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[硕士论文] 赵煜
耳鼻咽喉科 中国人民解放军海军军医大学;海军军医大学 2018(学位年度)
摘要:目的:
  变应性鼻炎(AR)是耳鼻喉科常见病,是一种由变应原引起的以Th2型细胞免疫为主的变应性疾病,其发病率高且患病率呈上升趋势,目前尚无有效根治方法。
  脑恶性肿瘤缺失基因1(DMBT1)是一种主要来源于上皮细胞的分泌性糖蛋白,在整个免疫系统都有表达,目前已知它的表达异常与炎症和肿瘤有关,但在变应性鼻炎中的作用目前尚无文献报道。前期研究显示DMBT1在变应性鼻炎患者基因及蛋白水平表达有明显差异,推测该蛋白与变应性鼻炎疾病有关,需要进一步研究以阐明其机制。
  方法:
  首先利用ELISA法检测变应性鼻炎患者及正常人鼻腔灌洗液DMBT1蛋白表达,利用免疫组化法检测变应性鼻炎患者及正常人鼻下鼻甲黏膜DMBT1蛋白表达情况。进一步通过OVA(鸡卵清白蛋白)致敏Balb/c小鼠,构建变应性鼻炎小鼠疾病模型,利用Western blot法及免疫组化、免疫荧光的方法检测变应性鼻炎小鼠模型组与生理盐水对照组小鼠鼻黏膜DMBT1表达情况。此外,通过建立不同表达重组DMBT1蛋白干预的变应性鼻炎疾病小鼠,观察其行为学指标,并利用ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液Th2型细胞因子表达、血清IgE表达,HE(Hematein Eosin,HE)染色法计数小鼠鼻黏膜嗜酸性粒细胞(EOS)浸润情况。
  结果:
  1、ELISA法检测DMBT1蛋白表达在变应性鼻炎患者鼻腔灌洗液中表达上调;免疫组化检测变应性鼻炎患者下鼻甲黏膜中DMBT1蛋白表达明显上调。
  2、BALB/c小鼠经OVA+氢氧化铝凝胶佐剂干预后,从行为学、组织学、免疫功能(外周血OVAsIgE测定)三方面均符合典型变应性鼻炎疾病改变(小鼠AR模型建立成功),Western blot、免疫组化、免疫荧光法检测其鼻黏膜DMBT1蛋白水平明显较生理盐水对照组表达升高,差异均具有统计学意义(n=5,P<0.05)。
  3、对变应性鼻炎小鼠进行重组DMBT1蛋白滴鼻后,小鼠行为学指标(挠鼻、喷嚏次数)下降,肺泡灌洗液中Th2型细胞因子表达下降,鼻黏膜嗜酸性粒细胞浸润减少,组间差异均具有统计学意义(n=5,P<0.05)
  结论:
  1、本研究首次发现了DMBT1在鼻部为分泌性;首次发现在变应性鼻炎患者鼻部DMBT1表达升高;
  2、利用OVA+氢氧化铝凝胶佐剂干预BALB/c小鼠可成功构建变应性鼻炎小鼠疾病模型;变应性鼻炎组小鼠鼻黏膜DMBT1蛋白表达明显升高,提示该疾病模型可以为研究DMBT1对变应性鼻炎疾病的作用提供良好的动物实验基础;
  3、本研究首次发现DMBT1对Th2细胞具有抑制作用。
  提示DMBT1可能作为一种保护鼻黏膜的蛋白,具有抑制Th2细胞免疫的作用,对变应性鼻炎的发病和/或疾病进展有抑制作用。DMBT1有望为变应性鼻炎的治疗提供新方法新思路。
[硕士论文] 徐勇
外科学(整形外科) 中国人民解放军海军军医大学;海军军医大学 2018(学位年度)
摘要:研究背景:
  鼻部是人面部最突出部位,因此最能吸引人们的注意,留下第一印象。因此鼻整形手术也逐渐成为当前最受欢迎的整形手术之一,治疗范围也从各种先天性或外伤导致鼻畸形矫正扩展向各种美容鼻整形手术等。但东亚人鼻根低平、鼻背宽阔、鼻尖钝圆、软组织肥厚而软骨支架纤薄的特点给国人的鼻整形手术带来巨大挑战。
  于解剖学和种族的差异,大多数亚洲人的鼻整形目标与西方人的“减容”手术不同,更多的是垫高鼻背、突出鼻尖。当前鼻整形的理念强调,鼻部形态的重塑不能单纯依靠放置植入物,而主要是利用自体组织如耳软骨、鼻中隔软骨、肋软骨和筋膜组织等,来改变鼻部的软骨和硬骨支架架构。如何在术前合理规划肋软骨的切取,肋软骨的尺寸大小是否合适于鼻整形手术,钙化是否严重,手术中可能面临什么样的困难,第6、7、8肋软骨选取哪一肋最为合适,周围血管的分布情况,如何利用最小的切口获取最多的材料,同时避免风险,上述问题成为利用肋软骨行鼻整形手术亟待解决的问题,本研究尝试对华东地区肋软骨鼻整形适龄女性(18岁-45岁)的肋软骨三维数据进行测量研究从而为临床实践工作提供相关理论支持。
  研究目的:
  1、描述华东地区鼻整形术适龄女性(18岁-45岁)肋软骨三维数据,探索肋软骨发育及钙化规律,为自体肋软骨鼻整形手术方案设计提供参考依据,辅助术者术前手术切口设计、鼻软骨支架的搭建。
  2、通过对胸廓血管的增强显像+三维重建,描述胸廓内动脉的走行及与肋软骨相关关系,为高效且安全的肋软骨截取术提供依据。
  研究方法与结果:
  1、本研究获得了华东地区鼻整形适龄女性的6、7、8肋软骨三维尺寸数据,同时研究发现第7肋具有最长的平直部长度和较佳的厚度,而第6肋具有最佳的平直度和宽度,同时其变异系数最小,稳定性佳,而第8肋软骨上述指标中均无优势。
  2、左右侧肋软骨发育在多数指标上无显著性差异,从尺寸数据上无法得出哪一侧更有优势的结论。同时第6、7、8肋软骨之间的钙化程度统计学无显著差异,钙化程度与年龄具有相关性,但其相关性较弱,术前无法预判特定年龄患者特定肋软骨的钙化程度,因此每一名患者行术前薄层CT检查并对肋软骨行综合评价显得十分必要。
  3、胸廓内动脉起源于两侧锁骨下动脉,紧贴软骨后方走行,至第6肋间隙(第6-7肋软骨之间)分支为膈肌动脉与腹壁上动脉,腹壁下动脉向下走行,膈肌动脉在第6肋间隙间向外下走行。该血管分支点位置较固定,均位于第6肋间隙,距人体正中线约2-3cm处。
  研究结论:
  1、CT检查并三维重建测量可以较好地评估肋软骨的发育、钙化情况,具有较高的准确性;
  2、第6肋和第7肋软骨均可用于肋软骨鼻整形,6肋短直,稳定性佳,隐蔽性优,7肋较长,略厚,剥离安全性佳;
  3、无法通过年龄准确预测患者特定软骨的钙化情况,每一名患者行均应行充分的术前影像学评估;
  4、距人体正中线2-3cm处应作为术中剥离软骨的风险线,避免盲视下截取,损伤胸廓内动脉及其分支。
[博士论文] 秦作荣
耳鼻咽喉科学 山东大学 2017(学位年度)
摘要:依据EPOS2012,鼻鼻窦炎被定义为:鼻腔和鼻窦的炎症,具有两个或两个以上的症状特征,其中一个必备条件是鼻塞/鼻堵,或鼻漏(前后鼻孔滴漏),可以伴或不伴面部疼痛/压迫感、嗅觉减退或丧失;并且鼻内镜检查所见:鼻腔息肉,并且/或伴有主要来源于中鼻道的黏脓性分泌物,并且/或伴有主要位于中鼻道的黏膜水肿或阻塞;或CT检查:伴有窦口鼻道复合体和/或鼻窦的黏膜改变1。慢性鼻-鼻窦炎的症状持续时间不少于12周,并且症状未彻底消失。在临床上,可将慢性鼻-鼻窦炎(CRS)分为慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)和慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP),对于慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉,有学者依据鼻息肉中浸润细胞的种类和数量,把慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉分为嗜酸性粒细胞型、中性粒细胞型、非嗜酸性粒细胞非中性粒细胞型2。不同的慢性鼻-鼻窦炎表型,其各自的内在病理生理学特点存在差异,这种差异可能预示不同的发病机制,识别不同的发病机制可通过特定的生物标志物来完成,已经发现某些生物学标志物,如血液中特异性IgE、金黄色葡萄球菌内毒素IgE等,可作为慢性鼻-鼻窦炎的不同内在型的生物标志物3,并且针对不同内在型的标志物可以选择个体化的治疗4,5。
  研究报道骨膜蛋白(Periostin)是嗜酸性粒细胞性哮喘患者呼吸道炎症的全身性生物标志物6,7,参与哮喘患者呼吸道黏膜上皮下组织纤维化等结构重塑8,9。上下呼吸道常常同时存在炎症10,组织病理学研究发现与哮喘患者下呼吸道结构重塑相一致,在慢性鼻-鼻窦炎患者鼻腔鼻窦组织中也存在结构重塑11。由此推测,在慢性鼻-鼻窦炎的组织中,可能存在骨膜蛋白的表达,这种表达在不同的慢性鼻-鼻窦炎表型可能具有差异,这种差异对于认识慢性鼻-鼻窦炎的内在分型具有重要意义,与慢性鼻-鼻窦炎的发病机制有一定的关系。
  在哮喘患者中,血清中升高的骨膜蛋白与一种特殊的哮喘表型嗜酸性粒细胞型哮喘有一定关系,并且经常合并有阻塞性肺功能障碍和鼻部疾病12,在Th2型(IL-5、IL-13高表达)、伴有较高的嗜酸性粒细胞的哮喘表型中,与血中嗜酸性粒细胞数、痰中嗜酸性粒细胞相比,血清中骨膜蛋白对于检测气流受限具有更高的敏感性13,血清中骨膜蛋白可以作为哮喘的生物标志物,主要表现在两个方面:一是作为Ⅱ型免疫反应的生物标志物代替指标,二是作为反映组织重塑或纤维化的生物标志物14。已有研究发现在慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉中,59.6%存在嗜酸性粒细胞(EOS)浸润,嗜酸性粒细胞浸润在慢性鼻-鼻窦炎(CRS)的病理生理过程中处于中心位置15。在嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉中,骨膜蛋白的表达可能与嗜酸性粒细胞的浸润有一定的关系,进而可能与嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉的形成有关。
  目的:我们的研究旨在观察骨膜蛋白在慢性鼻-鼻窦炎不同表型的表达,分析其在慢性鼻-鼻窦炎病理生理过程中的作用,为慢性鼻-鼻窦炎的内在分型提供可能的依据。
  方法:选择住院患者,分为慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉组(CRSsNP、19例)、慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组(CRSwNP、36例)、鼻中隔偏曲组(DNS、15例)。分别留取慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉组的筛窦黏膜和慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组患者的筛窦黏膜组织与鼻息肉组织、鼻中隔偏曲患者的下鼻甲组织作为标本,对慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组标本进行HE染色,依据嗜酸性粒细胞的浸润情况,将慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组分为嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组(ECRSwNP)和非嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组(NonECRSwNP),对四组标本进行骨膜蛋白免疫组织化学染色(IHC)、实时定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),观察骨膜蛋白分子及mRNA在四组标本的表达;通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测四组患者血清中骨膜蛋白的浓度。并对局部组织中免疫组织化学染色评分、骨膜蛋白mRNA、嗜酸性粒细胞浸润和血清中骨膜蛋白浓度、血液中嗜酸性粒细胞比例分别进行各指标间相关性分析。
  结果:骨膜蛋白免疫组化染色显示,骨膜蛋白在四组标本中的表达主要位于鼻黏膜上皮的基底膜、上皮下的纤维组织。慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉组(筛窦黏膜)、嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组(筛窦黏膜、鼻息肉)、非嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组(筛窦黏膜、鼻息肉)和鼻中隔偏曲组(下鼻甲黏膜)的免疫组化染色评分分别为3.19±0.98、3.90±0.42/4.17±0.52、3.20±0.86/3.32±0.84和2.44±0.86,慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉组、嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组以及非嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组评分高于鼻中隔偏曲组,差异具有统计学意义(P<0.05、P<0.01、P<0.01)。嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组高于其他三组,差异具有统计学意义(P<0.01)。慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉组、非嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组之间相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。通过酶联免疫吸附方法测得四组患者血清中的骨膜蛋白浓度,慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉组、嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组、非嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组和鼻中隔偏曲组血清中骨膜蛋白浓度分别为47962.77±14307.30、72138.91±21722.43、43012.45±10314.95和31337.81±8181.02pg/ml。嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组明显高于其他三组,差异具有统计学意义(P<0.01),鼻中隔偏曲组低于其他三组,差异具有统计学意义(P<0.01),慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉组与非嗜酸性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组相比无明显差异(P>0.05)。四组患者鼻黏膜组织中均有骨膜蛋白mRNA,慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉组、嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组、非嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组和鼻中隔偏曲组鼻黏膜组织骨膜蛋白mRNA分别为0.351156±0.250896、0.477044±0.505552、0.326074±0.412194和0.340352±0.304540,与鼻中隔偏曲组相比,慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉组、嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组、非嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组鼻黏膜组织中骨膜蛋白mRNA升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。在嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉组,鼻息肉组织中骨膜蛋白分子的表达与局部组织(筛窦黏膜、鼻息肉)中嗜酸性粒细胞的浸润具有一定相关性(P<0.01,P<0.05),血清骨膜蛋白浓度与血中嗜酸性粒细胞比例具有一定的相关性(P<0.01)。在四组标本中,局部组织中骨膜蛋白分子的表达与血中嗜酸性粒细胞比例无明显相关性(P>0.05)。筛窦黏膜骨膜蛋白mRNA的表达与局部组织中嗜酸性粒细胞浸润、血中嗜酸性粒细胞比例无明显相关性(P>0.05)。
  结论:1、骨膜蛋白作为炎性介质之一,参与慢性鼻-鼻窦炎的慢性炎症过程。2、骨膜蛋白参与嗜酸性粒细胞性慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉的发病过程,这与嗜酸性粒细胞的浸润具有一定的正相关;3、骨膜蛋白参与慢性鼻-鼻窦炎不同分型的组织重塑过程。
[硕士论文] 王磊
麻醉学 山东大学 2017(学位年度)
摘要:目的:本研究拟将不同剂量右美托咪定术前滴鼻应用于扁桃体摘除术的患儿,通过观察术前患儿镇静评分、血流动力学改变、不良事件发生情况以及不同时间点炎症因子变化,探讨右美托咪定术前滴鼻应用于小儿的安全性。
  方法:选择择期行扁桃体摘除术的患儿60例(ASAⅠ级)作为研究对象,随机分为高剂量组(H组)、低剂量组(L组)和对照组(C组),每组20例。麻醉诱导前40min,H组鼻腔滴入2μg/kg的右美托咪定(加生理盐水至0.6ml),L组鼻腔滴入1μg/kg的右美托咪定(加生理盐水至0.6ml)注射液,C组鼻腔滴入0.6mL生理盐水。观察三组患儿用药后镇静评分、分离状态、血流动力学、脉搏血氧饱和度、拔管时间、PACU停留时间、不良事件发生情况,并于插管前(T0)、拔管后即刻(T1)、术毕4h(T2)、术毕12h(T3)、术毕24h(T4)时监测不同时点血清炎性因子TNF-α和IL-6水平。
  结果:三组患儿年龄、性别、体重、基础心率、基础血压、手术时间等差异均无统计学意义(P>0.05),H组和L组的术前镇静及分离状态明显优于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。C组患儿心率和血压随时间变化明显,且高于H组和L组(P<0.001),三组患儿各时间点的脉搏血氧饱和度差异无统计学意义(P>0.05);三组患儿的拔管时间分别为(10.5±2.6)、(10.4±2.2)和(9.5±2.7)min,差异无统计学意义(P>0.05);PACU停留时间分别是(35.2±10.5)、(34.2±12.3)和(33.2±10.7)min,差异无统计学意义(P>0.05);H组和L组的患儿呛咳、术后躁动的发生率明显低于C组(P<0.05);三组患儿TNF-α、IL-6血浆浓度随时间的改变差异有统计学意义,其中C组变化明显(P<0.001)。H组和L组在拔管后即刻、术毕4h、12h和24h的TNF-α、IL-6血浆浓度均低于C组(P<0.001),而且H组在拔管后即刻、术毕4h、12h和24h的TNF-α、IL-6血浆浓度均低于L组(P<0.001)。
  结论:右美托咪定术前滴鼻能提高患儿镇静水平,改善亲子分离状态,血流动力学平稳,无呼吸抑制发生,不影响拔管时间,并能降低不良事件发生率,减少围术期炎性因子释放,增加围术期安全性。且使用右美托咪定2μg/kg术前滴鼻较1μg/kg更能降低炎性因子释放,值得临床推广应用。
[硕士论文] 李科婷
耳鼻咽喉科学 山西医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  通过检测参与本实验的变应性鼻炎患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞在外周血CD4+Treg细胞中的所占比(%),进一步比较和探讨口服益生菌和特异性免疫治疗在治疗变应性鼻炎中存在的联合作用。
  方法:
  1.根据变应性鼻炎的诊断标准、排除标准收集符合要求的变应性鼻炎患者42例(签署知情同意书),随机分成3组:
  ①常乐康组(14例):仅服用常乐康治疗,一个疗程,连续服用3个月。
  ②免疫治疗(SIT)组(14例):仅进行特异性免疫治疗,治疗3个月。
  ③常乐康+免疫治疗(SIT)组(14例):同时口服常乐康和进行特异性免疫治疗。实验标本为治疗前后变应性鼻炎患者的外周血标本。
  采用流式细胞仪测定外周血中的CD4+CD25+Treg细胞的含量,统计、比较、分析和探讨口服益生菌和特异性免疫治疗在治疗变应性鼻炎中存在的联合作用。
  结果:
  1.三组治疗后的CD4+CD25+Treg细胞含量均高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。
  2.常乐康+免疫治疗(SIT)组的CD4+CD25+Treg细胞含量明显高于常乐康组,差异有统计学意义(P<0.05)。
  常乐康+免疫治疗(SIT)组的CD4+CD25+Treg细胞含量明显高于免疫治疗组,差异有统计学意义(SIT)组(P<0.05)。
  结论:
  1.三组治疗后的外周血中CD4+CD25+Treg细胞含量均高于治疗前,表明这三种治疗方案对变应性鼻炎的治疗均是有效的。
  2.与常乐康组,免疫治疗(SIT)组相比,常乐康+免疫治疗(SIT)组中CD4+CD25+Treg细胞含量增多,表明口服益生菌和特异性免疫治疗在治疗变应性鼻炎中具有联合作用,联合作用优于单个作用。
[硕士论文] 房莹莹
耳鼻咽喉科学 山西医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  1.研究探讨慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者血清维生素D水平,分析其与慢性鼻-鼻窦炎的发病有无明显相关性。
  2.临床观察予以维生素D的综合治疗对慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者的疗效,分析血清维生素D水平对治疗效果的影响。
  方法:
  1.随机对照试验:随机抽取2016年01月-2016年12月就诊于山西医科大学第一医院耳鼻咽喉头颈外科的40例慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者为研究对象,入院测血清25羟基维生素D水平。按照计算机产生的随机数字序列进行随机分组:实验组和对照组。
  2.全数受试对象均详细记录年龄、身高、体重、吸烟史及饮酒史、血清25羟基维生素D、血清嗜酸性粒细胞计数及比例、血清肌酐浓度。
  3.全数受试对象入院后进行鼻内镜Lund-Kennedy评分、由统一专业人士进行引导填写 SNOT-20条(sino-nasal outcome test)、视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)。
  4.由同一术者按照Messerklinger术式行鼻内镜手术,术后抽取鼻腔填塞物后开始进行分组治疗。实验组给予口服维生素D(国药控股星鲨制药)800UI/次1次/日+布地奈德喷鼻剂喷鼻(64μg/喷,2喷/次1次/天)。对照组只给以布地奈德喷鼻剂喷鼻,随访8周。8周后复查血清25羟基维生素D,再次记录鼻内镜Lund-Kennedy评分、SNOT-20、视觉模拟量表VAS评分。
  5.实验数据完成后,将VAS评分和SNOT-20量表资料进行统一整理,分别输入到Excel中,并进行仔细核对与纠正。SNOT-20量表直接计算条目记分,统计学方法经SPSS21.0 Windows统计学软件进行处理和分析。检验水准α=0.05。
  结果:
  1.筛查60例试验对象血清维生素D水平,其中80%患者伴有VD不足(<50 nmol/L,2%为重度不足、46%为中度不足、52%为轻度不足)。提示在慢性鼻-鼻窦炎患者中血清维生素D水平普遍较低。
  2.实验组与对照组患者性别、年龄、体质指数均无统计学差异,具有可比性。
  3.术前VD水平与血清嗜酸性粒细胞百分比存在线性关系,且呈负相关。
  4.试验前两组间VD水平的差异无统计学意义,尚不能认为试验前试验组与对照组的VD水平有统计学差异;试验后两组间VD水平的差异有统计学意义,可认为试验后试验组VD水平高于对照组。
  5.治疗后,试验组与对照组间鼻塞、脓涕、头面部疼痛、VAS总分等评分的差异均具有统计学意义;两组间嗅觉障碍症状评分的差异无统计学意义。治疗后试验组与对照组间SNOT-20量表评分、Lund-Kennedy评分的差异均具有统计学意义。
  结论:
  在慢性鼻-鼻窦炎患者中血清维生素D水平普遍较低,临床上对患者予以补充维生素D后可显著提高患者血清中25羟基维生素D的水平,与改善慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者的临床症状及提高临床综合治疗效果呈正相关。
[硕士论文] 乔燕
耳鼻咽喉科学 山西医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  通过对比应用酪酸梭菌二联活菌胶囊(又名常乐康)等药物前后变应性鼻炎患者血清中IL-10、TGF-β1及四分法、视觉模拟量表、鼻结膜炎生活质量调查问卷评分的变化来观察常乐康辅助治疗变应性鼻炎的的疗效。
  方法:
  1.根据纳入标准、排除标准、退出标准最终收集到符合条件的季节性中-重度变应性鼻炎患者研究组20例,对照组20例。研究组给予常乐康、枸地氯雷他定片、糠酸莫米松鼻喷剂治疗2周后继续给予常乐康维持治疗6周,而停用其他两种药物。对照组给予枸地氯雷他定片+糠酸莫米松鼻喷剂治疗2周后退出临床实验。
  2.收集研究组和对照组患者在治疗前、治疗2周后、治疗结束后血清并通过四分法、视觉模拟量表、鼻结膜炎生活质量调查问卷(RQLQ)进行评分。同时收集健康成人血清10份作为正常组。最后采用酶联免疫吸附试验检测三组中每位受试者每个阶段血清中IL-10、TGF-β1水平。
  3.统计数据:①研究组患者在治疗前、治疗2周后、治疗结束后IL-10、TGF-β1、症状评分、RQLQ总评分的变化有无统计学意义;②研究组和对照组在治疗2周后IL-10、TGF-β1、症状评分、RQLQ总评分有无差别;③分析IL-10水平、TGF-β1水平分别与症状评分、RQLQ总评分的相关性。
  结果:
  1.治疗前正常组、研究组、对照组血清TGF-β1和IL-10水平总体差异有统计学意义(P<0.001),且研究组、对照组均显著低于正常组。
  2.随着治疗时间的增加,研究组患者血清中IL-10、TGF-β1水平逐渐升高(治
  疗8周后>治疗2周后>治疗前),四分法眼部症状评分、VAS眼部症状评分、RQLQ总分逐渐降低(治疗8周后<治疗2周后<治疗前)。
  3.对照组患者治疗2周后血清IL-10、TGF-β1均高于治疗前(P<0.001),四分法鼻部症状、四分法眼部症状,VAS鼻部症状、VAS眼部症状,RQLQ总评分均低于治疗前(P<0.001)。
  4.治疗2周后研究组患者血清 IL-10高于对照组(P<0.001),但两组间TGF-β1、症状及生活质量评分均无统计学差异(P>0.05)
  5.治疗前AR患者血清IL-10、TGF-β1与四分法鼻部症状评分、四分法眼部症状评分、VAS鼻部症状评分、VAS眼部症状评分、RQLQ总分之间均无线性相关关系(P>0.05)。
  结论:
  1.AR患者血清IL-10、 TGF-β1水平低于正常组提示IL-10、 TGF-β1可能参与了AR的发病。
  2.酪酸梭菌二联活菌胶囊可能对研究组AR患者血清 IL-10、 TGF-β1的产生起促进作用。
  3.枸地氯雷他定和糠酸莫米松鼻喷剂联合治疗可能对AR患者血清 IL-10、TGF-β1的产生起促进作用。
  4.AR患者在枸地氯雷他定和糠酸莫米松鼻喷剂治疗的基础上加用酪酸梭菌二联活菌胶囊可能比常规的二者联合治疗更能促进血清IL-10的产生,但在症状及生活质量方面没有更明显的改善。
  5.酪酸梭菌二联活菌胶囊可能对AR患者眼部症状、总生活质量的改善有一定的作用。
  6.AR患者治疗前血清IL-10、 TGF-β1水平可能与其症状、生活质量关联性较小,暂不能用血清IL-10、TGF-β1水平的高低来评估AR的病情严重程度。
[硕士论文] 牛慧慧
耳鼻咽喉科学 山西医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  研究IL-20与IL-22在鼻息肉患者的息肉组织以及正常鼻黏膜组织中的表达及鼻息肉组织中IL-20、IL-22表达的相关性,分析其在鼻息肉的发生、进展及疾病复发中的作用机制,为鼻息肉发生机制的科学研究奠定实验基础,旨在以IL-20、IL-22为靶点治疗鼻息肉并防止其复发。
  方法:
  1.本实验收集于2015.11-2016.4在山西医科大学第一医院耳鼻喉科手术的患者,实验组为鼻息肉患者,共50例,在其行功能性鼻内镜手术时,取鼻息肉的头端组织;对照组为鼻中隔偏曲的患者,共50例,取其行鼻中隔偏曲矫正术对侧代偿性肥大的下鼻甲黏膜组织。2.实验方法采取免疫组化法 SP6001,测定鼻息肉组织及正常鼻黏膜组织中IL-20与IL-22的表达情况。3. IL-20和IL-22表达的免疫组化评分标准,根据某一高倍镜视野下细胞的阳性率和细胞的显色程度:若无染色或无明显染色记为0分;若阳性染色细胞数﹤10%记1分;阳性细胞数大于等于10%但低于40%记为2分;阳性细胞数大于等于40%但小于70%记为3分;阳性细胞数大于等于70%记为4分;无染色或无明显染色记为0分;浅黄色记为1分;浅黄色至黄色记为2分;黄色至棕黄色记为3分;棕黄色至褐色记为4分。最后将上述两种测定结果的评分的平均值加起来便是该组织玻片的最后得分。评分大于等于0分小于2分记为阴性(-);大于等于2分小于4分记为弱阳性(+);大于等于4分小于6分记为阳性(++);大于等于6分记为强阳性(+++)。4.所得数据采用SPSS21.0软件进行统计学分析。
  结果:
  1.IL-20、IL-22在鼻息肉组织及正常鼻黏膜组织中均有表达,表达结果分为阴性、弱阳性、阳性、强阳性,IL-20在鼻息肉组织中的表达4组结果分别有2、10、19、19例,IL-22则分别有0、14、23、13例;IL-20在正常鼻黏膜组织中的表达4组结果分别有4、17、22、7例,IL-22则分别有2、20、23、5例。
  2.IL-20和IL-22分别在鼻息肉组织和正常鼻黏膜组织中的表达存在显著差异(p﹤0.05),IL-20和IL-22在鼻息肉组织中的表达均明显高于对照组。
  3.在鼻息肉组织中,IL-20和IL-22的表达具有相关性(p﹤0.05),呈正相关关系。
  结论:
  IL-20、IL-22作为炎性细胞因子,在鼻息肉组织中的表达明显升高,且表达呈正相关关系,提示IL-20、IL-22在鼻息肉中的表达具有相互促进作用,共同促进鼻息肉的发病及进展。
[硕士论文] 张飞
耳鼻咽喉头颈外科 山西医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:通过观察鼻息肉组织内的炎性细胞的浸润特点,分析以中性粒细胞的浸润为主的鼻息肉患者的临床特点,及 IL-17、IL-8在其组织中的表达,从而为鼻息肉的临床分类和治疗策略提供依据。
  方法:收集我科行鼻内镜手术的患者鼻息肉组织,时间为2016年3月至2016年10月。根据病理特点,经HE染色观察后,采用Wenzel SE等[1]以炎性细胞的百分比例>正常对照组的均数+2倍的标准差定义为该炎性细胞为主型的,区分出以中性粒细胞浸润为主的鼻息肉,并与嗜酸性粒细胞浸润为主的鼻息肉作比较,各收集40例,收集鼻中隔偏曲需要行矫正术的患者部分下鼻甲粘膜20例。常规检查鼻息肉患者的外周血中性粒细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比,通过鼻息肉患者的术前鼻窦CT、模拟视觉量表(VAS)及鼻内镜下观察的临床数据,分析其临床特点,并通过免疫组化检查IL-17和IL-8在组织中的。
  结果:本实验中性粒细胞>4%(1.25%+2×1.37%=3.96)定义为中性粒细胞型鼻息肉;嗜酸性粒细胞大于8%(4.4%+2×1.7%=7.9%)定义为嗜酸性粒细胞型鼻息肉。中性粒细胞浸润为主的鼻息肉组患者与嗜酸性粒细胞型鼻息肉组患者相比较,在性别、年龄、中性粒细胞百分比无显著差别(p>0.05);NEUNP与 ENP患者流粘脓涕程度分别为6.35±1.20和5.69±1.31(p<0.05),存在显著的差异;而两组患者的VAS整体主观症状、鼻内镜下鼻息肉病变程度均无显著差别(p>0.05);NEUNP患者和EOSNP患者的鼻窦CT影像学整体得分分别为9.59±3.35和14.43±3.81(p<0.05),上颌窦评分分别为3.14±1.21和2.05±1.02(p<0.05),均有显著的差异,即NEUNP患者的整体病变较轻,但上颌窦病变较严重。IL-17、IL-8在NEUNP中的表达均明显高于在EOSNP、正常下鼻甲粘膜中的表达(p<0.05)。
  结论:性粒细胞型鼻息肉患者的分泌物为粘脓性分泌物,其主观症状的评分明显高于嗜酸性粒细胞鼻型的鼻息肉患者;中性粒细型鼻息肉患者上颌窦的病变程度同样明显高于嗜酸性粒细胞鼻息肉患者,整体上鼻窦的病变程度相对嗜酸性粒细胞型鼻息肉较轻。IL-17、IL-8在中性粒细型鼻息肉组织中的表达均高于嗜酸性粒细胞型鼻息肉和正常对照组,提示IL-17、IL-8趋化中性粒细胞作用于鼻息肉,对中性粒细胞型鼻息肉的发病机制发挥重要作用。因此,以中性粒细胞浸润为主的鼻息肉,有明显的临床和病理特点,为鼻息肉的发病机制提供了新的认识。
[博士论文] 何敏
耳鼻咽喉学 山西医科大学 2017(学位年度)
摘要:杯状细胞是结膜上皮的主要细胞之一,主要合成、储存和分泌粘蛋白MUC5AC,后者是最丰富的粘蛋白,构成了泪膜的粘蛋白层。在生理情况下,杯状细胞分泌粘蛋白对于润滑眼球、维持泪膜的稳定以及保持粘膜屏障的完整性从而预防感染意义重大。在病理情况下,杯状细胞参与过敏性鼻结膜炎以及结膜瘢痕性疾病等的发生和发展,在炎症、免疫调节及结膜移植中的重要作用正在被人们逐步认识。
  过敏性结膜炎是结膜对外界变应原产生的一种超敏反应,常伴有鼻部症状,因此也称之为过敏性鼻结膜炎,是一类发病率逐年升高且影响患者生活质量的眼免疫疾病。组胺是过敏反应的一种最重要的递质,近年来研究发现,杯状细胞表面表达组胺H1-H4受体,并且组胺可以在体外刺激杯状细胞分泌粘蛋白。由此可见杯状细胞是过敏性结膜炎的直接靶细胞,它的免疫作用也开始被人们认识。
  表皮生长因子受体(EGFR)是受体酪氨酸激酶家族的成员,在上皮细胞迁移、增殖和分化中起重要作用。实验室发现大鼠结膜和培养的大鼠杯状细胞上表达EGFR;组胺可以诱导正常人支气管上皮细胞中的EGFR激活,而EGFR在小鼠的哮喘模型中介导了气道高反应性和重塑。因此我们推测组胺可以通过激活EGFR引起结膜杯状细胞分泌,而且组胺是增加EGFR的磷酸化从而激活EGFR的,并进一步探讨其调控杯状细胞分泌的机制。从而为今后深入研究杯状细胞在过敏性鼻结膜炎的免疫调节作用以及预防和治疗过敏性鼻结膜炎开辟新的途径。
  结膜瘢痕性疾病是由物理及化学损伤、手术、感染、免疫性眼皮肤粘膜异常、药物和各种系统性疾病引起的一大类眼科疾病。对于严重的结膜瘢痕性疾病的外科治疗目前仍非常棘手。为了解决结膜供体材料缺乏的难题,一些天然或人工合成的聚合支架,作为体外细胞扩增的细胞外基质的替代物,已经被广泛研究。然而研究发现已有的一些支架上培养的结膜杯状细胞的数量很有限。因此我们研究的另一个目标是开发一种适合杯状细胞生长的细胞外基质替代物并探讨杯状细胞生长的培养方法。我们制作了4种生物聚合物(包括2种水凝胶、2种丝蛋白膜)和4种静电纺丝聚合物,探讨它们作为细胞外基质的替代物对于自体杯状细胞的扩增的作用。
  因此,我们的研究主要包括以下步骤:一、体外分离、培养和传代大鼠结膜杯状细胞,观察其形态、结构等生物学特征,为后续研究提供有效的细胞模型。二、研究组胺是否可以通过激活EGFR引起结膜杯状细胞分泌,确定组胺是否增加EGFR的磷酸化从而激活EGFR,探明调控杯状细胞分泌的机制,从而进一步阐明杯状细胞在过敏性鼻结膜炎中的免疫调节作用。三、制备和研究可以替代结膜细胞外基质的聚合物支架,为结膜杯状细胞的自体扩增提供底物,探讨杯状细胞在结膜移植中的应用。
  第一部分:大鼠结膜杯状细胞的分离、培养、传代及鉴定
  目的:
  体外分离、培养和传代大鼠结膜杯状细胞,观察其形态、结构等生物学特征,并进行原代及传代细胞的鉴定和纯度分析,为后续实验提供细胞模型。
  方法:
  1.取大鼠穹隆部结膜,加入含10%胎牛血清的RPMI1640培养液中行组织块培养,5-7d后酶消化法传代。在光学显微镜下观察原代及传代细胞的形态及生长情况。
  2.对原代培养的细胞行细胞角蛋白CK4和CK7标记染色,鉴定杯状细胞。用Image J软件计算原代杯状细胞的纯度。
  3.对传代的细胞行凝集素UEA-I免疫组化染色及CK7标记染色,鉴定杯状细胞。用Image J软件计算第1代杯状细胞的纯度。
  结果:
  1.在细胞培养的24h内,组织块周边可见有贴覆的细胞。36-48h后,鹅卵石样的杯状细胞清晰可见。在原代培养的5-7d,杯状细胞围绕在组织块周围形成环形结节。杯状细胞大小相近,在显微镜下可见其表面有粘蛋白小滴。用酶消化法传代后,第一代的细胞在形态上与原代相似。
  2.原代细胞的免疫组化结果显示,所培养的细胞CK4阴性,CK7染色阳性,证明所培养的细胞为杯状细胞。对3个不同来源的结膜组织的标本进行染色计算,CK7阳性的细胞占97.3±2.0%,CK4阳性的细胞占0.1±0.1%。
  3.第一代细胞的免疫组化结果显示,对3个不同来源的结膜组织的标本进行染色计算,传代培养的第一代杯状细胞中UEA-I染色阳性细胞占91.2±2.7%,CK7染色阳性细胞占92.4±3.2%,进一步证明传代后的杯状细胞仍保留有原代的功能和特性,且具有较高纯度。
  结论:
  大鼠穹窿部结膜可以成功培养出杯状细胞,传代细胞仍保持原代细胞特性,且纯度较高。为今后进一步研究杯状细胞相关的眼表疾病提供有效的细胞模型。
  第二部分:组胺通过激活EGFR刺激结膜杯状细胞分泌粘蛋白的实验研究
  目的:
  研究组胺是否可以通过激活EGFR引起结膜杯状细胞分泌,确定组胺是否增加EGFR的磷酸化从而激活EGFR,探明调控杯状细胞分泌的机制,从而进一步阐明杯状细胞在过敏性鼻结膜炎中的免疫调节作用。
  方法:
  1.细胞培养:取大鼠穹窿部结膜,分离、培养杯状细胞并传代。通过用抗细胞角蛋白CK7(检测杯状细胞体)和凝集素UEA-1(检测杯状细胞分泌产物)的抗体的染色来鉴定。所有实验中使用的细胞均为第一代杯状细胞。
  2.分泌实验:将杯状细胞与EGFR拮抗剂Tyrphostin AG1478(10-8-10-6M)预孵30min,接着分别用组胺(10-7-10-5M)及组胺4种受体亚型(H1R、H2R、H3R和H4R)激动剂的不同浓度(10-6M、10-4M、10-6M、10-5M)刺激2h,应用酶联凝集素测定法(ELLA)测量杯状细胞分泌功能。
  3.SiRNA实验:使用100nM EGFR siRNA干扰EGFR表达后,再应用酶联凝集素测定法(ELLA)测量组胺对杯状细胞分泌功能的影响。
  4.细胞内钙离子浓度[Ca2+]i测定实验:使用340nm和380nm的波长和505nm的发射波长的比率成像系统进行细胞内钙离子浓度测量。将杯状细胞与EGFR拮抗剂Tyrphostin AG1478或基质金属蛋白酶抑制剂TAPI-1预孵30min,加入组胺及其4种受体亚型激动剂后,实时收集数据。观察细胞内钙离子浓度的变化。
  5.Western印迹法:组胺(10-6M)刺激杯状细胞1min、5min、30min及60min,使用针对结合杯状细胞的磷酸化EGFR的特异性抗体,运用Western印迹法检测磷酸化EGFR的含量。
  结果:
  1.10-7M、10-6M、10-5M三种不同浓度的组胺刺激杯状细胞粘蛋白分泌量显着增加,10-7M和10-6M两种浓度的Tyrphostin AG1478显著阻断10-6M组胺对结膜杯状细胞的刺激作用,大分子糖化合物的相对分泌量从2.11±0.10倍分别下降到1.21±0.01和1.11±0.30倍(P<0.05)。
  2.100nM EGFR siRNA成功地沉默了EGFR蛋白的表达,并且显著降低了组胺刺激的结膜杯状细胞的粘蛋白分泌,大分子糖化合物的相对分泌量从1.83±0.22倍下降到1.29±0.06倍(P<0.05)。
  3.不同浓度的Tyrphostin AG1478(10-8、10-7、10-6M)可以阻断4种组胺受体亚型激动剂刺激引起的杯状细胞粘蛋白分泌增加,差异有统计学意义。
  4.组胺及其4种受体亚型激动剂都明显增加杯状细胞[Ca2+]i。EGFR拮抗剂Tyrphostin AG1478(10-8M和10-7M)预孵育30min后,各实验组杯状细胞[Ca2+]i均明显下降,差异有统计学意义。
  5.基质金属蛋白酶抑制剂TAPI-1与杯状细胞预孵育30min后,明显抑制了组胺、H1、H2及H4受体激动剂刺激引起的杯状细胞[Ca2+]i的增加,差异有统计学意义。
  6.组胺刺激杯状细胞30min及60min后,运用Western印迹法检测发现,磷酸化EGFR的含量相对空白对照组分别增加了3.43±0.16和2.32±0.32倍(P<0.05),磷酸化的峰值时间点为30min。
  结论:
  1.EGFR拮抗剂Tyrphostin AG1478可以阻断组胺刺激结膜杯状细胞的粘蛋白分泌。组胺通过增加EGFR的磷酸化作用激活EGFR。
  2.组胺及其受体亚型激动剂刺激杯状细胞增加[Ca2+]i, EGFR拮抗剂Tyrphostin AG1478能够阻断此反应。说明组胺是借助EGFR信号通路增加[Ca2+]i,从而引起杯状细胞分泌粘蛋白。
  3.基质金属蛋白酶抑制剂TAPI-1阻断了组胺及其受体亚型激动剂刺激引起的杯状细胞[Ca2+]i增加。说明组胺增加[Ca2+]i是借助基质金属蛋白酶释放活化的EGF,然后与EGFR结合完成的。
  4.组胺及其受体亚型激动剂通过EGFR信号通路引起杯状细胞分泌,杯状细胞参与眼的免疫调节,因此我们在过敏性鼻结膜炎引起粘蛋白分泌异常的治疗上,杯状细胞及其EGFR可以作为靶目标给予更多的关注和研究。
  第三部分:人工聚合支架作为细胞外基质促使自体结膜杯状细胞扩增的实验研究
  目的:
  制备和研究可以替代结膜细胞外基质的聚合物支架,为人结膜杯状细胞的自体扩增提供底物。
  方法:
  1.制备4种生物聚合物和4种静电纺丝聚合物支架。4种生物聚合物包括是:重组人胶原蛋白(RHC)水凝胶、重组人胶原-磷酰胆碱(RHC-MPC)水凝胶、多聚赖氨酸(PDL)包覆的丝蛋白膜、精氨酸甘氨酸天冬氨酸(RGD)修饰的丝蛋白膜。4种静电纺丝聚合物支架包括:原位交联Collagen支架、聚丙烯酸(PAA)、聚己内酯(PCL)和聚乙烯醇(PVA)。
  2.将人结膜组织在各种支架上培养9-15d。使用活/死细胞试剂盒测定各个支架上的细胞活力。对于水凝胶和丝蛋白膜支架,使用Image J1.48v软件计算活细胞数、死细胞数和细胞总数;对于静电纺丝支架,通过扫描得到共焦Z系列,然后通过Image Pro Plus v.7软件基于荧光强度和细胞大小来计数细胞。
  3.细胞在生物聚合物(水凝胶及丝蛋白膜)上培养9d,在静电纺丝支架上培养15d后,观察细胞生长情况,使用Spot Advanced Plus软件计算组织块大小和细胞生长面积,并比较各个支架上的细胞倍增生长情况。
  4.通过免疫组化方法鉴定CK7和CK4阳性细胞的表达,从而确定是否在聚合物支架上培养细胞会影响到细胞的表型。分别用Image J1.48v软件和Image Pro Plus v.7软件计算生物聚合物支架上及静电纺丝聚合物上DAPI核染色阳性的总细胞数及CK7和CK4阳性细胞。
  结果:
  1.应用电子扫描显微镜记录每种聚合物支架的图像。两种水凝胶具有层状排列的胶原纤维结构,类似人类角膜的结构。RGD丝蛋白膜与PDL丝蛋白膜没有形态上的差异。Collagen、PAA、PCL和PVA的平均纤维直径分别为1.80±0.66、0.39±0.10、4.74±0.58和0.84±0.32μm。
  2.聚合物支架对细胞活力的影响实验显示:Cover-slip、RHC、RHC-MPC、RGD丝蛋白膜、PDL丝蛋白膜、PAA和PET上生长的大多数细胞是活细胞。PCL上的活细胞最少,仅为3.6±2.2%。PVA支架上的组织块在培养过程中均脱离。
  3.聚合物支架对细胞生长的影响实验显示:RHC、RHC-MPC、RGD丝蛋白膜和PDL丝蛋白膜上的杯状细胞倍增生长分别为19.2±5.7、50.3±14.0、22.4±1.5和27.8±10.2倍。组间差异无统计学意义。对于静电纺丝支架,在PAA和PCL上的倍数生长分别为4.3±2.4和2.3±0.3倍。在培养过程中PVA上的所有结膜组织块脱离,Collagen支架上杯状细胞的培养只有一次是成功的,倍增生长为3.7倍。
  4.聚合物支架对细胞类型的影响实验显示:大多数支架都成功地生长出CK7阳性细胞以及少量CK4阳性细胞。由于细胞缺乏对PVA支架的附着能力,以及Collagen支架太过脆弱不易操作处理,这两种支架没有进行免疫组化研究。
  结论:
  1.结膜组织和杯状细胞均可以在RHC水凝胶、RHC-MPC水凝胶、RGD丝蛋白膜和PDL丝蛋白膜这四种生物聚合支架上附着和生长,且杯状细胞活性及生长率都较高。
  2.四种不同的纳米材料Collagen、PVA、PAA和PCL支架中,Collagen支架由于其非常柔软和脆弱,限制了它的使用。PVA支架不能使结膜组织贴附。PAA上可以附着结膜组织,但细胞的增殖有限。PCL支架上杯状细胞的活性以及生长率都比较低。
  3.生物聚合物(水凝胶和丝蛋白膜)支架比静电纺丝支架提供更好的细胞粘附、增殖和分化,可以用于结膜杯状细胞扩增。一旦未分化和复层的鳞状细胞也可以在生物聚合物上扩增,那么这些支架将可能最终用于结膜移植。
[硕士论文] 李赟
耳鼻咽喉科学 山西医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  通过对45例真菌性鼻-鼻窦炎进行临床分析,阐述该疾病诊疗方案及预后评估。
  方法:
  回顾性分析2014年2月到2017年3月收治我科患者,且确诊为真菌性鼻-鼻窦炎的临床资料45例,其中侵袭性真菌性鼻窦炎8例,非侵袭性真菌性鼻窦炎37例。通过分析其不同的临床表现,病程发展,影像学资料,治疗方案,手术方式方法,是否辅助药物治疗,预后评估。所有病例均行鼻窦CT、鼻内镜检查,其中6例行鼻窦MRI检查。所有45例均行鼻内镜手术(2例为泪前隐窝入路,10例辅助以下鼻道开窗,其余为单纯鼻窦开放),术后行病理检查。于术后2周、1个月、2个月、半年、1年、3年行鼻内镜换药及复查。着重分析3例具有典型特征或特殊意义的患者的病例资料,探讨其临床特征对诊断的意义,治疗方法对预后的评估。
  结果:
  45例均行鼻内镜手术,且手术过程顺利,术后3-5天痊愈出院,术后随访3-36个月,手术窦腔开放良好,术腔上皮化,未见复发,且头痛、鼻塞、鼻腔异常分泌物等症状基本控制。
  结论:
  根据FBS分类,治疗的目的、治疗方案、预后不尽相同,诊疗过程中的明确诊断、准确分类、规范化治疗显得非常重要。
[硕士论文] 郭清华
中医五官科 南京中医药大学 2017(学位年度)
摘要:目的:通过动物实验观察温肺止流丹对变应性鼻炎大鼠症状的改善,以及其血清中IL-4、IFN-γ含量的影响,观察温肺止流丹治疗变应性鼻炎的疗效,并探讨其治疗的可能机制。
  方法:40只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、温肺止流丹组、氯雷他定糖浆组,每组各10只,用卵清蛋白将实验组大鼠制作成变应性鼻炎模型,连续14天分别给予对应的药物,用症状评分法评价各组大鼠过敏症状,用酶联免疫吸附实验(ELASA)检测各组大鼠血清中IL-4、IFN-γ的含量,并在显微镜下观察各组大鼠鼻粘膜改变。
  结果:1、大鼠鼻部症状学积分:大鼠造模后,空白组积分低于造模各组,差异均有显著性意义(P<0.01),说明造模成功。治疗组经治疗后,其积分比模型组明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05),温肺止流丹组和氯雷他定糖浆组之间无统计学差异(P>0.05)。
  2、显微镜下大鼠鼻部粘膜改变:模型组鼻粘膜组织水肿、血管扩张,大量嗜酸性粒细胞浸润,温肺止流丹组、氯雷他定糖浆组及对照组则无上述改变。
  3、大鼠血清IL-4、IFN-γ的含量:温肺止流丹组和氯雷他定糖浆组血清IL-4的含量较模型组偏低,差异有统计学意义(P<0.05),温肺止流丹组和氯雷他定糖浆组血清IFN-γ较模型组偏高,差异有统计学意义(P<0.05),温肺止流丹组和氯雷他定糖浆组两者血清中IL-4、IFN-γ的含量无统计学差异(P>0.05)。
  结论:1、温肺止流丹能改善变应性鼻炎大鼠的症状;2、温肺止流丹能改善大鼠鼻粘膜过敏改变,减少嗜酸性粒细胞在鼻粘膜的汇集,从而达到治疗的目的;3、温肺止流丹可降低变应性鼻炎大鼠血清IL-4的含量,同时升高血清IFN-γ的含量,可能为温肺止流丹治疗变应性鼻炎的机制之一。
[硕士论文] 王曼
中医五官科学 南京中医药大学 2017(学位年度)
摘要:变态反应性鼻炎简称变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR),是常见的非特异性免疫性疾病。自1997年世界卫生组织(Word Health Organization,WHO)提出对变应性疾病应采取避免接触变应原、规范的药物治疗、变应原特异性免疫治疗(Allergen specific immunotherapy,ASIT)和患者教育的“四位一体”综合治疗策略[1],变应原的特异性免疫治疗便得到临床的推广与应用。随着中西医联合治疗模式的发展,中西医药物联合治疗变应性鼻炎的研究不在少数,而中药联合免疫治疗的研究较有限,本研究旨在研究对于变应性鼻炎的治疗,中药联合舌下免疫治疗的协同作用,以指导临床应用。
  目的:通过中药联合粉尘螨滴剂舌下免疫与单纯粉尘螨滴剂舌下免疫在治疗中-重度持续性变应性鼻炎的近期临床疗效的对比,探讨中药联合舌下免疫治疗的安全性及有效性,为中西医联合治疗变应性鼻炎提供新的治疗思路及方法。
  方法:随机选取符合纳入标准的80例5~50岁中-重度持续性变应性鼻炎患者,分为治疗组(40例)和对照组(40例),治疗组使用益气温阳方联合粉尘螨滴剂舌下免疫治疗,对照组采用粉尘螨滴剂舌下免疫治疗,分别治疗6个月后,通过两组患者鼻部症状总评分(TNSS)、药物总评分(TMS)以及视觉模拟量表评分(VAS)评价两种方法的近期疗效。
  结果:两组患者治疗后1月,鼻部症状均呈加重局势,TNSS与VAS较前无明显差异,组间对比无统计学意义,但在TMS评分上,治疗组较前降低,对照组则无明显变化,组间对比具有统计学意义;治疗后2、3月后,治疗组在改善上述评分方面均优于对照组(P<0.05);治疗后6月,两组治疗较治疗前均有改善,具有统计学意义。组间对比,治疗组在TNSS评分方面优于对照组(P<0.05),但在VAS及TMS评分上无统计学意义。经过治疗6个月后,治疗组有效率为92.20%,对照组有效率为72.22%,两组对比具有统计学意义,中药益气温阳方联合舌下免疫治疗疗效明显优于舌下免疫治疗。
  结论:中药益气温阳方联合舌下免疫疗法可以有效减轻患者的过敏症状、减少用药及发作频率,是为中西医结合治疗中-重度持续性变应性鼻炎的良好方法,值得临床推广。
[硕士论文] 李小蓓
中医五官科学 南京中医药大学 2017(学位年度)
摘要:目的:鼻渊合剂是江苏省中医院的院内制剂,在临床治疗急慢性鼻窦炎效果确切。本实验通过观察鼻渊合剂对大鼠急性鼻窦炎模型治疗前后症状、体征,以及对其鼻窦黏膜组织中P38MAPK信号通路、IL-9、IL-10水平的影响,分析口服鼻渊合剂治疗急性鼻窦炎的效果及作用机制。希望该实验可以为治疗急性鼻窦炎提供新的思路及客观依据,更好地应用于临床治疗。
  方法:65只SD大鼠,雌雄各半,分为空白组(不造模不给药)5只(雌3只,雄2只)和模型组(造模给药)60只(雌30只,雄30只),模型组分为中药(鼻渊合剂)实验组、西药(克拉霉素分散片+桉柠蒎肠溶软胶囊)对照组及生理盐水对照组各20只(雌10只,雄10只)。采用改良后的Hinni法对模型组大鼠造模,造模成功后对大鼠进行灌胃处理,分别在造模完成后第1天(记为0d)及造模完成后1周、2周、3周(记为7d,14d,21d)处死大鼠,取鼻窦黏膜,采用Western blotting法检测黏膜组织中的p-p38、IL-9、IL-10水平。
  结果:1.空白组与模型组(包括生理盐水对照组、西药对照组、中药实验组)大鼠外周血白细胞计数有统计学差异(P<0.05),但模型组大鼠的白细胞计数平均值在正常范围内。2.经灌胃处理,西药对照组大鼠在造模完成后1周开始症状评分低于生理盐水对照组,两者有统计学差异(P<0.05);中药实验组大鼠在造模完成后2周开始症状评分开始低于生理盐水对照组,差异有统计学意义(P<0.05);直至造模后第3周中药实验组及西药对照组的症状评分均低于生理盐水对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但中药实验组与西药对照组急性鼻窦炎症状评分差异无统计学意义(P>0.05)。3.中药实验组及生理盐水对照组大鼠鼻窦黏膜中p-p38含量组内比较均无统计学差异(P>0.05),西药对照组组内比较有统计学意义(P<0.05)。4.中药实验组及生理盐水对照组大鼠鼻窦黏膜中IL-9含量组内比较,统计学有差异(P<0.05),西药对照组组内比较无统计学差异(P>0.05),中药实验组与生理盐水对照组进行组间比较,统计学无差异(P>0.05)。5.中药实验组及西药实验组大鼠鼻窦黏膜中IL-10含量组内比较,统计学有差异(P<0.05),生理盐水对照组组内比较,无统计学意义(P>0.05),中药实验组与生理盐水对照组及西药对照组进行组间比较,统计学无差异(P>0.05)。
  结论:鼻渊合剂可以改善大鼠急性鼻窦炎症状,起效较西药慢。但鼻渊合剂对大鼠鼻窦黏膜中p-p38、IL-9、IL-10水平无影响。
[博士论文] 吴博
中西医结合临床 福建中医药大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  本课题以变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)豚鼠及体外分离的大鼠鼻黏膜成纤维细胞为研究对象,采取体内和体外相结合的研究方法,研究分析Fyn-STAT5信号通路在AR发病中的作用,并应用醒鼻凝胶滴鼻剂进行干预,以阐明醒鼻凝胶滴鼻剂干预变应性鼻炎的作用机制,为提高变应性鼻炎的临床疗效奠定实验基础。
  方法:
  1.醒鼻凝胶滴鼻剂干预AR豚鼠模型及对Fyn-STAT5信号通路影响的实验研究
  选取健康3月龄清洁级豚鼠60只,雌雄各半,随机分为空白对照组(A组,15只)和模型组(45只)。模型组采用卵清蛋白(OVA)和Al(OH)3混和液腹腔注射的方法建立AR模型,造模成功后依体重、性别按分层随机法分为AR模型组(B组)、醒鼻凝胶滴鼻剂治疗组(C组)和雷诺考特鼻喷雾剂对照组(D组)。给药从腹腔注射后第2天开始,A、B两组用生理盐水滴鼻,C组用醒鼻凝胶滴鼻剂原液50μl滴鼻,D组用布地奈德鼻喷雾剂原液50μl滴鼻,每天3次,连续11天。激发时A组用生理盐水50μl滴鼻,B、C、D组用2%OVA溶液滴鼻。激发从腹腔注射后第4天开始,隔日1次,共5次。给药结束后将豚鼠致死取主动脉血,采用ELISA方法检测血清IL-10、MMP10水平。取豚鼠鼻粘膜,用HE染色法观察鼻黏膜形态,免疫组化方法检测鼻黏膜CD19、CD23蛋白水平的表达,real-time PCR方法检测MCP-1、MMP-10、TGF-β1 mRNA水平的表达,Western blot方法检测Fyn、STAT5的蛋白水平表达。
  2.醒鼻凝胶滴鼻剂干预AR大鼠模型对鼻黏膜成纤维细胞Fyn-STAT5信号通路影响的实验研究
  选取健康清洁级大鼠10只,鼠龄2个月,雌雄各半,体重150g-250g,按分层随机法分为正常组(5只)和模型组(5只);NF-κB基因敲除大鼠5只,雌性3只,雄性2只,40日龄,体重130g-200g。模型组大鼠和NF-κB基因敲除AR大鼠的模型建立方法同体内实验。大鼠处死后分离两侧鼻黏膜,分离成纤维细胞,采用差速贴壁法纯化细胞,然后从形态学角度观察成纤维细胞形态,用细胞免疫化学方法检测成波形蛋白相关抗原。将成纤维细胞分为正常大鼠鼻黏膜成纤维细胞组(A组)、AR大鼠鼻黏膜成纤维细胞组(B组)、NF-κB基因敲除AR大鼠成纤维细胞组(C组);NF-κB基因敲除+TGF-β1组(D组)、NF-κB基因敲除+醒鼻凝胶滴鼻剂组(E组)和NF-κB基因敲除+布地奈德鼻喷雾剂组(F组)。各组细胞分别干预12小时、24小时和48小时,干预结束后收集细胞并提取蛋白,用Western blot法检测各组Fyn、STAT5的蛋白表达水平。
  结果:
  1.AR豚鼠模型成功率为86.67%,45只实验豚鼠脱落6只,其中2只死亡,3只因评分<5分被剔除。
  2.AR豚鼠鼻黏膜HE染色可见嗜酸性细胞浸润,醒鼻凝胶滴鼻剂和布地奈德鼻喷雾剂干预后均能显著改善鼻黏膜嗜酸性细胞的浸润(P均<0.05),并能抑制CD19和CD23的表达(P均<0.05),醒鼻凝胶滴鼻剂组和布地奈德鼻喷雾剂组比较则无显著差异(P>0.05)。
  3.醒鼻凝胶滴鼻剂和布地奈德鼻喷雾剂干预AR豚鼠均能降低血清IL-10、MMP10、TGF-β1、MCP-1和MMP10 mRNA水平(P均<0.05),并能抑制Fyn表达、上调STAT5表达(P均<0.05),醒鼻凝胶滴鼻剂组和布地奈德鼻喷雾剂组比较则无显著差异(P>0.05)。
  4.经NF-κB基因敲除后的AR大鼠鼻黏膜成纤维细胞Fyn表达受到明显抑制,STAT5表达明显上调。(P均<0.05)
  5.经TGF-β1干预的AR大鼠鼻黏膜成纤维细胞Fyn表达受到明显抑制,STAT5表达明显上调。(P均<0.05)
  6.醒鼻凝胶滴鼻剂组和布地奈德鼻喷雾剂组均能明显抑制体外AR大鼠鼻黏膜成纤维细胞Fyn-STAT5的信号通路(P均<0.05),而二组之间比较无显著差异(P>0.05)。
  结论:
  1.醒鼻凝胶滴鼻剂通过降低炎性介质、细胞因子的产生,以及抑制IgE受体的合成,起到抑制肥大细胞活化和脱颗粒的发生,达到治疗AR的作用。
  2.醒鼻凝胶滴鼻剂通过抑制Fyn-STAT5信号通路的方式,抑制肥大细胞活性,减轻变态反应的发生,达到治疗AR的作用。
  3.NF-κ B和TGF-β1通过介导Fyn-STAT5信号通路的方式参与鼻黏膜成纤维细胞的活化,并且对该信号通路有抑制作用。
  4.醒鼻凝胶滴鼻剂对体外鼻黏膜成纤维细胞有抑制作用,这种抑制作用是通过调节Fyn-STAT5信号通路的方式发挥效,从而抑制鼻黏膜成纤维细胞的活化,抑制AR的发生。
[硕士论文] 卢文促
针灸推拿学 福建中医药大学 2017(学位年度)
摘要:目的:
  本课题通过观察姜片推痧联合三伏贴治疗过敏性鼻炎患儿的临床疗效,为临床治疗小儿过敏性鼻炎提供一种简便、安全、有效的综合治疗方法。
  方法:
  采用随机对照试验的方法,将符合诊断、纳入、排除等标准的过敏性鼻炎患儿64例分为治疗组和对照组两组,每组各32例。治疗组接受姜片推痧联合三伏贴治疗,分别于2016年的三伏天期间(头伏前加强:2016年7月7日;初伏:2016年7月17日;中伏:2016年7月27日;末伏:2016年8月16日;末伏后加强:2016年8月26日,共为5次。对照组予冲服氯雷他定颗粒,一次5mg,每天1次。两组疗程均为8周。治疗前后对患者进行鼻炎症状评分、RQLQ评分以及血清IgE含量测定,同时用《过敏性鼻炎处理袖珍参考2009》中的过敏性鼻炎评分标准对两组治疗后疗效进行判定。通过对两组资料的收集整理,运用SPSS20.0统计分析软件对数据进行统计学处理。最终根据结果分析,比较两组的疗效。
  结果:
  研究结束后,治疗组完成研究例数31例,对照组完成研究例数30例。统计分析结果如下:
  1、基线资料:比较两组患者的一般资料(性别、年龄、体重、病程),数据间差异均无统计学意义(P>0.05);比较两组患者治疗前的观察指标(鼻炎症状评分、RQLQ评分、血清IGE含量),数据间差异均无统计学意义(P>0.05)。说明两组患者基线数据具有可比性。
  2、临床疗效:治疗组有效28例,无效3例,总有效率90.3%;对照组有效19例,无效11例,总有效率63.3%。两组疗效比较有统计学差异(P<0.05),治疗组优于对照组。
  3、鼻炎症状评分:两组患者治疗后的鼻炎症状评分均比治疗前有所下降(P<0.05),治疗组鼻炎症状评分下降幅度比对照组大。两组患者治疗前后鼻炎症状评分差值比较有统计学差异(P<0.05),治疗组优于对照组。
  4、 RQLQ评分:两组患者治疗后的RQLQ评分均比治疗前有所下降(P<0.05),对照组RQLQ评分下降幅度比治疗组大。两组患者治疗前后RQLQ评分差值比较有统计学差异(P<0.05),对照组组优于治疗组。但治疗后3个月随访,治疗组RQLQ评分下降幅度比对照组大,治疗组组优于对照组。
  5、血清IgE含量:两组患者治疗后的血清IgE含量均比治疗前有所下降(P<0.05),治疗组血清IgE含量下降幅度比对照组大。两组患者治疗前后的血清IgE含量差值比较有统计学差异(P<0.05),且治疗组优于对照组。
  结论:
  1、姜片推痧联合三伏贴对治疗小儿过敏性鼻炎,能有效改善喷嚏、流涕、鼻塞等,且能在一定程度上提高患儿生活质量,从长远来看,疗效优于冲服氯雷他定颗粒。
  2、姜片推痧联合三伏贴是一种简便、安全、有效的治疗方法。
[硕士论文] 庄翔莉
中医儿科学 福建中医药大学 2017(学位年度)
摘要:目的:通过观察中药醒鼻凝胶滴鼻剂干预变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)豚鼠鼻黏膜成纤维细胞对Fyn-STAT5信号通路的影响,寻找醒鼻凝胶滴鼻剂治疗AR的作用靶点,进一步阐明醒鼻凝胶滴鼻剂的作用机制,为提高AR的临床疗效提供实验依据。
  方法:应用卵白蛋白致敏法制备AR豚鼠模型,体外分离培养豚鼠鼻黏膜成纤维细胞,并采用免疫细胞化学法进行鉴定;采用不同浓度转化生长因子-β1(transforming growthfactor-beta1,TGF-β1)干预成纤维细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)比色法检测TGF-β1干预6h、12h、24h后的细胞增殖情况,以筛选出TGF-β1干预成纤维细胞的最佳条件。将豚鼠鼻黏膜成纤维细胞分为正常组(A组)、模型组(B组)、TGF-β1干预组(C组)、中药醒鼻剂干预组(D组)和西药雷诺考特干预组(E组),分别应用TGF-β1、醒鼻浸膏剂、雷诺考特分组干预C、D、E组的AR豚鼠鼻黏膜成纤维细胞;采用real-time PCR法检测各组成纤维细胞酪氨酸蛋白激酶Fyn、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、干细胞因子(stem cell factor,SCF)的基因水平,采用Western blot法检测各组成纤维细胞的Fyn-STAT5信号变化。
  结果:
  1、免疫细胞化学染色结果显示,F3代豚鼠鼻黏膜成纤维细胞波形蛋白表达呈阳性,细胞生长曲线大致呈“S”形。
  2、MTT法筛选TGF-β1干预浓度结果提示,经25ng/ml TGF-β1干预后,细胞活力增长最明显,25ng/ml浓度干预6h后,细胞活力增长至129.356±4.354%;干预12h后,细胞活力增长至134.810±8.047%;干预24h后,细胞活力增长至143.824±4.773%(与25ng/ml浓度干预24h后比较,P25ng/ml6h<0.01,P25ng/ml12h<0.05)。
  3、Real-time PCR检测结果显示,①B组中Fyn和SCF的mRNA表达水平均明显高于A组(P均<0.01),IL-10的mRNA表达水平明显低于A组(P<0.01);②C、D、E三组分别干预12h、24h后,Fyn和SCF的mRNA表达水平均显著降低(与同时间B组比较,P均<0.01),IL-10的mRNA表达水平显著升高(与同时间段B组比较,P均<0.01);干预48h后,Fyn和SCF的mRNA表达无明显差异(与B组比较,P均>0.05),C组的IL-10 mRNA表达无明显差异(P>0.05),而D、E两组仍明显升高(与B组比较,P均<0.01);③与C组比较,D组Fyn和SCF的mRNA表达水平在干预12h后均较高(P均<0.05),干预24h后均无明显差异(P均>0.05),干预48h后D组Fyn的mRNA表达水平明显低于C组(P<0.05),而SCF的mRNA表达无明显差异(P>0.05);IL-10的mRNA表达水平在干预12h和24h后D组均明显降低(P均<0.01),干预48h后D组明显高于C组(P<0.01);④同时间段相比,D组与E组中各基因的mRNA表达均无明显差异(P均>0.05)。
  4、Western blot检测结果显示,①B组中Fyn的蛋白表达水平明显高于A组(P<0.01),信号转导和转录激活因子5(signal transduction and activator of transcription5,STAT5)的蛋白表达水平明显低于A组(P<0.01);②C、D、E三组分别干预12h、24h后,Fyn的蛋白表达水平显著降低(与同时间段B组比较,C组P均<0.01,D、E两组P12h均<0.05,P24h均<0.01),STAT5的蛋白表达水平显著升高(与同时间段B组比较,C组P均<0.01,D、E两组P12h均<0.05,P24h均<0.01);干预48h后,Fyn和STAT5的蛋白表达均无明显差异(与B比较,C、D、E三组P均>0.05);③与C组比较,D组Fyn的蛋白表达水平在干预12h、24h、48h后均无明显差异(P均>0.05),STAT5的蛋白表达水平在干预12h后低于C组(P<0.05),而干预24h、48h后均无明显差异(P均>0.05);④同时间段相比较,D组与E组中各蛋白表达均无明显差异(P均>0.05)。
  结论:1、所分离培养的鼻黏膜细胞具有典型的成纤维细胞生物学特征。2、Fyn、STAT5和SCF均与AR的发生相关;Fyn通过激活FcεRI参与肥大细胞活化,SCF通过介导JAK2的活化使STAT5发生磷酸化;STAT5激活后一方面与Fyn形成免疫复合物,激活Fyn-STAT5信号通路,促进肥大细胞脱颗粒,参与AR免疫反应,一方面又通过自身转录因子抑制B细胞更新,阻碍IgE继续合成;IL-10在AR免疫反应中具有负向调节作用。3、TGF-β1能够通过抑制Fyn-STAT5信号通路的活化来干预AR成纤维细胞,抑制AR体外免疫应答。4、醒鼻剂可能通过降低Fyn和SCF表达,阻碍FcεRI受体交联,抑制肥大细胞增殖和脱颗粒,减少组胺和各类炎性细胞因子的释放,同时通过上调STAT5,拮抗IgE合成,纠正TH1/TH2免疫失衡,从而抑制Fyn-STAT5信号传导通路,减轻AR成纤维细胞免疫反应;醒鼻剂还能通过显著上调IL-10,抑制各类促炎因子产生,降低气道炎症反应,调节机体免疫功能。
[硕士论文] 张萌
耳鼻咽喉科学 延边大学 2017(学位年度)
摘要:目的:通过观察白细胞介素17C(interleukin-17C,IL-17C)在鼻息肉中的表达,探讨IL-17C在慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉发病过程中的作用机制。
  方法:收集2016年1月-2016年6月于我院耳鼻咽喉头颈外科就诊并行鼻内窥镜下鼻窦手术治疗的慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasalpolyps,CRSwNPs)患者的鼻息肉标本50例(鼻息肉组),同期住院的鼻中隔偏曲患者行鼻中隔成形术并切除的中鼻甲黏膜标本10例(对照组)。根据HE染色结果,将鼻息肉分为嗜酸性粒细胞型和非嗜酸性粒细胞型。应用免疫组织化学染色法检测IL-17C在鼻息肉组织以及对照组黏膜中的表达,分析不同类型鼻息肉中IL-17C表达水平的相关性。
  结果:1.在鼻息肉组中,嗜酸性粒细胞型鼻息肉24例(48%),非嗜酸性粒细胞型鼻息肉26例(52%)。
  2..IL-17C主要在鼻息肉组织的上皮细胞中表达。IL-17C在鼻息肉组的表达水平明显高于对照组,IL-17C在嗜酸性粒细胞型鼻息肉中的阳性表达率为87.5%,在非嗜酸性粒细胞型中的阳性率为73.1%,在对照组中的阳性率为20%,嗜酸性粒细胞型鼻息肉及非嗜酸性粒细胞型分别与对照组相比,存在显著的统计学差异(P<0.01)。
  3.IL-17C在嗜酸性粒细胞型鼻息肉的上皮细胞中的表达强度评分高于非嗜酸性粒细胞型,差异具有统计学意义(P<0.05)。
  结论:IL-17C是参与CRSwNPs发病的重要细胞因子,有望成为鼻息肉治疗的一个新的靶向。
[硕士论文] 张元
针灸推拿学 贵州医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:观察穴位注射对卵清蛋白(OV albumin,OVA)致敏的变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)大鼠血清白细胞介素17(IL-17)、鼻黏膜叉头转录因子3(Foxp3) mRNA及蛋白、鼻黏膜维甲酸相关孤儿受体(RORγt)蛋白表达的影响,从Th17/Treg平衡角度探讨穴位注射治疗变应性鼻炎的作用机理,为临床治疗AR提供实验依据。
  方法:SD大鼠40只,随机选取8只为正常组,其余采用卵清蛋白致敏复制AR大鼠模型。模型成功的大鼠保留24只,随机分为模型组、非经非穴注射组(非经非穴组)、穴位注射组(穴注组),每组8只。观察治疗前后大鼠的一般行为学变化并评分,实时荧光定量RT-PCR法检测鼻黏膜Foxp3mRNA表达水平,免疫组织化学法观察鼻黏膜Foxp3、RORγt蛋白表达水平,ELISA法测定血清IL-17的含量。
  结果:1.行为学症状评分:造模结束后,模型组、非经非穴组、穴注组症状评分均高于5分,并高于正常组(P<0.05),显示造模成功。治疗后组间比较:与模型组比较,穴注组症状评分降低(P<0.05),非经非穴组症状评分略低,但差异不具统计学意义(P>0.05);与非经非穴组比较,穴注组症状评分降低(P<0.05)。治疗后组内比较:正常组、模型组治疗前后比较,症状评分变化差异无统计学意义(P>0.05);非经非穴组治疗后症状评分比治疗前有降低,但差异无统计学意义(P>0.05);穴注组治疗后症状评分较治疗前明显降低(P<0.05)。2.实时荧光定量RT-PCR检测:与正常组比较,模型组、非经非穴组、穴注组鼻黏膜Foxp3 mRNA表达均降低(P<0.05);与模型组比较,穴注组鼻黏膜Foxp3mRNA表达升高(P<0.05),非经非穴组鼻黏膜Foxp3mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);与非经非穴组相比,穴注组鼻黏膜Foxp3mRNA表达升高(P<0.05)。3.免疫组化检测:与正常组比较,模型组、非经非穴组、穴注组鼻黏膜Foxp3阳性细胞表达均降低(P<0.05);与模型组比较,穴注组鼻黏膜Foxp3阳性细胞表达升高(P<0.05),非经非穴组鼻黏膜Foxp3阳性细胞表达差异无统计学意义(P>0.05);与非经非穴组相比,穴注组鼻黏膜Foxp3阳性细胞表达升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组、非经非穴组、穴注组鼻黏膜RORγt阳性细胞表达均升高(P<0.05);与模型组比较,穴注组鼻黏膜RORγt阳性细胞表达降低(P<0.05),非经非穴组鼻黏膜RORγt阳性细胞表达差异无统计学意义(P>0.05);与非经非穴组相比,穴注组鼻黏膜RORγt阳性细胞表达显著降低(P<0.05)。4.ELISA检测:与正常组比较,模型组、非经非穴组血清IL-17含量均升高(P<0.05),穴注组血清IL-17含量差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,穴注组血清IL-17含量显著降低(P<0.05),非经非穴组血清IL-17含量差异无统计学意义(P>0.05);与非经非穴组相比,穴注组血清IL-17含量显著降低(P<0.05)。5.各检测指标间的相关性:行为学症状评分与鼻黏膜Foxp3 mRNA及Foxp3阳性细胞率呈负相关,与鼻黏膜RORγt阳性细胞率及血清IL-17含量呈正相关。
  结论:穴位注射能有效缓解变应性鼻炎大鼠的喷嚏、流涕及挠鼻症状,其机制可能是通过上调Foxp3表达,以促进Treg细胞形成,下调RORγt表达,以抑制Th17细胞分化及IL-17产生,从而调节了Th17/Treg平衡。
[硕士论文] 钟帅
耳鼻咽喉科学 贵州医科大学 2017(学位年度)
摘要:目的:通过检测鼻息肉组织中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、白细胞介素-5(IL-5)的表达和嗜酸性粒细胞(Eos)的浸润情况,并采用视觉模拟量表(VAS)和Lund-Mackay评分法评估鼻息肉患者病情严重程度,分析MIF、IL-5表达与Eos浸润程度间的相关性及两因子表达与疾病严重程度间的关系,探讨MIF和IL-5在鼻息肉发生过程中的作用,并分析其可能作用途径。
  方法:采用VAS评分和Lund-Mackay评分评估鼻息肉患者病情严重程度;应用HE染色(苏木精-伊红染色法)检测鼻息肉组织、正常中鼻甲粘膜组织中EOS的浸润程度并计数;采用免疫组织化学法(SP法)检测鼻息肉组织、正常中鼻甲组织中MIF、IL-5的表达并进行计数,分析二者与疾病严重程度及EOS浸润程度的相关性。
  结果:1.EOS在鼻息肉组织中的浸润程度(39.30±4.49)个/HP明显高于在对照组中的浸润数量(7.70±3.19)个/HP,p<0.05;2.MIF在鼻息肉组织中的表达(0.3693±0.0535)明显高于对照组中的表达量(0.1557±0.0395),p<0.05;3.IL-5在鼻息肉中的表达量(0.7378±0.2262)明显高于在对照组中的表达量(0.2253±0.1061),p<0.05;4.MIF、IL-5表达与Eos浸润程度间呈正向相关性(r分别为0.793、0.843,p均<0.05);5.鼻息肉患者VAS评分与MIF、IL-5表达量间呈正相关性(r分别为0.598、0.769,p均<0.05),鼻窦CT Lund-Mackay评分与二者表达同样呈正相关性(r分别为0.613、0.626,p均<0.05)。
  结论:1.MIF、IL-5在鼻息肉组织中的高表达,说明二者共同参与了鼻息肉的发生发展;2.MIF、IL-5表达与EOS浸润程度间呈正相关,说明二者可能通过增加EOS浸润程度促使鼻息肉的形成;3.MIF、IL-5表达与患者病情严重程度间呈正相关,表明二者的表达可在一定程度上评估患者疾病的严重程度。
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