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[专利] 发明专利 CN201811100516.8
苏州大学 2018-12-21
摘要:本发明公开了一种类风湿性关节炎的外泌体miRNA标志物及试剂盒,属于生物检测技术领域。本发明提供的外泌体miR‑204‑5p序列及相应引物可以用于制备类风湿关节炎诊断试剂盒,具有很高的灵敏度与特异性,有利于推动我国类风湿性关节炎的早期诊断、预测治疗、监测复发的发展。
[专利] 发明专利 CN201811086366.X
摘要:本发明涉及一种适用于植物的Hi‑C高通量测序建库方法,包括:(1)样品冰上真空甲醛交联;(2)裂解交联后物料,释放染色质;染色质依次经SDS灭活内源酶、经MboI内切酶酶切打断获得酶切后物料;MboI内切酶的浓度为5000units/mL,酶切条件为:900rpm,37℃孵育过夜;(3)酶切后物料进行末端修复;(4)末端修复后DNA分子内连接;(5)解交联分子内连接后物料并去除未连接的末端生物素,获得纯化DNA,超声波随机打断DNA成利于测序的片段大小从而获得DNA测序文库。该方法通过设计合适的甲醛交联条件、内源酶灭活条件以及合适的工具酶,解决了植物细胞难释放细胞质、质量不好的植物样品建库效果差的技术问题,实现了植物的Hi‑C高通量测序建库,扩大了Hi‑C技术的适用范围。
[专利] 发明专利 CN201811087438.2
摘要:本发明涉及一种适用于细菌的Hi‑C高通量测序建库方法,该方法包:(1)样品甲醛交联;(2)液氮研磨和溶菌酶并行裂解交联后物料,释放细胞染色质;细胞染色质依次经SDS灭活内源酶、经Sau3AI核酸内切酶酶切打断获得酶切后物料;SDS灭活内源酶的条件为:65℃孵育10min后立即放置冰上;(3)酶切后物料进行末端补平;(4)末端补平后DNA分子内连接;(5)解交联分子内连接后物料并去除未连接的末端生物素,获得纯化DNA,超声波随机打断DNA成利于测序的片段大小从而获得DNA测序文库。该方法通过设计合适的内源酶灭活条件,调整灭活时间和温度,从而解决了原核生物染色质偏少、互作捕获难度大的技术问题,实现了细菌的Hi‑C高通量测序建库,扩大了Hi‑C技术的适用范围。
[专利] 发明专利 CN201811076309.3
华大生物科技(武汉)有限公司 深圳华大临床检验中心 2018-11-13
摘要:本发明公开了一种用于同时检测地中海贫血基因突变型与缺失型的试剂盒及其应用。其中该试剂盒包含多个用于扩增地中海贫血基因的扩增引物组,所述扩增引物组包括针对α珠蛋白基因和β珠蛋白基因设计的引物,其中,所述扩增引物组包括针对HBA1基因、HBA2基因、HBB基因的突变型检测引物,以及针对α地贫缺失型–α3.7、–α4.2、‑‑SEA、‑‑THAI,以及β缺失型SEA‑HPFH、中国型、中国台湾型的缺失型检测引物。利用该试剂盒能够同时检测地贫缺失型与突变型,具体地能够同时检测常见的7种缺失型与超过300种突变类型,并可以发现新的突变类型,且成本低廉,相对于现有地贫检测试剂盒优势显著。
[专利] 发明专利 CN201811067161.7
摘要:本发明涉及一种适用于PacBio测序平台的扩增子混样测序文库构建方法,针对现有PacBio核酸测序平台应用于扩增子扩增的文库构建中,存在试剂成本高、步骤复杂等技术问题,该方法基于扩增子样本的扩增原理,结合PacBio测序技术特征,针对每个待测样本在第一步扩增中引入反向互补的标签序列,使同一次扩增的扩增子都标记有标签序列,将带有不同标签的扩增子混合,标签序列在后续文库构建中一直保留,因此该方法可实现多个扩增子样品仅需一次文库构建,简化了实验操作流程,提高了建库效率,降低了测序成本。本发明在设计标签序列时,使每种样本的两个引物5’端添加的标签序列反向互补,测序时两端均可识别出标签序列,极大提高扩增子样本的标签序列识别效率。
[专利] 发明专利 CN201811025369.2
上海交通大学 2018-12-18
摘要:本发明提供了一种微量DNA样品高通量测序文库的构建技术。具体地,本发明方法包括步骤:(a)提供DNA片段和辅助核酸片段;(b)向DNA片段和辅助核酸片段两端添加接头;(c)用特异性抗体捕获、富集末端带有接头的DNA片段和辅助核酸片段;(d)用特异性酶去除所述辅助核酸片段;(e)用特异性引物对所述步骤(c)中捕获、富集的DNA片段和辅助核酸片段进行扩增,从而获得扩增产物。本发明方法更适用于少量来源的微量样品的文库构建;文库质量好,无污染;成本较低,具有较高的普遍适用性。
[专利] 发明专利 CN201810986265.1
摘要:发明属于基因测序技术领域,具体涉及一种扩增子测序文库的构建方法及引物组和试剂盒。该扩增子测序文库的构建方法包括如下步骤:获得样本DNA;利用第一引物、第二引物和第三引物对所述样本DNA进行第一PCR扩增,得到扩增产物;利用第四引物和第五引物对所述扩增产物进行第二PCR扩增,得到扩增子测序文库。该扩增子测序文库的构建方法可大大地节省试剂和工作量,降低成本,而且两轮PCR的扩增效率都很高,最终构建的扩增子测序文库具有更好的覆盖度和均一性。
[专利] 发明专利 CN201810980611.5
摘要:本发明提供了一种降尿酸分子及其筛选方法和应用,所述降尿酸分子的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;本发明通过采用噬菌体展示技术构建随机突变文库,并构建尿酸靶分子,采用亲和吸附原理对文库进行筛选,优化构建、筛选及鉴定方法和步骤,得到所述降尿酸分子,用于制备降尿酸药物,所述分子具有卓越的降尿酸功能,筛选方法简洁高效,值得推广应用,具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。
[专利] 发明专利 CN201810978923.2
摘要:本发明公开一种肠癌DNA甲基化检测基因芯片及其制作方法和应用,包括固定有相关病原体特异性探针的基因芯片、特异性引物及通用引物,所述相关病原体包括14种病原体以及一个甲氧西林抗性靶点;所述基因芯片是点阵并固定有上述15种病原体特异性探针,所述特异性引物能对上述15种病原体靶基因进行特异性扩增;所述通用引物是上述15种病原体靶基因无关的核酸序列,其中反向通用引物5’端带有荧光标记。本发明的技术方案提供了一种检测快速灵敏、准确性高的肠癌DNA甲基化检测基因芯片及其制作方法和应用。
[专利] 发明专利 CN201810957911.1
摘要:本发明涉及一种人的转醛醇酶1突变蛋白及其应用,将若干白血病患者作为研究病例,对病例进行基因检测并分析,确定出人的转醛醇酶1的突变蛋白,根据该人的转醛醇酶1突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒,为白血病的基因诊断提供指引作用,为实现白血病的诊断和治疗提供科学基础。
[专利] 发明专利 CN201810957750.6
摘要:本发明涉及一种人的5‑甲酰四氢叶酸环连接酶突变蛋白及其应用,将若干白血病患者作为研究病例,对病例进行基因检测并分析,确定出人的5‑甲酰四氢叶酸环连接酶的突变蛋白,根据该人的5‑甲酰四氢叶酸环连接酶突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒,为白血病的基因诊断提供指引作用,为实现白血病的诊断和治疗提供科学基础。
[专利] 发明专利 CN201810957968.1
摘要:本发明涉及一种人的谷胱甘肽S转移酶κ1突变蛋白及其应用,将若干白血病患者作为研究病例,对病例进行基因检测并分析,确定出人的谷胱甘肽S转移酶κ1的突变蛋白,根据该人的谷胱甘肽S转移酶κ1突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒,为白血病的基因诊断提供指引作用,为实现白血病的诊断和治疗提供科学基础。
[专利] 发明专利 CN201810959243.6
摘要:本发明涉及一种人的雌二醇17β‑脱氢酶1突变蛋白及其应用,通过将大量子宫内膜癌患者作为研究病例,对病例进行基因检测并分析,确定出人的雌二醇17β‑脱氢酶1的突变蛋白,根据该人的雌二醇17β‑脱氢酶1的突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒,为子宫内膜癌的基因诊断提供指引作用,并为疾病的诊断和治疗提供一定的理论基础。
[专利] 发明专利 CN201810959855.5
摘要:本发明涉及一种人的酰基蛋白硫酯酶2突变蛋白及其应用,通过将大量冠心病患者作为研究病例,对病例进行基因检测并分析,确定出人的酰基蛋白硫酯酶2的突变蛋白,根据该人的酰基蛋白硫酯酶2的突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒,为大量冠心病的基因诊断提供指引作用,并为相关疾病的诊断和治疗提供一定的理论基础。
[专利] 发明专利 CN201810938925.9
摘要:本发明涉及一种mRNA 3’末端混合建库的反转录引物及其用途。利用本发明的反转录引物,以总RNA为起始进行文库构建,能够改进现有技术中的测序数据质量低的问题,并实现低成本mRNA 3’末端混合建库。本发明的反转录引物对于动物和植物群体转录组的研究具有重要意义。
[专利] 发明专利 CN201810927305.5
摘要:本发明公开了一种用于鼻腔菌群检测的方法及检测试剂盒。本发明提了一种用于样本菌群检测的成套引物,包括扩增细菌16S rDNA的V4‑V5区域的引物和扩增细菌16S rDNA的V1‑V9区域的引物;本发明先采用扩增效率高、特异性强、人源同源性低的V1‑V9引物先对16S rDNA片段进行富集,然后利用巢式PCR扩增出目的区段V4V5双片段,这样克服了直接用V4V5区段扩增引物与人源基因组序列同源性较高,在针对人源gDNA含量较高的鼻腔拭子样本进行扩增时,会出现严重的非特异扩增现象的问题。
[专利] 发明专利 CN201810928386.0
摘要:本发明提供了一种羊睾丸成纤维细胞膜体系酵母cDNA文库的制备方法,包括制备羊睾丸成纤维细胞;提取羊睾丸成纤维细胞RNA;合成cDNA,进行cDNA文库均一化;cDNA与pPR3‑N载体连接,连接产物转化宿主细胞DH5α,获得羊睾丸成纤维细胞膜体系酵母cDNA文库,并进行克隆验证;筛选羊睾丸成纤维细胞膜体系酵母cDNA文库等步骤。本发明的cDNA库容量为7.5×105,片段的大小为200‑2000bp,平均长度为1000bp,文库的重组率为100%。通过利用羊口疮病毒的膜蛋白对文库进行筛选,证明了该文库是一个高质量的文库。
[专利] 发明专利 CN201810927373.1
王科嘉 2018-11-23
摘要:本发明公开了一种构建人T淋巴细胞受体β链互补决定区CDR3文库的PCR引物和方法,包括以下步骤:a.实验试剂:RNA提取试剂盒、cDNA合成试剂盒、PCR扩增酶的准备;b.利用RNA提取试剂盒提取淋巴细胞样本RNA;c.利用cDNA合成试剂盒将提取出的RNA样本反转录为cDNA,本发明能够高效的扩增TCRβ和TCRδCDR3区域,巢式PCR的方法扩增效率高达90%,可高效构建CDR3文库,解决样本中TCR模板量少的问题;利用特异性的PCR扩增酶,克服多重PCR扩增效率不均衡的现象,还原模板中CDR3的真实组成情况;利用此方法扩增的CDR3文库大小主要集中在100bp‑300bp之间,能够通过二代测序将其条带测通,有效降低其测序成本,从而了解CDR3序列的排列情况,为进一步的市场开发应用提供可能性,便于推广使用。
[专利] 发明专利 CN201810914312.1
摘要:本发明属于分子基因学领域,具体涉及一种ctDNA建库试剂盒和建库方法;包括发卡接头A、双链接头B和引物组;所述发卡接头A包括接头A1和接头A2,接头A1和接头A2的序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2,且接头A2的3′端用生物素修饰;所述双链接头B包括接头B1和接头B2,接头B1和接头B2的序列分别为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4;所述引物组包括扩增引物和接头引物,扩增引物的序列号为SEQ ID NO.5,接头引物的序列为SEQ ID NO.6‑7;本发明提供的试剂盒灵敏度高,能提高ctDNA测序通量和测序准确性。
[专利] 发明专利 CN201810913924.9
摘要:本发明提供了一种发夹状的接头以及利用所述发夹状接头同时检测DNA甲基化和单核苷酸变异的方法,属于基因变异检测和表观遗传修饰检测技术领域;所述接头具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,所述发夹状接头的5’至3’方向3位和4位上的胞嘧啶是甲基化修饰的胞嘧啶。所述方法包括以下步骤:基因组DNA片段化后进行末端修复加A尾,连接所述的发夹状接头和甲基化测序接头,重亚硫酸盐转化,PCR扩增,收集扩增产物获得测序文库;测序后进行生物信息学分析获得DNA甲基化和单核苷酸变异位点,本方法可以在只测一套数据的情况下同时精确检测DNA甲基化和单核苷酸变异,可以节省50%的成本。
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