疫反应调控作用的研究
  筛选到具有诊断意义的血液学分子标识miRNA-362-5p。在结核分枝杆菌感染的人巨噬细胞(THP-1细胞)和小鼠巨噬细胞(RAW246.7细胞)中miRNA-362-5p的表达显著下调,并具有时间依赖性。对75例临床肺结核病患者,39例鉴别诊断组(肺部疾病病人)和40例健康对照组的外周血淋巴细胞(PBMC)样品中的miR-362-5p的表达水平进行检测,发现miR-362-5p在肺结核组中的表达水平低于肺部疾病组和健康对照组(p<0.001)。表明结核分枝杆菌侵染机体,miRNA-362-5p的表达水平在体内和体外均特异性下调。进一步确定了miRNA-362-5p能够通过激活p38MAPK和NF-κB信号通路正向调控结核分枝杆菌诱导的炎性细胞因子的表达,从而使结核分枝杆菌逃避宿主免疫,增加胞内存活量。同时巨噬细胞通过抑制其吞噬结核分枝杆菌的能力保护自身。
  (3)结核分枝杆菌蛋白YrbE3A正向调控宿主固有免疫的机制研究
  为了进一步阐明结核分枝杆菌蛋白YrbE3A与巨噬细胞之间的相互作用机制,构建表达YrbE3A的耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,MS)MS_YrbE3A和卡介苗巴斯德株BCG_YrbE3A,并感染小鼠巨噬细胞(RAW246.7细胞),发现YrbE3A蛋白通过NF-κB和Jnk MAPK信号通路正向调控炎性细胞因子TNF-α和IL-6的表达,激活机体固有免疫杀伤和清除病原菌。随后利用MS_YrbE3A感染C57BL/6小鼠,通过肺组织CFU计数、病理学切片、免疫组化和多因子免疫捡测等方法,同样证实了YrbE3A蛋白能够引发高水平炎性细胞因子激活免疫反应从而促进宿主清除耻垢分枝杆菌。
  综上,本研究筛选到具有潜在诊断意义的分子标识MBL2,ITIH4-35k,RBP4和miR-625-3p,并建立了尿液蛋白质-microRNA联合诊断模型;确定了肺结核血液诊断标识分子miRNA-362-5p正向调控结核分枝杆菌诱导炎症反应及YrbE3A通过NF-κB/JNK信号通路激活宿主固有免疫,对肺结核的诊断和治疗提供理论依据。
[硕士论文] 陈雨燕
内科学(呼吸系病) 福建医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:了解转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制剂基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)在初治肺结核伴有支气管结核者和初治肺结核不伴有支气管结核者中抗结核治疗前后的表达水平及相互关系,分析其与支气管结核分型、治疗后出现纤维性支气管狭窄的关系,并进一步探讨这三种细胞因子在支气管结核管腔狭窄形成过程中的可能的作用机制。
  方法:选取初治肺结核不伴有支气管结核者30例为观察A组,初治肺结核伴有支气管结核者30例为观察B组,健康体检者30例为对照组。用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测健康对照组与观察A组、观察B组抗结核治疗前、观察B组抗结核治疗6个月后血清TGF-β1、MMP-9及TIMP-1水平,用ELISA方法检测观察A组、观察B组抗结核治疗前与观察B组抗结核治疗6个月后支气管灌洗液TGF-β1、MMP-9及TIMP-1水平,分析初治肺结核伴或不伴支气管结核患者TGF-β1、MMP-9及TIMP-1的水平差异及其与支气管结核治疗后出现纤维性狭窄的关系,进而探讨支气管结核患者局部细胞免疫功能状态与支气管结核病情演变的关系。
  结果:1.肺结核不伴支气管结核组血清TGF-β1水平高于健康对照组,差异有统计学意义(p<0.05);肺结核伴支气管结核组血清TGF-β1与对照组差异无统计学意义(p>0.05);肺结核不伴支气管结核组血清TGF-β1水平高于肺结核伴支气管结核组,差异有统计学意义(p<0.05)。亚组分析显示治疗后出现支气管纤维狭窄者较无狭窄者初始血清TGF-β1水平更低,治疗6个月后复查的血清TGF-β1水平较初始血清显著降低,差异有统计学意义(p<0.01)。
  2.肺结核伴支气管结核组支气管灌洗液中TGF-β1水平比肺结核不伴支气管结核组增高,且治疗6个月后复查的支气管灌洗液中TGF-β1水平比治疗前增高,亚组分析显示治疗后出现支气管纤维狭窄者治疗前、后支气管灌洗液中TGF-β1水平均比无狭窄者显著升高,差异有统计学意义(p<0.01),且支气管纤维狭窄组治疗后支气管灌洗液中TGF-β1水平也比自身治疗前显著升高,差异有统计学意义(p<0.05)。
  3.血清MMP-9、TIMP-1、MMP-9/TIMP-1水平:肺结核不伴支气管结核组、肺结核伴支气管结核组治疗前血清MMP-9、TIMP-1水平均高于对照组,差异有统计学意义(p<0.05),MMP-9/TIMP-1水平三组差异无统计学意义(p>0.05)。肺结核伴支气管结核组治疗前、后血清MMP-9水平差异无统计学意义(p>0.05);肺结核伴支气管结核组治疗后TIMP-1水平较治疗前升高,差异有统计学意义(p<0.05);肺结核伴支气管结核组治疗后MMP-9/TIMP-1水平较治疗前降低,差异有统计学意义(p<0.05)。
  4.支气管灌洗液MMP-9、TIMP-1、MMP-9/TIMP-1水平:肺结核伴支气管结核组治疗前、后支气管灌洗液MMP-9水平均比肺结核不伴支气管结核组显著升高,差异有统计学意义(p<0.01),肺结核伴支气管结核组治疗前、后支气管灌洗液MMP-9水平差异无统计学意义(p>0.05)。肺结核伴支气管结核组治疗前、后支气管灌洗液TIMP-1水平均比肺结核不伴支气管结核组升高,差异有统计学意义(p<0.05),肺结核伴支气管结核组治疗前、后支气管灌洗液TIMP-1水平差异有统计学意义(p<0.05)。肺结核伴支气管结核组治疗前支气管灌洗液MMP-9/TIMP-1水平低于肺结核不伴支气管结核组,差异有统计学意义(p<0.05),肺结核伴支气管结核组治疗后支气管灌洗液MMP-9/TIMP-1水平比肺结核不伴支气管结核组显著降低,差异有统计学意义(p<0.01),肺结核伴支气管结核组治疗前、后支气管灌洗液MMP-9/TIMP-1水平差异有统计学意义(p<0.05)。
  结论:1.肺结核伴支气管结核组与肺结核不伴支气管结核组比较支气管灌洗液MMP-9、TIMP-1高表达,提示MMP-9、TIMP-1可能与支气管结核气道组织损伤、纤维化狭窄有关。且肺结核伴支气管结核组治疗前支气管灌洗液MMP-9、TIMP-1高表达,治疗后TIMP-1高表达,MMP-9/TIMP-1比值升高,提示两者在支气管结核不同阶段起作用,MMP-9/TIMP-1比例失衡可能与支气管纤维性狭窄有关。
  2.肺结核伴支气管结核组治疗前支气管灌洗液TGF-β1较对照组升高,血清则差异无统计学意义。出现支气管纤维狭窄组较无支气管纤维狭窄组治疗前、后支气管灌洗液TGF-β1水平均升高,提示TGF-β1主要在局部免疫中起作用。
  3.支气管灌洗液中TGF-β1、MMP-9、TIMP-1、MMP-9/TIMP-1的水平变化与支气管结核疾病临床转归更符合,提示支气管灌洗液比血清能更好的反映气道损伤和修复。联合检测支气管灌洗液TGF-β1、MMP-9、TIMP-1的水平,对预测支气管结核治疗后出现支气管纤维性狭窄的预后有价值。
[硕士论文] 蔡阳
内科学 西南医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  1、了解活动性肺结核患者外周血维生素D和LL-37的基线水平。2、对比不同类型活动性肺结核患者体内维生素D、LL-37水平的差异。3、初步探讨外周血维生素D、LL-37水平与活动性肺结核患者的T淋巴细胞、CRP的相关性。4、探讨外周血维生素D及LL-37水平对活动性肺结核的临床意义。
  方法:
  1、研究对象的纳入:肺结核组(A组)选自成都市公共卫生临床医疗中心于2017年1月至2017年6月的住院患者,其痰结核分枝杆菌培养均为阳性,健康对照组(B组)为同期健康体检人员,两组人群均长期居住四川地区。肺结核组分为六个亚组,包括无合并糖尿病的肺结核组(A1组)与合并糖尿病的肺结核组(A2组),无合并肺部感染的肺结核组(A3组)与合并肺部感染的肺结核组(A4组),耐药肺结核组(A5组)与非耐药肺结核组(A6组)。肺结核组:痰结核分枝杆菌培养阳性的活动性肺结核59例,健康对照组:本院同期健康体检人员40例。肺结核组亚组:无合并糖尿病的肺结核组(A1组)34例,肺结核合并糖尿病(A2组)25例;无合并肺部感染的肺结核组(A3组)15例、肺结核合并肺部感染(A4组)44例;耐药肺结核组(A5组)17例,与非耐药肺结核组(A6组)42例。
  2、采集研究对象的血清和血浆标本,血清25(OH)D3水平通过酶联免疫法测定;血浆抗菌肽LL-37水平采用固相酶联免疫吸附法测定;收集血常规、CRP(C-reactive Protein)、T淋巴细胞检测、痰结核分枝杆菌培养及药敏试验和胸部CT等检查。
  3、所有统计学分析均采用SPSS17.0软件进行,以均值±标准差((x)±s)来表示统计数据中的基线资料,独立样本T检验用于分析计量资料之间的统计学差异,单因素方差分析用于组间比较,两两比较采用LSD检验,Pearson相关分析进行相关性分析,P<0.05被认为有统计学差异。
  结果:
  1、研究对象的血清25羟维生素D3水平
  1)A组的血清25羟维生素D3水平为26.97±10.83nmol/L,明显低于B组的血清25羟维生素D3水平53.77±11.79nmol/L,两组之间存在统计学差异(P值<0.001)。
  2)A1组的血清25羟维生素D3水平为25.01±10.79nmol/L,稍低于A2组的血清25羟维生素D3水平29.64±10.52nmol/L,但两组之间没有统计学差异(P值=0.105)。
  3)A3组的血清25羟维生素D3水平为33.77±7.72nmol/L,明显高于A4组的血清25羟维生素D3水平24.66±10.95nmol/L,且两组之间有统计学差异(P值=0.006)。
  4)A5组的血清25羟维生素D3水平为26.08±8.79nmol/L,稍低于A6组的血清25羟维生素D3水平27.37±11.62nmol/L,但两组之间没有统计学差异(P值=0.683)。
  2、研究对象的血浆LL-37水平
  1)A组的血浆LL-37水平为31.28±10.31ng/mL,明显高于B组的血浆LL-37水平23.41±3.18ng/mL,且两组之间存在统计学差异(P值<0.001)。
  2)A1组的血浆LL-37水平为31.89±10.62ng/mL,稍高于A2组的血浆LL-37水平30.46±10.03ng/mL,但两组没有统计学差异(P值=0.602)。
  3)A3组的血浆LL-37水平为27.57±11.41ng/mL,低于A4组的血浆LL-37水平32.55±9.73ng/mL,但两组之间无统计学差异(P值=0.107)。
  4)A5组的血浆LL-37水平为28.34±9.94ng/mL,低于A6组的血浆LL-37水平32.48±10.34ng/mL,但两组之间没有统计学差异(P值=0.165)。
  3、相关性分析
  1)合并肺部感染的肺结核组的CRP与血清25羟维生素D3水平呈负相关(r=-0.486,P=0.001)
  2)肺结核组的CD4+T淋巴细胞计数与血清25羟维生素D3水平呈正相关(r=0.637,P=0.000)
  3)肺结核组的CD8+T淋巴细胞计数与血清25羟维生素D3水平呈正相关(r=0.579,P=0.000)
  4)合并肺部感染的肺结核组的CRP与血浆LL-37水平无明显相关性(r=0.182,P=0.236)
  5)肺结核组的CD4+T淋巴细胞计数与血浆LL-37水平无明显相关性(r=0.029,P=0.828)
  6)肺结核组的CD8+T淋巴细胞计数与血浆LL-37水平无明显相关性(r=0.072,P=0.589)
  7)肺结核组的血清25羟维生素D3水平与血浆LL-37水平无明显相关性(r=0.061,P=0.644)
  结论:
  1、肺结核组的血清25羟维生素D3水平明显低于健康对照组,提示活动性肺结核患者存在维生素D缺乏,补充维生素D可能对活动性肺结核的治疗有益。
  2、合并糖尿病的肺结核患者体内维生素D和LL-37水平对比未合并糖尿病的活动性肺结核无统计学差异;耐药肺结核患者体内的维生素D水平及LL-37水平与非耐药的肺结核患者之间虽无统计学差异,但耐药肺结核患者体内的维生素D及LL-37水平可能更低。
  3、活动性肺结核患者的CD4+和CD8+T淋巴细胞计数与维生素D水平呈正相关、与LL-37水平无明显相关性,合并肺部感染的肺结核组的CRP与维生素D水平呈负相关、与LL-37水平无明显相关性。
  4、维生素D、LL-37可能可以作为活动性肺结核患者的生物学标志物。
[硕士论文] 刘创善
职业卫生与环境卫生 广西医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:通过对广西南宁市兴宁区报告肺结核病病例的流行特征分析以及登记管理的涂阳肺结核病患者中影响治愈因素的多因素分析,掌握该区肺结核病流行强度、流行病学特征以及影响治愈的因素,为南宁市兴宁区及类似地区肺结核病的防治提供依据。
  方法:从中国疾病预防控制信息系统-传染病报告信息管理系统中导出南宁市兴宁区2012-2016年报告的肺结核病病例信息,对病例信息进行流行特征分析。从结核病信息管理系统中导出2012-2016年南宁市兴宁区登记管理的涂阳肺结核患者病例信息,应用Excel电子表格和SPSS18.0统计软件分别建立数据库,进行卡方检验、单因素Logistic回归模型分析及多因素Logistic回归模型分析。
  结果:(1)南宁市兴宁区2012-2016年肺结核病报告发病率在131.66/10万-186.27/10万之间,年均报告发病率为155.25/10万;时间分布上虽先上升后再下降,但总体趋势是下降的,发病无明显的季节性;地区分布上以城区的发病率最高,越靠近市区发病率越高;人群分布上男性发病率高于女性,低年龄组人群发病率低,年龄越大发病率越高,职业分布上与其他地方一致,以农民工发病率高,但与其他地方不一致的地方是农民工发病率与其他职业的发病率差别不大。(2)南宁市兴宁区2012-2016年登记管理的涂阳肺结核患者治愈影响因素经x2检验得出结果,治愈组和未治愈组患者不同年龄(x2=15.25,P=0.002)、治疗分类(x2=46.67,P<0.01)、肺部有无空洞(x2=4.75,P=0.03)、2月末痰检结果(x2=43.89,P<0.01)、患者来源(x2=6.25,P=0.04)间比较差异有统计学意义,性别、民族、户籍、居住地、职业比较差异无统计学意义。未治愈组平均年龄、复治患者占比、肺部无空洞占比、2月末痰检阳性占比、患者来源为因症就诊和追踪的比例高于治愈组。经x2检验和Logistic回归模型单因素和多因素分析得出结果低龄(OR=0.52,95%CI=0.36~0.74)、初治(OR=0.32,95%CI=0.16~0.63)、2月末痰检结果阴性(OR=0.43,95%CI=0.30~0.62)共3个因子是影响涂阳肺结核病患者治愈的保护因素。
  结论:2012-2016年南宁市兴宁区报告肺结核发病率总体在下降,但下降缓慢,男性发病率高于女性,年龄越大发病率也越高,越靠近市区发病率越高,报告发病职业以农民和家务及待业为主,这表明性别、年龄、人口流动等因素对兴宁区肺结核的发病有影响。多因素分析结果表明低龄、初治、2月末痰检阴性是涂阳肺结核患者的保护因素,而高龄、复治、2月末痰检阳性患者是涂阳肺结核患者的危险因素。
[博士论文] 任善静
统计学 华中师范大学 2018(学位年度)
摘要:肺结核病是一种由结核分枝杆菌感染的可致命的慢性传染病。它是我国死亡率最高的三个传染病之一,对人类的影响已有数千年的历史。近年来,由于人口的增长、流动人口的增加、多重耐药结核菌增多、艾滋病毒感染的传播等原因,众多发展中国家疫情明显回升。面对结核病流行的严峻局面,世界卫生组织及各国政府都采取了有力的措施以控制结核病的流行。
  本文利用传染病动力学的建模思想,根据肺结核的传播机理,并考虑不同因素建立了三个肺结核传播模型。本文共分为五章。
  在第一章中,首先,介绍了结核病的背景知识、传染病仓室模型及研究现状、年龄结构模型及建立、具有年龄结构的传染病的仓室模型研究现状。其次,介绍了传染病动力学的基本概念和基础知识,如:Lyapunov-Lasalle不变原理、Routh-Hurwitz判别准则、基本再生数等等。
  在第二章中,我们建立并且研究了一个具有潜伏年龄和康复年龄的SEIR肺结核模型,在此模型中,我们考虑了不完全治疗、复发等因素。首先,观察该模型平衡点的存在性并获得基本再生数。研究了一致持续性。其次,通过构造李雅普诺夫函数得到:当基本再生数小于1时,无病平衡点全局稳定;当基本再生数大于1时,无病平衡点不稳定且出现唯一的地方病平衡点,并且证明了此时地方病平衡点的全局稳定性。最后给出了数值模拟,模拟的结果证明了我们的理论结果是正确的。
  在第三章中,我们构建了一个具有年龄结构的SVEIR肺结核模型,在此模型中我们考虑了不完全治疗、复发、不终身免疫等因素。观察该模型平衡点的存在性并获得基本再生数。证明了一致持续性。通过构造李雅普诺夫函数得到:当基本再生数小于1时,无病平衡点全局稳定;当基本再生数大于1时,无病平衡点不稳定且出现唯一的地方病平衡点,并且证明了此时地方病平衡点的全局稳定性。
  在第四章中,我们建立并且研究了一个有限医疗条件下年龄结构肺结核模型。因为肺结核具有较长的潜伏期,因此在此模型中我们考虑了快慢进程因素。又由于我们西部地区尤其是西部偏远农村地区医疗条件的有限性,所以,我们在模型中引入了饱和治疗函数。首先,得到了该模型平衡点的存在性并获得基本再生数。证明了当基本再生数小于1时,无病平衡点是局部渐近稳定的;当基本再生数大于1时,无病平衡点不稳定但存在唯一的地方病平衡点,并且此时地方病平衡点是局部渐近稳定的。其次,证明了一致持续性,并且当基本再生数小于1时,得到了无病平衡点的全局吸引性,进而得到无病平衡点的全局稳定性。通过构造李雅普诺夫函数得到当基本再生数大于1时,地方病平衡点的全局稳定性。
  在第五章中,结论部分总结了当前的工作并给出了今后研究的目标。
[硕士论文] 黎帅宏
外科学(骨科) 广西医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:检测肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α),干扰素-γ(Interferon-gamma,IFN-γ)及白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)在脊柱结核患者的病灶及血清中的表达情况,以初步探讨脊柱结核中TNF-α,IFN-γ及IL-17在病灶中的表达水平与血清中的表达水平的相关性。
  方法:收集2016年6月至2018年2月在广西壮族自治区人民医院骨科接受手术治疗脊柱结核的患者,按照纳入及排除标准,共有15例患者纳入本研究中,其中男9例,女6例,手术时年龄在24~80岁。在患者入院时收集血液标本,在系统抗痨治疗2周左右,择期行脊柱结核病灶清除、钛笼植骨融合内固定术,术中取得脊柱结核病灶标本。采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测血清及结核病灶标本中TNF-α,IFN-γ及IL-17的表达水平。采用t检验及Pearson方法对数据的相关性进行多元相关性分析。
  结果:(1)TNF-α在血清中的相对表达量为281.84±37.31pg/ml,病灶中为871.60±74.12pg/ml;IFN-γ在血清中的相对表达量为56.09±14.78pg/ml,病灶中为39.50±10.38pg/ml;IL-17在血清中的相对表达量为60.23±11.00pg/ml,病灶中为70.80±13.07pg/ml。且这3种因子在血清及病灶中的相对表达量之间的差异具有统计学意义(P<0.01)。而查找相似试验中,其对照组(非脊柱结核患者组)血清中TNF-α、IFN-γ、IL-17的相对表达量分别约为200pg/ml[1]、25pg/ml[2]、35pg/ml[3]。(2)TNF-α,IFN-γ及IL-17各自在血清中与病灶中的相对表达量均有明显的正相关(TNF-α的相关系数r=0.567,P<0.05;IFN-γ的相关系数r=0.876,P<0.01;IL-17的相关系数r=0.929,P<0.01)。(3)血清中TNF-α水平与IL-17水平有明显的正相关(相关系数r=0.672,P<0.01);病灶中TNF-α水平与IL-17水平亦有明显的正相关(相关系数r=0.533,P<0.05)。
  结论:(1)以查找大量相似试验中的对照组(非脊柱结核患者组)血清中TNFα,IFN-γ及IL-17的表达水平为参照,脊柱结核患者TNF-α,IFN-γ及IL-17在血清及病灶中的相对表达量均高于参照的对照组,说明TNF-α,IFN-γ及IL-17可能在脊柱结核的发展及演变中起着重要的作用,这可能对早期诊断脊柱结核有着一定的参考价值。(2)脊柱结核患者TNF-α,IFN-γ及IL-17各自在血清中与病灶中的相对表达量均有明显的正相关,提示可能通过血清中TNF-α,IFN-γ及IL-17的表达水平从而推断结核病灶中的相关因子的免疫表达。(3)脊柱结核患者血清中TNF-α水平与IL-17水平及病灶中TNF-α水平与IL-17水平均有明显的正相关,说明脊柱结核中TNF-α可能是调控IL-17表达的重要因素之一。
[硕士论文] 郭斌
神经病学 郑州大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  结核病目前仍然是一个全球性的公众健康问题,而这其中最致命和致残的结核病形式是结核性脑膜炎(tuberculous meningitis TBM),保守估计每年超过约100,000例新发病例。结核性脑膜炎是一种由结核分支杆菌通过血液传播扩散引起的非化脓性脑脊膜的炎性疾病。然而,近年来由于结核杆菌的基因突变、抗结核杆菌药物的研发迟滞、耐药性结核杆菌的出现等,相关报道显示国内外结核性脑膜炎的发病率和死亡率并未明显降低。由于结核性脑膜炎的误诊及延迟治疗十分严重,早期确诊具有重要的临床意义。
  病毒性脑膜炎是神经内科常见的颅内感染性疾病,由一种或多种病毒感染引起的脑膜急性或亚急性炎性疾病。主要表现为发烧、头痛、呕吐、抽搐、意识障碍等症状。随着细菌性脑膜炎的发病率的下降,病毒性脑膜炎成为临床最常见的无菌性脑膜炎。临床上柯萨奇病毒、脊髓灰质炎病毒、埃可病毒等肠道病毒感染多见,除此之外还有腺病毒、巨细胞病毒、疱疹病毒等其他病毒感染,随诊分子诊断学的临床应用,大大提高了病毒性脑膜炎的病原体的检测速度。
  外泌体是一种可由多种细胞分泌到胞外的纳米级囊泡体,广泛存在于患者血液、脑脊液、尿液以及胸腔积液等不同体液中,含有丰富的蛋白质、脂质、核酸等物质,作为一种新型的细胞物质交换、信息传递载体,不仅参与中枢神经系统正常的生理过程,同时也参与中枢神经系统疾病的发生发展、损伤修复等过程。微小RNA(miRNA)是细胞内大小约21到25个核苷酸构成的非编码RNA,由内源基因编码,具有高度保守性,主要与靶基因mRNA相结合,是主要的基因表达调控分子之一。Let-7家族是第一个已知的人类miRNA,通过干预细胞的分裂、增殖以及分化、凋亡等过程,进而对靶基因的表达进行调控。而let-7b作为let-7家族中的成员之一,其在神经系统中的非正常表达与神经系统多种疾病密切相关。本研究通过分离提取结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎及正常对照者脑脊液外泌体中let-7b,来观察let-7b的表达水平,探寻脑膜炎新的生物学诊断标志物。
  方法:
  收集本院神经科2017-2018年期间住院的15例结核性脑膜炎患者、15例病毒性脑膜炎患者、15例正常脑脊液患者,将其分组为结脑组、病脑组、对照组,收集5mL脑脊液标本。采取ExoQuick Precipitation提取剂分离提纯外泌体,采用透射电子显微镜观察不同组外泌体形态,应用qRT-PCR法检测各组脑脊液外泌体中let-7b相对表达水平。
  结果:
  1.结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎及对照组脑脊液中均可以检测到外泌体,透射电镜下呈圆形或椭圆形,直径约30~100nm。荧光定量PCR检测发现3组脑脊液外泌体中均可检测到let-7b。
  2.结脑组脑脊液外泌体中let-7b的表达显著低于对照组,差异具有明显统计学意义(P<0.05)。
  3.病脑组与对照组相比,病脑组let-7b表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。
  4.结脑组与病脑组相比,结脑组let-7b表达下调,但差异无统计学意义(P>0.05)。
  结论:
  结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎及正常对照组中均可提纯到外泌体。let-7b在结核性脑膜炎患者脑脊液外泌体中表达下调,可作为该疾病的诊断及相关脑炎的鉴别诊断的潜在生物学标志物,但其具体的调控作用机制、结核性脑膜炎疾病治疗前后的变化仍需进一步的探索研究。
[硕士论文] 马希鹏
公共卫生 山东大学 2018(学位年度)
摘要:肺结核是一种严重危害人民群众身体健康的慢性传染病,是全世界及我国政府高度重视的公共卫生问题。2016年世界卫生组织发布的全球结核病报告显示,2015年全球新发结核病数量约为1040万例。目前结核病发病率的下降速度还较低,仅为1.5%,要实现WHO提出的2020年终止结核病策略的里程碑式目标,其发病率的年下降速度必须要达到5%,由此可见结核病防治的任务任重道远。2015年10月,WHO重新修订了结核病高负担国家清单,我国是全球30个结核病高负担国家之一,也是30个耐多药结核病高负担国家之一。结核病患者数位居全球第三位,是我国政府重点控制的传染病之一。在我国传染病信息报告管理系统中,活动性肺结核和疑似肺结核患者的报告发病数和死亡数位居甲乙类法定报告传染病的前列。2010年全国结核病的调查估算≥15岁及以上人群肺结核患病率为460/10万。而目前耐多药肺结核、流动人口结核病结核病艾滋病双重感染等问题使得结核病防控形势更加严峻。
  目前卡介苗是预防结核病的唯一疫苗,但其仅对儿童粟粒性肺结核和结核性脑膜炎有效,对其它肺结核无明显预防作用。因此结核病预防的关键仍然是及时发现并规范治疗管理,国家结核病防治规划要求各级结核病防治机构要早发现、早治疗肺结核患者,采取各种有效措施提高患者早发现工作。而肺结核患者发现是我国结核病控制工作中的难题,肺结核患者发现质量仍然存在薄弱环节,部分地区的肺结核患者发现工作已成为亟待解决的问题。一般来说肺结核患者规范治疗2周以上,传染性就会大大地降低,而肺结核患者延迟发现会增加其在人群中传播的机率及死亡率。由于公众对结核病防治知识的缺乏,肺结核患者不能在发病的第一时间内到结核病定点医疗机构接受诊疗。2010年全国调查的肺结核患者首诊机构为结核病防治机构比例仅为6.9%,大部分患者首诊机构仍然是综合医疗机构、乡镇卫生院和诊所等其他单位。由于患者不能及时得到规范治疗,从而加重了肺结核患者的疾病负担。通过发现延迟研究,分析患者发现延迟的影响因素,了解肺结核患者发现延迟的原因,以此来建议相关部门出台相关政策,有助于提高肺结核患者早发现率和减轻因疾病造成的经济负担,也能降低肺结核患者在人群中传播的机率,有利于控制肺结核病疫情。
  目的:
  本研究的主要目的是分析济宁市初治活动性肺结核患者就诊延迟、确诊延迟和发现延迟的程度,找出影响济宁市初治活动性肺结核患者就诊延迟、确诊延迟和发现延迟的影响因素,缩短活动性肺结核患者发现延迟的时间,能避免因延迟发现治疗而减轻肺结核患者的经济负担,为建设健康济宁做出应有的贡献,对提高济宁市结核病防治工作质量具有重要的意义和作用。
  方法:
  采用整群随机抽样方法,在全市11个县市区内选取3个县市区作为研究现场,选择在3个县市区结核病防治机构登记的初治活动性肺结核患者作为调查对象,纳入对象的标准为正在治疗中的初治活动性肺结核患者,调查初治肺结核患者就诊延迟、确诊延迟和发现延迟情况及其影响因素。资料录入采用Epidata3.2程序录入数据,并进行一致性检验,利用SPSS16.0软件对资料进行统计描述和分析。用描述性研究方法分析济宁市初治肺结核患者就诊延迟、确诊延迟和发现延迟特征,采用非条件Logistic回归模型进行多因素分析肺结核患者就诊延迟、确诊延迟和发现延迟影响因素。
  结果:
  1.本次研究共调查肺结核患者249例,其中就诊延迟患者97例,就诊未延迟患者152例,就诊延迟率为39.0%;确诊延迟患者145例,确诊未延迟患者104例,确诊延迟率为59.2%;发现延迟患者为155例,发现未延迟患者94例,发现延迟率为62.3%。发现延迟患者中痰涂片阳性比例(38.7%)明显高于发现未延迟患者的痰涂片阳性比例(16.0%),P值小于0.01。调查的患者中仅有59.8%的人知晓肺结核相关知识。
  2.多因素Logistic回归分析结果显示,以15~组为对照,45~组和60~组是肺结核病人就诊延迟的危险因素(OR值分别为3.89和2.22);以家庭经济状况较好者为对照,家庭经济状况较差者是肺结核患者就诊延迟的危险因素(OR值为3.81);以无咯血者为对照,有咯血症状者是肺结核患者就诊延迟的保护因素(OR值为0.08)。
  3.多因素Logistic回归分析结果显示,以曲阜市为对照,其他2个县的肺结核患者更易发生确诊延迟(OR值分别为2.42和3.45);以到县结防所时间小于30分钟为对照,到县结防所时间大于60分钟者更易发生确诊延迟(OR值为7.05);以家庭经济状况较好者为对照,家庭经济状况较差者是肺结核患者确诊延迟的危险因素(OR值为7.28);以无咯血者为对照,有咯血症状者是肺结核患者确诊延迟的保护因素(OR值为0.06);以首诊县级以上医院者为对照,首诊乡镇卫生院和村卫生室是肺结核患者确诊延迟的危险因素(OR值分别为4.27和4.66)。
  4.多因素Logistic回归分析结果显示,以男性为对照,女性是肺结核病人发现延迟的保护因素(OR值分别为0.23);以到县结防所时间小于30分钟为对照,到县结防所时间大于60分钟者是肺结核患者发现延迟的危险因素(OR值为8.29);以家庭经济状况较好者为对照,家庭经济状况一般者和较差者是肺结核患者发现延迟的危险因素(OR值分别为2.48和11.42);以不知道肺结核免费政策者为对照,知晓肺结核免费政策者是肺结核患者发现延迟的保护因素(OR值为0.16);以痰涂片阴性者为对照,痰涂片阳性者是肺结核患者发现延迟的危险因素(OR值为3.40);以无咯血者为对照,有咯血症状者是肺结核患者发现延迟的保护因素(OR值为0.08);以首诊县级以上医院为对照,首诊乡镇卫生院和村卫生室是肺结核患者发现延迟的危险因素(OR值分别为3.86和3.04)。
  结论:
  1.济宁市初治活动性肺结核患者就诊延迟和确诊延迟现象比较严重,发现延迟率达62.3%,男性、农村偏远地区、家庭经济较差的肺结核患者的发现延迟风险较高。建议进一步加大结核病防治经费投入,借助国家相关政策开展结核病精准扶贫精准脱贫活动,确保及时发现每一位肺结核患者,特别是农村偏远地区的贫困患者,可以考虑报销其交通费以进一步减轻肺结核患者的经济负担,提高肺结核病的发现率。
  2.首次就诊于村卫生室或乡镇卫生院的肺结核患者的容易发生确诊延迟现象,是首次就诊县级以上医院的确诊延迟危险的4.6倍。建议加大基层医疗人员的培训力度,提高基层临床人员的诊断水平,进一步完善结核病防治体系建设,加强结核病防治三级防痨网建设,落实结核病归口管理,建立完善报告转诊制度,确保肺结核患者及时得到确诊治疗。
  3.发现延迟患者中痰检阳性比例明显高于发现未延迟患者中阳性比例,因此要做好肺结核患者的早发现早治疗工作,减少传染源,减少肺结核疾病的发生,具有重要的疾病预防和公共卫生学意义。
  4.肺结核患者对结核病认知水平有限,应通过广播、电视、微信、微博等有效途径开展全方位多层次的宣传活动,动员全社会参与和关注结核病防治工作,提高全市公众结核病防治知识知晓率,提高可疑肺结核患者及时就诊率
[硕士论文] 杨磊
内科学 西南医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:探讨气管支气管结核患者的临床资料,以提高对气管支气管结核的认识。
  方法:回顾性分析2014年1月-2016年12月在西南医科大学附属医院住院并于内镜医学部行支气管镜检查取材并通过病理组织学或病原学检查明确确诊为气管支气管结核患者临床资料,比较老年组与非老年组患者的一般资料、实验室检查、影像学检查、支气管镜下特点。
  结果:1、总共230例患者,其中男性85例,女性145例,男女比例为1∶1.71。40到50岁发病人数最多;年龄20到30岁女性发病明显多于男性;60岁到70岁、50岁到60岁男性发病率多于女性。非老年患者171人,其中男性52人,女性患者119人,男女比例1∶2.29。老年患者59人,其中男性34人,女性25人,男女比例1.36∶1;非老年组发病率高于老年组。2.就诊科室:呼吸内科184人,感染科33人,胸外科6人,耳鼻喉科、介入科、康复科、乳腺外科、心内科各1人。入院初始诊断肺部感染50例,肺结核106例,肺部包块或肺不张53例。3.发病时间:从1天到10年不等,症状持续时间小于1月的34例,持续症状在1月到1年之间的110例,症状持续时间大于1年的86例。4.症状及体征:支气管结核患者老年组呼吸困难明显多于非老年组,差异具有统计学意义(x2=14.248,P=0.000),两组之间咳嗽、结核中毒症状(乏力、潮热、消瘦)、发热、胸痛、咯血等症状差异无统计学意义。肺部啰音101例,呼吸音粗42例,呼吸音减低58例,叩诊呈浊音34例,查体无异常79例,胸廓畸形1例。5、病原学和组织学:本研究中230例患者,痰查抗酸杆菌阳性94例,支气管镜下刷片抗酸染色阳性111例,肺泡灌洗阳性28例,取病理组织学活检150例,其中阳性率82%(123/150)。气管支气管结核非老年组与老年组患者痰查抗酸杆菌、支气管镜下刷片、病理学活检阳性率无明显差异(P>0.05)。6.免疫学检查:检测结核蛋白芯片的患者有116人,阳性率为51.7%(60/116),其中老年组阳性14例,非老年阳性46例,两组患者阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。检测γ干扰素释放实验的患者有128例,阳性率为78.9%(101/128),其中老年组阳性20例,非老年组阳性81例,两组患者中非老年组阳性率更高,差异具有统计学意义(x2=5.144,P=0.023)。γ-干扰素释放实验检测的敏感性高于结核蛋白芯片,差异具有统计学意义(x2=69;P=0.000)7、胸部CT检查:老年组与非老年组两组患者中CT影像诊断支气管管腔狭窄、肺不张、肺空洞、胸腔积液、阻塞性肺炎、肺门、纵隔淋巴结肿大、胸膜粘连增厚、肺部包块差异无统计学意义。在两组患者误诊为肺癌中,老年组患者误诊率16.9%高于非老年组患者8.8%。非老年组患者对于结核病诊断率高于老年组患者。8、气管支气管下分型:Ⅰ型(炎症浸润型)82例,其中男性30例,女性52例;Ⅱ型(溃疡坏死型)76例,其中男性20例,女性56例,Ⅲ型(肉芽增殖型)10例,其中男性3例,女性7例;Ⅳ型(瘢痕狭窄型)115例,其中男性36例,女性79例:Ⅴ型(管壁软化型)28例,其中男性4例,女性24例;Ⅵ型(淋巴结瘘型)0例。Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅳ型均为非老年组发病率高于老年组(x2=5.610;P=0.018;x2=21.828;P=0.000;x2=28.384;P=0.000),Ⅲ型、Ⅴ型在两组患者中发病率无明显差异(x2=2.163;P=0.141;x2=3.299;P=0.069)。9、气管支气管结核病变部位:发生于气管35例;双肺均存在病灶46例;右侧支气管弥漫性病变10例,左侧支气管弥漫性病变19例;发生于右主支气管12例;右上叶支气管26例;右中间段支气管29例;右下叶背段8例;右下叶基底段8例;左主支气管42例;左上叶固有段30例;左上叶舌段11例;左下叶背段19例;左下叶基底段23例。10、镜下分型与痰菌关系:Ⅰ型(炎症浸润型)35例,痰菌阳性19例;Ⅱ型(溃疡坏死型)21例,痰菌阳性7例;Ⅳ型(瘢痕狭窄型)56例,痰菌阳性13例;Ⅴ型(管壁软化型)6例,痰菌阳性4例,Ⅲ型(肉芽增殖型)、Ⅵ型(淋巴结瘘型)未见单独存在。两种病变类型及以上的112例,痰菌阳性51例。
  结论:1.本研究中,支气管结核都以40岁到50岁的患者为最多,男女发病中以20岁到30岁青年女性多见,而老年气管支气管结核发病明显增高,以男性患者为主,需要临床提高警惕。2.支气管结核最常见的症状是咳嗽、咳痰、呼吸困难,查体大多以啰音为主,约有三分之一的患者没有体征。3.γ干扰素释放实验和结核蛋白芯片及胸部CT对于气管支气管结核都有一定的辅助诊断意义。4.支气管镜是诊断气管支气管结核气道病变最明确的方法,可以明确病变部位,病变类型,病变分期。Ⅰ型Ⅱ型Ⅳ型组气管支气管结核非老年组发病率高于老年组。
[硕士论文] 王媛
生物化学与分子生物学 宁夏大学 2018(学位年度)
摘要:肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar typeⅡepithelial cells,AECⅡ)在抵抗肺脏感染结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的过程中发挥着重要的免疫调控作用,但其具体的调控机制尚未阐明。NF-κB信号通路对病原菌(如MTB等)感染机体后引起的炎性反应起着重要的调控作用,p53信号通路参与了癌症和感染性等多种疾病的发生发展过程。那么MTB侵染AECⅡ时,p53与NF-κB信号通路是否参与调控机体的免疫反应来抵抗感染?本研究建立牛结核分枝杆菌减毒株(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)作用p53和NF-κB基因过表达/干扰A549细胞的模型,利用RT-PCR、Western Blot以及炎症因子蛋白定量芯片技术分析p53和NF-κB信号通路相关信号分子与炎症因子的表达变化规律,以期发现p53与NF-κB信号通路在AECⅡ抗MTB感染的免疫应答过程的“cross-talk”关系。
  通过试验分析发现:BCG作用于p53基因过表达的A549细胞促进了p53、p-MDM2、TNF-α和IL-8的表达,抑制了TLR-4、NF-κB、TRAF6、MDM2、CBP、IFN-γ和IL-6的表达;BCG作用于p53基因干扰的A549细胞抑制了p53、CBP和TRAF6的表达,促进了MDM2/p-MDM2、TLR-4、NF-κB、TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-8的表达。BCG作用于NF-κB基因过表达的A549细胞抑制了p53和MDM2的表达,促进了NF-κB、TLR-4、TRAF6、p-MDM2、CBP、TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-8的表达;BCG作用于NF-κB基因干扰的A549细胞促进了NF-κB、TLR-4、TRAF6、MDM2/p-MDM2、CBP和TNF-α的表达,抑制了p53、IFN-γ、IL-6和IL-8的表达。这些结果揭示了p53信号通路通过负调控NF-κB信号通路,控制细胞炎症反应来参与AECⅡ细胞的抗结核免疫调控作用。这为进一步研究AECⅡ中p53和NF-κB信号通路在抗结核先天免疫中的调控作用奠定理论基础。
[硕士论文] 张月薪
内科学(呼吸内科) 西南医科大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  探讨特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)合并肺炎患者入院时的临床特征,分析导致此类患者住院不良预后的危险因素。
  方法:
  选择IPF伴肺炎患者160例进行回顾性分析,纳入数据包括患者人口学特征、临床表现、实验室指标、肺功能检查、影像学特征、治疗情况以及肺炎严重度指数(pneumonia severity index,PSI)评分,并分析患者病原体检出情况,根据患者出院时临床转归(包括呼吸衰竭、入住重症监护室、住院床日增加以及合并院内感染或死亡中一项或多项)将患者划分为住院预后良好组及住院预后不良组,运用t检验、u检验、x2检验分析两组患者的临床特征,然后运用logistic回归分析该类患者住院不良预后的危险因素。通过回归分析,绘制单因素和多因素联合ROC曲线,比较ROC曲线下面积(area under curve,AUC),预测各变量对患者预后的诊断价值,并分别求取各变量约登指数最大处的截断值。
  结果:
  在住院预后良好组与预后不良组间统计分析比较中发现,住院预后不良组病原学检出率更高(P值<0.05),其中住院预后良好组主要以非典型病原菌感染为主(50%),其中肺炎支原体占首位(50%);住院预后不良组以细菌感染为主(43.3%),主要为革兰氏阴性菌感染(33.3%),其中铜绿假单胞菌占首位(13.3%)。在两组比较中,发热、呼吸频率、心率、中性粒细胞率、C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)、氧分压、血氧饱和度、是否使用覆盖铜绿假单胞的抗生素、是否激素治疗以及PSI评分具有统计学差异(P值均<0.05),将单因素分析中P值<0.1的变量纳入logistic回归分析,结果显示,CRP水平(OR=1.047,95%CI:1.002-1.093)、血氧饱和度(OR=0.779,95%CI:0.648-0.935)以及PSI评分(OR=1.042,95%CI:1.009-1.077)是IPF合并肺炎患者住院预后的独立影响因素(P值均<0.05)。绘制ROC曲线,取约登指数最大处为截断值,CRP水平、血氧饱和度水平以及PSI评分的截断值分别为12mg/L、94%、81分,三因素联合的AUC(0.851)比单因素C反应蛋白AUC(0.649)、血氧饱和度AUC(0.683)、PSI评分AUC(0.709)大。
  结论:
  在IPF合并肺炎患者中,住院预后良好组与住院预后不良组之间,发热、呼吸频率增快、心率增快、中性粒细胞比率增加、血CRP水平升高、动脉血氧分压降低、动脉血氧饱和度降低以及高PSI评分更易出现于住院预后不良患者,且住院预后不良患者使用覆盖铜绿假单胞抗生素以及全身使用激素的频率更高;住院预后不同的两组病原学检出情况存在差异,住院预后良好组的病原体以非典型病原体感染为主,其中肺炎支原体最为常见,住院预后不良组以细菌感染为主,以革兰氏阴性杆菌最为常见,其中以铜绿假单胞菌为首;入院时血CRP水平、动脉血氧饱和度水平以及PSI评分是IPF合并肺炎患者住院预后的独立影响因素;应选择C反应蛋白、血氧饱和度、PSI评分三因素联合诊断试验作为预测IPF合并肺炎患者预后不良的首选,其中CRP水平、血氧饱和度水平以及PSI评分预后不良的截断值分别为12mg/L、94%、81分。
  (已选择0条) 清除
公   告

北京万方数据股份有限公司在天猫、京东开具唯一官方授权的直营店铺:

1、天猫--万方数据教育专营店

2、京东--万方数据官方旗舰店

敬请广大用户关注、支持!查看详情

手机版

万方数据知识服务平台 扫码关注微信公众号

万方选题

学术圈
实名学术社交
订阅
收藏
快速查看收藏过的文献
客服
服务
回到
顶部